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陈英
作品数:
1
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供职机构:
苏州市产品质量监督检验所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
王晓囡
苏州大学医学部药学院
沈苏南
苏州大学医学部药学院
张玲
苏州大学医学部药学院
孙万平
苏州大学医学部药学院
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陈英
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2016
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一种高效筛选公共引物的方法
2016年
目的:设计一种筛选高效性多重聚合酶链反应(multiplex polymerase chain reaction,MPCR)公共引物的新方法。方法将3条正向引物和3条反向引物序列分别连接于一段人类β-actin基因序列5'和3'端,连接序列通过pMD19-T载体构建质粒模板,利用此构建的质粒模板可实现9对引物PCR扩增敏感性的筛选,实现了引物的高效筛选;其步骤包括:引物设计、插入序列的选择、酶切转化、质粒提取、敏感性检测。结果通过琼脂糖凝胶电泳分离PCR产物得出实验结果,结果显示9对公共引物的重复敏感性有明显差异,其中2对引物两次敏感性检测均达到10 copies/μL,1对引物两次敏感性均是103 copies/μL。结论该方法适用于从多对引物中排除低效性引物,筛选出敏感性高的引物对。
陈英
段欠欠
沈苏南
王晓囡
奚邦生
张玲
季建刚
孙万平
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引物筛选
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