目的建立一种分离纯化乌苏里蝮蛇血凝酶(WH)的方法并为其制定质量标准。方法先后采用分子筛层析法、离子交换色谱法、亲和层析法从乌苏里蝮蛇毒中分离纯化得到一种具有凝血活性的酶成分,并采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法、RP-HPLC法测定其纯度,HPSEC法测定其分子量,IEF法测定其等电点,Lowry法测定其蛋白浓度,并用标准人血浆法测定该酶的比活力。结果从乌苏里蝮蛇蛇毒中分离纯化了一种凝血酶成分,SDS-Page显示为一条带、测得分子量约为34 k D,RP-HPLC得到单一的色谱峰,HPSEC法测得该酶分子量为34.7 k D,等电点为5.25,此酶具有体外凝血活性,比活力为5.40μg/U。结论该方法可用于WH的分离纯化,制定的质量标准可用于控制该血凝酶的质量。
