陈东旭
- 作品数：2 被引量：3H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学植物保护学院植保资源与病虫害治理教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 小菜蛾性信息素结合蛋白Ⅰ基因的表达及多克隆抗体制备被引量：2
- 2011年
- 提取羽化3 d的小菜蛾成虫触角总RNA,反转录合成cDNA,以此为模板PCR扩增出小菜蛾性信息素结合蛋白基因(PxPBPⅠ),大小为495 bp,Blast结果显示与多种昆虫的PBPⅠ具有较高同源性。将该基因克隆到表达载体pMAL-c4E中,转化宿主菌TB1(DE3),获得单克隆重组质粒pMAL-c4E-PxPBPⅠ。IPTG成功诱导pMAL-c4E-PxPBPⅠ表达出约60 ku的融合蛋白。优化诱导条件为3 mmol/L IPTG、诱导表达6 h,可获得大量可溶性蛋白。表达的融合蛋白通过亲和色谱法纯化、免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。ELISA分析表明制备的抗体效价达1∶512 000。
- 陈东旭于欢徐红星张雅林王敦
- 关键词：小菜蛾原核表达多克隆抗体
- 小菜蛾普通气味结合蛋白2基因的原核表达与多克隆抗体制备被引量：2
- 2010年
- 本实验提取羽化3d的小菜蛾Plutella xylostella成虫触角总RNA,反转录合成cDNA,以此为模板PCR扩增出小菜蛾普通气味结合蛋白2基因,大小为492bp,Blast结果显示与多种昆虫的GOBP2具有较高的同源性。将该基因克隆到表达载体pMAL-c4E中,转化宿主菌TB1(DE3),获得单克隆重组质粒pMAL-c4E-GOBP2。IPTG成功诱导pMAL-c4E-GOBP2表达出约60kDa的融合蛋白。优化诱导条件为3mmol/L终浓度IPTG、6h,可获得大量可溶性蛋白。表达的融合蛋白通过亲和色谱法纯化、免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。ELISA分析表明制备的抗体效价达1:1.28×105。
- 徐红星陈东旭张雅林王敦
- 关键词：小菜蛾原核表达多克隆抗体
