贾俊杰
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：西南大学更多>>
- 发文基金：高等学校学科创新引智计划国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 应用DGGE技术分析自然免耕土与普通耕作土细菌群落的多样性被引量：3
- 2011年
- 为探明免耕土壤与普通耕作土壤环境中细菌群落的多样性,获取相关优势菌落信息,该研究利用宏基因组学方法获得免耕土和普通耕作土样品总DNA,利用PCR获得16S rDNA V3片段,并进行变性梯度凝胶电泳(Denaturation gradient gel electrophoresis),通过微生物种群丰富度比较两样品中群落的丰富性,同时选取相关DNA条带进行克隆、测序和生物信息学分析。结果显示:免耕土壤中细菌群落多样性更加丰富;两类型土壤样品间细菌群落组成具有显著差异,证明耕作制度影响了土壤细菌群落结构。BLAST分析与系统发生分析结果表明,免耕土壤中特异存在的细菌群落与具有生物固氮、降解甲苯和倍硫磷等特性的细菌序列相似性较高或进化关系较近,推测其在免耕土壤肥力、有毒物质降解及有机质转变等过程中起作用。
- 马振刚马淑华张时恒贾俊杰李田潘国庆周泽扬
- 关键词：DGGE细菌群落自净能力
- 新型碱性低分子量β-葡萄糖苷酶基因的分离与酶学性质研究被引量：4
- 2012年
- 目的:获得新型β-葡萄糖苷酶编码基因,并对其表达产物进行酶学性质研究。方法:采用宏基因组学方法提取兔盲肠内微生物总DNA,构建DNA文库,通过筛选培养基获得产β-葡萄糖苷酶的克隆,测序获得其插入基因序列,氨基酸多重序列比对分析其序列特征,并用DNS显色法测定表达产物在不同条件下的酶活力。结果:在文库中获得一个基因片段nglu07,能编码一个低分子量的β-葡萄糖苷酶。nglu07基因片段长180bp,编码60个氨基酸残基。与已提交的糖苷水解酶Ⅰ家族成员进行氨基酸多重序列比对表明nglu07具有预测的活性位点Glu4与底物结合位点Tyr47,其最适反应温度为50℃,最适pH为10.0,粗酶活为8.12U/mL。结论:成功获得一新型低分子量的碱性β-葡萄糖苷酶编码基因,其蛋白温度稳定性高,在pH4.0～11.0的环境中均能保持较高的酶活力,具有作为食品工业用酶以及碱性酶的潜力,尤其在食品饮料加工、棉织品生物整理、洗涤及废纸脱墨等工业方面具有一定的应用价值。
- 马振刚唐婧马淑华张时恒贾俊杰李田周泽扬
- 关键词：宏基因组低分子量酶学性质
- 家蚕微孢子虫CQ1分离株侵染家蚕的组织病理学观察被引量：1
- 2013年
- 运用扫描电子显微镜以及组织切片、超薄切片结合透射电子显微镜观察家蚕微孢子虫CQ1分离株感染家蚕后的增殖与蚕体重要组织的病理变化,为利用CQ1分离株开展家蚕微孢子虫在宿主体内增殖和传播的分子机制研究提供较为详细的病理学依据。用扫描电子显微镜观察发现家蚕微孢子虫CQ1分离株添食侵染3龄起蚕后6 d,可在幼虫中肠中观察到增殖的孢子,并且发现孢子从围食膜穿出进入肠腔后留下的痕迹;感染后7 d发现中肠破损细胞内充满孢子;感染后8 d观察到中肠内有发芽的孢子空壳存在,说明从中肠释放出的孢子进入肠腔后,会部分发芽造成中肠再次感染。病理切片和超薄切片观察表明,3龄起蚕添食感染CQ1分离株孢子液后9 d,在中肠、脂肪体、丝腺的组织细胞内都存在大量的孢子,被感染的组织细胞肿大,同一细胞内充满不同发育时期的孢子,其裂殖体体积大于孢子体,大部分孢子在细胞内游离存在,脂肪体、丝腺的病理切片中无寄生泡结构;但在中肠组织切片以及脂肪体超薄切片中,发现有疑似寄生泡结构,特别是在透射电子显微镜下观察到感染的脂肪体细胞中这种疑似寄生泡结构呈椭圆形,大小为17μm×12μm,膜的结构清晰可辨,并可观察到泡内有10余个孢子。无寄生泡是微粒子属(Nosema)的主要特征之一,所以观察到的这种类似寄生泡的结构还需要进一步确证。
- 潘国庆贺元莉杨洋赵丽芳贾俊杰周小伟刘婷党晓群周泽扬
- 关键词：家蚕微孢子虫增殖
- 家蚕防御素基因的序列特征与表达模式分析及原核表达试验被引量：2
- 2012年
- 家蚕防御素(defensin)是家蚕抗菌肽家族的主要成员之一,为家蚕先天性免疫的重要效应因子。采用生物信息学方法分析家蚕防御素基因BmdefA、BmdefB的序列中各有2个外显子,2个基因分别定位于家蚕第4号和第13号染色体上;等电点预测BmdefA带有负电荷,属于罕见的阴离子型抗菌肽,而BmdefB带有正电荷,属于常见的阳离子型抗菌肽;预测2个基因编码的成熟肽分子质量均在4 kD左右。用RT-PCR方法检测BmdefA在家蚕整个发育过程中有表达,且在检测的幼虫和成虫各组织中均有表达;BmdefB从幼虫5龄第3天到成虫期表达,雄性表达量高于雌性,且在5龄第3天幼虫的生殖腺、脂肪体和血细胞中高水平表达。家蚕防御素BmdefA、BmdefB具有不同的分子特性和表达特征,暗示它们在家蚕先天免疫过程中可能行使不同的功能,甚至可能具有不同的抗菌机理。构建融合GST标签的家蚕防御素基因原核表达载体,通过在大肠杆菌细胞内诱导表达,获得可溶性的目的蛋白,使用GST亲和层析柱初步纯化表达的融合蛋白并进行Western blotting鉴定,为进一步研究BmdefA、BmdefB的体外活性和抑菌机制奠定基础。
- 马振刚贾俊杰陈全梅黄为李田潘国庆周泽扬
- 关键词：家蚕防御素原核表达
