于洁
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2014年
- 以纯化的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)作为抗原免疫BALB/c小鼠,经3次免疫后,通过聚乙二醇方法进行融合,利用有限稀释法在HAT培养基上筛选杂交瘤细胞,共获得12株既能稳定生长并可以分泌特异性抗TGEV的单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为8D2、4H4、5D6、7H10、4C3、9G1、3A2、8G1、5G6、2D7、4D6、6B10。间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光结果表明,获得的12株单抗能特异性识别TGEV,通过间接ELISA做病原检测,显示12株单抗与猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒(PrV)不发生交叉反应。经抗体亚类鉴定,该12株单克隆抗体均为IgG2b。12株抗TGEV的单抗制备成功,为猪传染性胃肠炎病原特性研究和病原快速检测提供了物质基础。
- 张煜迎于洁唐丽杰李一经
- 关键词：TGEV间接ELISABLOT间接免疫荧光
- 不同pH值条件下培养旋毛虫TsGLS mRNA的表达变化被引量：1
- 2018年
- 为探讨旋毛虫肌幼虫谷氨酰胺酶(TsGLS)在酸性条件下的作用,本研究应用实时荧光定量PCR和免疫荧光技术对不同pH值条件下培养TsGLS的表达水平进行检测。研究结果表明,随着pH值的降低,TsGLS mRNA表达量逐渐升高,在pH值2.5培养3 h时TsGLS mRNA表达量显著高于在pH值4.0、pH值6.6和pH值9.0条件下培养3 h(P<0.05);免疫荧光分析显示,在pH值2.5培养3 h后的TsGLS免疫荧光强度明显高于pH值6.6组。研究结果揭示,强酸环境能显著诱导TsGLS mRNA的表达,旋毛虫具有谷氨酰胺依赖型抗酸系统,这为深入研究其抗酸机制提供基础数据。
- 赵祥于洁于洁胡静韩彩霞韩彩霞李晓云
- 关键词：旋毛虫实时荧光定量PCR免疫荧光
- 肌旋毛虫谷氨酰胺酶基因的原核表达及其免疫荧光定位研究被引量：3
- 2017年
- 采用RT-PCR方法从旋毛虫肌幼虫中扩增出谷氨酰胺酶(TsGls)基因全长序列,将其克隆到表达载体pET-32a(+)中,测序验证后转化到表达宿主菌Rosetta(DE3)pLysS中,用IPTG诱导表达重组蛋白TsGls。以纯化的TsGls蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并对旋毛虫肌幼虫中的TsGls进行免疫荧光定位。结果显示,成功构建了重组质粒pET-32a(+)-TsGls;经SDS-PAGE分析,重组TsGls蛋白的分子质量约为72 ku;制备的多克隆抗体效价可达1.024×10~6;Western-blot分析结果显示,多克隆抗体与重组TsGls具有较强反应性;免疫荧光定位显示,TsGls蛋白存在于旋毛虫肌幼虫皮下组织。上述研究结果为进一步研究旋毛虫谷氨酸依赖型抗酸机制奠定了基础。
- 赵祥于洁胡静许静秀韩彩霞李晓云宋铭忻
- 关键词：旋毛虫肌幼虫谷氨酰胺酶原核表达免疫荧光定位
