赵军旗
- 作品数:16 被引量:12H指数:3
- 供职机构:中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家科技部农业科技成果转化资金天津市科技支撑计划重点项目天津市科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 瓶霉Phialophora sp.P13木聚糖酶基因的克隆及酶学性质分析被引量:5
- 2012年
- 从瓶霉Phialophora sp.P13菌株中克隆得到一个11家族的木聚糖酶基因,命名为xyn11P13。该基因ORF全长705 bp,共编码234个氨基酸和一个终止密码子,N端19个氨基酸为预测的信号肽序列。成熟蛋白在毕赤酵母中进行了重组表达,在摇床水平上木聚糖酶XYN11P13的表达量为11.8 U/mL。XYN11P13的最适pH为5.5,在pH 3.5~7.0可以保持80%以上的酶活性,在pH 4.0~10.0具有良好的pH稳定性。最适作用温度为65℃,并在60℃条件下保持稳定。以榉木木聚糖为底物,XYN11P13的比活,Km及Vmax值分别为205.3 U/mg,2.73 mg/mL,399.6μmol/min/mg。多数金属离子对XYN11P13酶活力没有明显的影响。因此,XYN11P13具潜在优势应用于食品与动物饲料工业。
- 程菲菲赵军旗石鹏君李江姚斌
- 关键词:木聚糖酶毕赤酵母酶学性质
- 粗糙脉孢菌GH45家族内切纤维素酶基因ncGH45在毕赤酵母中表达及重组酶的性质表征被引量:3
- 2016年
- 纤维素酶作为一种重要的糖苷水解酶,在生物质能源生产、饲料、造纸、洗涤和纺织领域都有着非常广泛的应用。粗糙脉孢菌来源的GH45家族内切纤维素酶基因(nc GH45)全长935 bp,包含一个53 bp的内含子(339-391),编码272个氨基酸,包括一个N-端的GH45家族催化结构域和C-端的1家族碳水化合物结合结构域。该基因在毕赤酵母中得到了分泌表达,且表达蛋白条带单一,酶活性达到20 U/m L。重组酶r Nc GH45的最适p H为4.5~5.0,最适温度为60~65℃,并且在较宽的p H范围(p H 4.0~8.0)和温度范围(30~70℃)都能维持75%以上的酶活。在37℃和50℃,p H 3.0~11.0都有着非常好的稳定性;该酶的热稳定性非常好,在70℃和80℃处理2 h还能剩余89.6%和77.7%的酶活,即使在沸水中煮10 min还能剩余10%的酶活。r Nc GH45的最适底物是地衣多糖(1 116.0 U/mg),其次是大麦葡聚糖(754.2 U/mg)和CMC-Na(254.6 U/mg),对大麦葡聚糖和CMC-Na的动力学常数Km和Vmax分别为6.26 mg/m L和997.4μmol/mg·min,19.96 mg/m L和722.1μmol/mg·min。水解产物分析结果表明,r Nc GH45对多糖的水解产物主要是纤维五糖,对寡糖的最小作用底物是纤维三糖,而对纤维二糖没有作用。对纺织品脱毛实验的结果表明,酶的添加量为10 U时,减量率为1.55%。上述结果表明成功构建了r Nc GH45高效表达工程菌株,表达的重组蛋白性质优越,有着良好的工业应用前景。
- 郭超赵军旗齐西珍孙文良刘浩田朝光
- 关键词:脱毛毕赤酵母
- 蛋白酶基因在促进纤维素酶生产和复杂氮源利用中的应用
- 本发明提供了蛋白酶基因在促进纤维素酶生产和复杂氮源利用中的应用。本发明是利用敲除或突变蛋白酶基因部分碱基或减弱蛋白酶基因的表达的微生物菌株,提升降解木质纤维素或是生产纤维素酶、半纤维素酶能力,所述微生物为毁丝霉、曲霉、木...
- 田朝光李晓林李金根赵军旗刘倩
- 文献传递
- 一种提高丝状真菌木质纤维素酶系表达及生物基化学品生产的方法
- 本发明公开一种提高丝状真菌生产木质纤维素酶系的方法及其在微生物生物基化学品发酵中的应用,属于基因工程领域。本方法是利用敲除、突变、导入等基因工程方法对丝状真菌高亲和力葡萄糖转运蛋白进行改造,得到的工程菌株具备上述优势。所...
- 田朝光王邦李金根林良才赵军旗刘倩孙涛高婧芳孙文良马延和
- 文献传递
- 提高苹果酸产量的新突变蛋白
- 本发明提供了一类提高苹果酸产量的新突变蛋白。具体地,本发明提供了一类新的丙酮酸羧化酶突变蛋白和苹果酸转运蛋白突变蛋白或其组合,以及其制备方法以及在提高苹果酸产量中的应用。
- 田朝光赵军旗李金根张路
- 提高苹果酸产量的新突变蛋白
- 本发明提供了一类提高苹果酸产量的新突变蛋白。具体地,本发明提供了一类新的丙酮酸羧化酶突变蛋白和苹果酸转运蛋白突变蛋白或其组合,以及其制备方法以及在提高苹果酸产量中的应用。
- 田朝光赵军旗李金根张路
- 真菌来源中碱性纤维素酶研究
- 纤维素酶是多酶组成的复合酶系,真菌来源的纤维素酶根据其功能的不同分为三大类:外切纤维素酶(CBH,cellobiohydrolase)、内切葡聚糖酶(EG,endo-1,4-β-D-glucanase)和β-葡糖苷酶(B...
- 齐西珍赵军旗田朝光马延和
- 关键词:纺织洗涤
- 文献传递
- 提高苹果酸产量的新突变蛋白
- 本发明提供了一类提高苹果酸产量的新突变蛋白。具体地,本发明提供了一类新的丙酮酸羧化酶突变蛋白和苹果酸转运蛋白突变蛋白或其组合,以及其制备方法以及在提高苹果酸产量中的应用。
- 田朝光赵军旗李金根张路
- 文献传递
- 真菌来源中碱性纤维素酶研究
- 纤维素酶是多酶组成的复合酶系,真菌来源的纤维素酶根据其功能的不同分为三大类:外切纤维素酶(CBH,cellobiohydrolase)、内切葡聚糖酶(EG,endo-1,4-β-D-glucanase)和β-葡糖苷酶(B...
- 齐西珍赵军旗田朝光马延和
- 关键词:纺织洗涤
- 乳酸克鲁维酵母表达系统
- 乳酸克鲁维酵母作为非常规酵母的一种,到目前为止,已经有上百种蛋白在此酵母中实现了成功表达,它除了具有和毕赤酵母一样的优势外,其还是一个安全生产菌株,尤其适合表达食品用酶和药用蛋白,同时它也不需要像毕赤酵母那样的甲醇防爆设...
- 赵军旗齐西珍田朝光马延和
- 关键词:乳酸克鲁维酵母蛋白表达系统