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陈树清
陈树清
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1
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福建农林大学生命科学学院农业生态研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
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叶长亮
福建农林大学生命科学学院农业生...
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一种采用阴离子交换柱快速纯化Taq DNA聚合酶的方法
2012年
通过37℃恒温振荡培养含有Taq DNA聚合酶基因的E.coli菌株,并用IPTG诱导该基因表达获得TaqDNA聚合酶蛋白,利用40%硫酸铵沉淀该蛋白后溶解于storage buffer中。此法获得的Taq DNA聚合酶带负电荷,因此采用阴离子交换柱纯化蛋白。试验结果表明,此法与传统的透析方法相比能快速地去除生物小分子杂质,同时去除透析方法无法除去的杂蛋白;既能保证Taq DNA聚合酶的生物学活性,同时能缩短纯化时间、提高Taq DNA聚合酶的纯度。以土壤微生物DNA、水稻cDNA为模板进行PCR扩增并对扩增产物进行测序,结果显示纯化后的Taq DNA聚合酶具有较高的扩增效率和保真性。
余彦
李程勋
陈树清
叶长亮
黄力坤
许铁城
林文雄
关键词:
TAQ
DNA聚合酶
硫酸铵
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