王冬冬
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学农学院更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项吉林省重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 大豆HSP17.4Ⅲ基因克隆及植物表达载体的构建被引量：2
- 2015年
- 大豆子房作为成熟花器官的重要组成部分,发育初期对子房内细胞分裂数有着重要的影响,可能直接影响子粒发育以及品质形成,因此对子房特异表达基因的研究将可能为多粒荚形成的分子基础提供依据。该研究以大豆多粒荚突变体为试验材料,选取上调表达差异显著的HSP17.4Ⅲ基因为目标基因,通过RT-PCR扩增HSP17.4Ⅲ基因全长CDS序列,编码序列与NCBI中HSP17.4Ⅲ基因序列相似性为99%。双酶切连入表达载体p CAMBIA3300,构建超表达载体;亚克隆法扩增该基因246 bp大小的核心保守序列,依次将其正义片段、功能性间隔序列Intron-SSR和反义片段双酶切连接到中间载体p Bluescript SK,再利用Bam HⅠ和SacⅠ双酶切将其整个干扰元件连入表达载体p CPB上,构建RNA干扰植物表达载体。质粒PCR、酶切鉴定以及测序结果表明,成功构建了超表达载体p CPB-QC3和RNA干扰植物表达载体p CPB-ZSF-RNAi,为研究HSP17.4Ⅲ蛋白在大豆子房中的功能奠定基础。
- 王丹王丕武姚丹潘丽丹刘婷婷王冬冬
- 关键词：大豆子房基因热激蛋白
