王鹏云
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
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- siRNA可降低IL-1β刺激椎间盘细胞所致凋亡敏感性被引量：3
- 2019年
- 目的明确siRNA是否可降低大鼠椎间盘细胞对IL-1β预刺激导致的凋亡敏感性,并初步探讨其机制。方法用阴性对照siRNA转染原代大鼠腰椎间盘细胞后,用含10ng/ml IL-1β的1%胎牛血清(FBS)培养基和被转染椎间盘细胞共培养,分别在4、8、16、32 h检测其对Fas受体(Fas)表达的影响。利用Fas-siRNA和阴性对照siRNA分别对原代大鼠椎间盘细胞进行转染48 h后,实验分组和处理:共分5组,N、N-20 ng、N-IL为阴性对照siRNA转染细胞,Si-20 ng、Si-IL为Fas-siRNA2转染的细胞。N为对照组,只加1%FBS培养基; N-20 ng和Si-20 ng在1%FBS培养基培养8 h后,更换为含20 ng/ml Fas配体(Fas L)的1%FBS培养基; NIL和Si-IL:与10 ng/ml IL-1β在1%FBS培养基中培养8 h后,更换为含20 ng/ml Fas L的1%FBS培养基;以上各组加入20 ng/ml Fas L后均继续培养24 h,观察细胞的凋亡情况,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,RT-PCR、Western blot分别检测Fas mRNA和蛋白表达水平。结果 (1)与10 ng/ml IL-1β共培养的阴性对照siRNA转染细胞的Fas mRNA在4 h时开始升高,但32 h时才出现统计学差异;而蛋白检测各时间点均未出现表达差异。(2)经IL-1β预处理的Si-IL、N-IL细胞组较相应的未经IL-1β预处理的Si-20 ng、N-20 ng细胞组,细胞凋亡率均升高; Fas-siRNA转染的Si-IL细胞组较阴性siRNA转染的N-IL细胞组的细胞凋亡率明显下降。(3)细胞凋亡率与Fas的表达具有相关性。结论 siRNA可降低大鼠椎间盘细胞对IL-1β预刺激导致的凋亡敏感性,但其确切机制尚需进一步研究。
- 韩敦富尹荷珊王延王鹏云汪震魏超时明
- 关键词：椎间盘细胞凋亡SIRNAIL-1ΒRNA干扰
- 改良定向骨水泥推注器预防经皮椎体成形术中骨水泥渗漏被引量：8
- 2017年
- 目的对传统骨水泥推注器进行改良,实现骨水泥的定向灌注,并探讨其在经皮椎体成形术(PVP)中对骨水泥渗漏的预防作用。方法 2013年6月—2015年6月共收治骨质疏松性椎体压缩骨折(OVCF)患者153例(182个椎体),其中73例患者(88个椎体)采用改良定向骨水泥推注器(改良组),80例患者(94个椎体)采用传统骨水泥推注器(对照组),两组患者年龄、性别比、骨密度、术前疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、骨折压缩程度等差异均无统计学意义。比较两组患者术中骨水泥渗漏情况和术后3 d、6个月时的VAS评分。结果所有患者手术均顺利完成。改良组术中有7个椎体出现骨水泥渗漏,其中C型5例,S型2例;对照组术中有29个椎体发生骨水泥渗漏,其中C型19例,B型1例,S型9例。改良组骨水泥渗漏率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者术后3 d、6个月时的VAS评分均高于术前,差异具有统计学意义(P<0.05),但组间差异无统计学意义。结论在PVP中使用改良定向骨水泥推注器能明显降低骨水泥的渗漏率。
- 李继刚李涛马秋虹韩敦富王鹏云汪震魏超
- 关键词：椎体成形术骨代用品手术中并发症
- 以带血管蒂筋膜瓣与人脐带间充质干细胞和重组人骨形成蛋白2构建活性组织工程骨
- 2012年
- 背景:构建的组织工程骨块植入体内后的存活是骨组织工程面临的一个重大课题,临床上尤其缺少可行性强、可以不经体外长时间构建及预血管化而可一期应用的组织工程骨。目的:探讨以带血管蒂的筋膜瓣作为膜包裹材料、以人脐带间充质干细胞作为种子细胞,以β-磷酸三钙生物陶瓷作为支架材构建组织工程骨的可行性及加入重组人骨形成蛋白2作为细胞活性因子、Ⅰ型胶原作为细胞活性因子缓释材料后成骨能力的变化。方法:Wistar大鼠左侧L1～6背部带血管蒂的筋膜瓣包绕由β-磷酸三钙生物陶瓷、人脐带间充质干细胞、重组人骨形成蛋白2、Ⅰ型胶原构建的组织工程骨作为实验侧,右侧带血管蒂的筋膜瓣包绕接种了人脐带间充质干细胞的β-磷酸三钙生物陶瓷作为对照侧。结果与结论:大鼠实验侧4周时幼稚骨组织连接形成原始层板骨样结构,形成的原始骨组织钙化程度低。8周时,大鼠两侧骨组织均基本成熟。成骨细胞位于骨陷窝中,周围有大量骨基质呈淡紫色,局部可见Ⅰ型胶原存在,有骨髓腔结构出现,但实验侧骨组织成熟度明显高于对照侧。实验侧骨组织哈夫氏小管清晰可见,形成多个骨化中心,骨小梁、骨岛遍布其中,可见成熟板层骨、立方状排列整齐的活性成骨细胞。8周时实验侧骨小梁成熟度高、典型、清晰可见,对照侧骨小梁成熟度稍差。但2组植入物的新骨形成面积接近。提示以带血管蒂的筋膜瓣作为膜包裹材料构建组织工程骨时,重组人骨形成蛋白2及缓释剂Ⅰ型胶原可促进其骨成熟度。
- 李涛韩敦富王鹏云汪震仇迎珠
- 关键词：人脐带间充质干细胞重组人骨形成蛋白2组织工程骨带蒂筋膜瓣
- HDAC2转染对骨髓干细胞成骨细胞分化的影响被引量：4
- 2021年
- [目的]探讨组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)转染对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨细胞分化的影响。[方法]HDAC2-siRNA重组序列、阴性随机对照序列分别转入大鼠BMSCs,命名为HDAC2-si组和空载组,未做干预细胞为空白组,检测转染后各组HDAC2 mRNA表达量;诱导BMSCs成骨分化后,检测ALP活性及BGP分泌量、茜素红染色,Western blot法检测HDAC2、SHH、IHH、Ptch1、Glis1蛋白表达量。[结果]转染后HDAC2-si组HDAC2 mRNA相对表达量低于空白组和空载组(P<0.05)。茜素红染色显示,诱导前3组均无红色矿化结节,诱导后空白组和空载组出现红色矿化结节,HDAC2-si组矿化结节更多。与空白组和空载组比较,HDAC2-si组成骨诱导后HDAC2蛋白相对表达量较低,ALP活性、BGP分泌量及SHH、Ptch1、Glis1蛋白相对表达量均较高(P<0.05),IHH蛋白相对表达量组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]下调HDAC2表达可促进BMSCs向成骨细胞分化,机制可能是通过激活Hedgehog信号通路相关分子发挥促向成骨分化的作用。
- 李晔孙仁义吕明王鹏云
- 关键词：骨髓间充质干细胞成骨细胞分化
