段小红
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- IDO基因修饰的软骨细胞对T淋巴细胞增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 为检测吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)基因修饰的原代培养软骨细胞对T淋巴细胞的免疫抑制作用。将pEGFP-N1-IDO真核表达载体转染至C57小鼠原代培养的软骨细胞,体外检测IDO修饰的软骨细胞培养液中色氨酸水平的变化;使用CFSE标记技术,检测IDO修饰的软骨细胞体外混合淋巴细胞反应中对同种异体T淋巴细胞增殖的影响。结果:pEGFP-N1-IDO成功被导入原代培养的小鼠软骨细胞,荧光显微镜和流式细胞术均检测到EGFP的表达;体外实验表明,原代培养的软骨细胞上清可检测到一定量的色氨酸水平,而转染IDO 24 h后的软骨细胞上清中未检测到色氨酸,提示IDO转染的软骨细胞表达了具有活性IDO;使用CFSE标记技术,检测IDO修饰的软骨细胞体外混合淋巴细胞反应中对同种异体T淋巴细胞增殖的影响,发现IDO基因转染组96 h后总体增殖指数为1.122±0.017,单纯淋巴细胞阴性对照组为1.026±0.016,阳性单纯软骨细胞组为1.201±0.026,较阳性对照组,IDO基因组同种异体T淋巴细胞增殖得到明显抑制。IDO基因修饰的软骨细胞可以抑制T淋巴细胞的增殖。
- 段小红江逊何贤辉郑德育王晓燕史剑波许庚崔鹏程
- 关键词：软骨细胞吲哚胺2,3-双加氧酶混合淋巴细胞反应
- 脂质体介导pIDO-EGFP转染原代培养软骨细胞的初步研究被引量：3
- 2007年
- 目的:检测脂质体介导pIDO-EGFP转染原代培养的C57小鼠关节软骨细胞的瞬时表达及转染效率,建立原代培养的小鼠关节软骨细胞转染方法。方法:大肠杆菌中扩增pIDO-EGFP质粒,在最优化条件下通过lipofectamine2000TM转染试剂将pIDO-EGFP质粒转入原代培养的小鼠关节软骨细胞,应用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察其转染过程及瞬时表达情况,流式细胞术检测其转染效率。结果:质粒携带的增强型绿色荧光蛋白在转染后24h得到了明显表达,48h后流式细胞术检测其转染效率为36.43%,未影响软骨细胞贴壁过程。结论:经绿色荧光蛋白检测表明,脂质体成功地将IDO基因转染进入原代培养的软骨细胞。转染后的软骨细胞在体外仍能存活,在最优化的条件下能达到良好的瞬时转染效率,为组织工程化软骨细胞基因导入和基因修饰提供了思路。
- 段小红何贤辉崔鹏程王晓燕吴明明史剑波许庚江逊
- 关键词：软骨细胞3-双加氧酶绿色荧光蛋白
- 吲哚胺2，3-双加氧酶在移植免疫中的作用研究进展被引量：1
- 2008年
- 目的总结吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)参与免疫调节的可能机制,以及在移植免疫过程中的作用。方法广泛查阅近年国内外相关文献,对IDO分布、免疫调节机制及其在移植免疫中的作用研究进展进行回顾总结与分析。结果IDO通过降解局部组织微环境中的色氨酸、抑制宿主同种异体T细胞增殖而发挥免疫调节作用。应用转基因技术将IDO基因整合至目的细胞基因中并表达IDO,体内试验表明可明显延长异体移植物的平均存活时间。结论IDO在移植免疫中有广阔的应用前景,为提高异体移植物术后长期存活率提供了新的思路。
- 段小红崔鹏程江逊
- 关键词：吲哚胺2,3-双加氧酶基因转染移植免疫
- 体外构建气管黏膜上皮组织的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:应用组织工程原理和方法在体外构建气管黏膜上皮组织.方法:将原代兔气管上皮细胞种植在铺有鼠尾胶原的小肠黏膜下层(SIS)上培养,在体外构建气管黏膜上皮组织,培养1wk后行HE染色,对气管上皮细胞行免疫细胞学鉴定.结果:原代气管上皮细胞培养1wk后增殖旺盛,10d时上皮细胞分布范围更广.将构建的气管黏膜上皮组织行HE染色,显示有气管黏膜上皮和SIS双层结构.抗角蛋白单克隆抗体免疫细胞化学反应阳性显色率可达90%左右.结论:将铺有鼠尾胶原的SIS复合气管上皮细胞生长,成功的在体外构建出组织工程化的气管黏膜上皮组织.
- 吴明明崔鹏程赵大庆郑德育段小红
- 关键词：上皮细胞小肠黏膜下层
- 体外培养人鼻中隔软骨细胞合成硫酸糖胺多糖的检测被引量：3
- 2008年
- 背景:软骨细胞的培养及稳定传代是转基因、构建组织工程化软骨组织及异体移植的前提条件。目的:定量检测体外培养人鼻中隔软骨细胞合成分泌硫酸糖胺多糖的变化情况,评价其对不同代次软骨细胞生物学功能活性。设计、时间及地点:对比观察的细胞学实验,于2004-01/2005-07在暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室完成。材料:人鼻中隔软骨细胞来自鼻中隔偏曲患者手术切除的软骨组织,患者对实验内容知情同意。方法:胶原酶消化分离原代人鼻中隔软骨细胞传代培养至第7代。主要观察指标:阿尔新蓝比色法测定各代细胞外基质的硫酸糖胺多糖含量,光镜观察甲苯胺蓝染色后细胞形态。结果:原代软骨细胞具有最高的硫酸糖胺多糖分泌活性,至第4代则出现了非常明显的下降,第4代以后很低下。甲苯胺蓝染色显示原代细胞对甲苯胺蓝呈明显的蓝色异染反应,第3代异染反应明显减弱,第4代以后异染反应微弱,其结果与硫酸糖胺多糖含量变化相一致。结论:人鼻中隔软骨细胞在体外培养过程中,随传代次数的增加而功能活性逐渐降低,第3代以后的细胞不适于作为人软骨组织工程种子细胞和用于细胞生物学等方面研究。
- 江逊段小红狄静芳史剑波许庚崔鹏程
- 关键词：软骨细胞细胞外基质
