倪晓华
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：华东师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌sPP2C的克隆、表达及性质研究
- 2007年
- 从金黄色葡萄球菌基因文库中克隆了一条新的双特异性磷酸酶,命名为sPP2C(protein phosphatase 2C,Staphylococcus aureus).sPP2C基因具有741个碱基,编码的蛋白有247个氨基酸,具有一个蛋白磷酸酶2C的催化结构域.sPP2C的分子量为26.1kD,等电点为4.95.在E.Coli.Rossetta中表达蛋白sPP2C.高纯度的sPP2C用亲和层析的方法纯化得到.酶学研究结果表明:sPP2C对磷酸酶的通用底物硝基苯磷酸(p-nitrophenyl phosphate,pNPP)不起作用,而与pSer/Thr和pTyr的寡肽均有去磷酸化作用.这些实验结果说明sPP2C是一个新的双特异性磷酸酶.
- 郭伟伟倪晓华
- 关键词：PNPP磷酸酶活性
- 金黄色葡萄球菌低分子质量双特异性磷酸酶sL MWDSP的表达、纯化及性质被引量：1
- 2006年
- 双特异性磷酸酶是酪氨酸磷酸酶家族中的一员,它参与生物体内信号转导、生长调控、新陈代谢等许多基本的生理活动.金黄色葡萄球菌的低分子质量双特异性磷酸酶sLMWDSP(low molecular weight dual-specificityphosphatase,Staphylococcus aureus)基因从金黄色葡萄球菌cDNA库中克隆,并在大肠杆菌中表达.高纯度的sLMWDSP用亲和层析的方法纯化得到.酶学性质研究表明:sLMWDSP催化对硝基苯磷酸(-pnitrophenyl phos-phate,pNPP)水解反应的最适pH值为6.7,最适温度为35℃,且该酶的活性不依赖于金属离子.磷酸酶通用抑制剂岗田酸(Okadaic acid)、EDTA对sLMWDSP几乎没有抑制作用,但钒酸钠能明显地抑制该酶的活性.sLMWDSP对pSer/Thr以及pTyr的寡肽均有去磷酸化作用,这说明sLMWDSP是一个新的双特异性磷酸酶.
- 郭伟伟倪晓华李继喜郑眉顾星季朝能
- 关键词：金黄色葡萄球菌磷酸酶活性
- CREB4基因的表达谱分析和功能初步研究(英文)被引量：3
- 2005年
- cAMP 反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding proteins,CREB)是一个哺乳动物转录因子家族,通过cAMP 反应元件(cAMP response element,CRE)介导cAMP和钙离子依赖性基因表达.CREB4是CREB转录家族的新成员.人肿瘤MTC panel结果显示,CREB4在人肺癌LX-1、结肠腺癌CX-1、前列腺癌PC-3、结肠癌G1-112和胰腺癌G1-103中有表达.构建表达CREB4-LexA和CREB215～395aa-LexA的pLexA融合质粒分别转化含p8opLacZ报告质粒的酵母EGY48菌株,诱导表达后发现CREB4蛋白为转录激活因子,N端决定其转录激活活性.亚细胞定位结果显示,全长CREB4蛋白定位于细胞质,而缺失C端假定转膜结构域的CREB41～275aa蛋白突变体则转移至细胞核内.表达谱结果显示CREB4蛋白可能在人多种肿瘤组织的基因表达调控中起作用,其C端假定的转膜结构域与其转录激活功能密切相关.
- 高永娟曹根涛殷刚王鑫季朝能顾少华倪晓华
- 关键词：CREB4转录激活因子亚细胞定位基因表达调控表达谱分析
- 血管生成抑制因子arresten克隆及功能的初步研究
- 2007年
- 血管生成抑制因子arresten是血管生成及肿瘤生长抑制物.研究发现,将arresten基因重组于质粒pGEX4T1转化入大肠杆菌BL21并用IPTG诱导蛋白表达,可获得分子量为45kDa的目的蛋白条带,arresten蛋白多数以包涵体形式存在,也有可溶蛋白存在于菌裂解液的上清,可溶蛋白可由Sepharose 4B凝胶柱亲和层析柱纯化.在鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)实验中,arresten基因可溶蛋白被证实抑制新生血管生成的效果较好.
- 王鑫陈佩林倪晓华曹根涛周丹
- 关键词：质粒构建
- 人CREB4转核机制的初步研究
- 2007年
- cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding proteins,CREB)是一个哺乳动物转录因子家族,通过cAMP反应元件(cAMP response element,CRE)调节cAMP和钙离子依赖性基因的表达.CREB4是CREB转录因子家族的一员.经酵母双杂交筛选人胎脑文库发现CREB4215-279aa可能与核转运因子kayopherinα2相互作用,提示karyopherinα2可能参与CREB4的跨膜转运过程.亚细胞定位结果显示,CREB4全长定位于细胞质,而缺失C端假定转膜结构域的CREB41-279aa蛋白则转移至细胞核内.荧光共定位进一步显示,CREB4和karyopherinα2共定位于细胞质中,CREB41-279aa和karyopherinα2共定位于细胞核中.结果提示C端被切除之后,CREB4被karyopherinα2转运到核内发挥转录作用.
- 刘永强倪晓华周丹王鑫郭伟伟
- 关键词：CREB4酵母双杂交
- 核磷蛋白的生物学功能及其与肿瘤发生的关系被引量：5
- 2006年
- 核磷蛋白(NPM)是一种多功能蛋白质,参与核糖体的生物合成,控制中心体复制,具有分子伴侣作用,并通过多种信号通路调节细胞增殖和凋亡。人体内NPM的突变、其所在的5号染色体发生异位和该染色体上某些部位的缺失与若干种人类肿瘤的发生发展密切相关。
- 周丹倪晓华
- 关键词：生物学功能肿瘤发生
