刘莎莎
- 作品数:17 被引量:10H指数:2
- 供职机构:河南科技大学更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 表达NDV HN和IBDV VP2融合蛋白重组减毒沙门菌的构建及其特性研究
- 鸡新城疫(Newcastle disease, ND)作为OIE A类疾病,鸡传染性法氏囊病(infectious bursal disease, IBD)作为B类传染病,给全球养禽业造成巨大的经济损失。在我国,鸡新城疫...
- 刘莎莎
- 关键词:鸡新城疫病毒减毒沙门菌
- 文献传递
- HN-VP233-221aa融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明公开一种HN‑VP2<Sub>33‑221aa</Sub>融合蛋白及其制备方法和应用,包括鸡传染性法氏囊病毒VP2<Sub>33‑221aa</Sub>的氨基酸序列、新城疫病毒血凝素‑神经氨酸酶(HN蛋白)的氨基酸...
- 贾艳艳张春杰刘莎莎廖成水何雷高冰李静郁川余祖华张晓洁程相朝丁轲
- 文献传递
- 稳定表达PRRSV ORF5-ORF6融合基因重组减毒猪霍乱沙门菌的构建及其生物学特性被引量:1
- 2017年
- 为构建能稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5-ORF6融合基因的重组减毒猪霍乱沙门菌,以p MD19-T-ORF5-7为模板,PCR分别扩增出ORF5和ORF6,将2个基因先后插入表达载体PYA3493,构建了重组质粒PYA3493-ORF5-ORF6。PCR、双酶切及测序结果表明,成功构建了重组质粒p YA3493-ORF5-ORF6。将该重组质粒电转至减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasd C78-1基因缺失株,获得PRRSVORF5-ORF6融合基因重组减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493-ORF5-ORF6),并对该重组减毒猪霍乱沙门菌的生长特性、遗传稳定性和表达特性进行了测定。进一步对重组减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493-ORF5-ORF6)研究发现,其生长速度比强毒株C78-1明显减慢,与ΔcrpΔcyaΔasd C78-1缺失株及ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493)互补菌株基本一致。在体外连续传代能够稳定遗传ORF5-ORF6融合基因。重组菌培养上清经SDS-PAGE能检测到ORF5-ORF6蛋白条带,且经Western-blot分析证实,重组菌共表达的GP5和M蛋白能与PRRSV阳性血清特异性结合。以上结果表明,能稳定携带ORF5-ORF6融合基因的重组减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493-ORF5-ORF6)构建成功,为开发猪繁殖与呼吸综合征和仔猪副伤寒基因工程二联疫苗奠定了良好基础。
- 杨亚东张俊峰张春杰陈松彪程相朝廖成水刘莎莎王二鑫张晓洁尚珂汪洋
- 关键词:PRRSV生物学特性
- 鸡传染性法氏囊病病毒超强毒洛阳分离株VPP2基因的原核表达及鉴定被引量:1
- 2016年
- 根据GenBank公布的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因序列,设计合成1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vv IBDV)洛阳分离株LY1的VP2基因并进行克隆,构建重组质粒p MD18-T-VP2,然后连接至原核表达载体p ET32a,将阳性质粒转化至感受态细胞Rosetta中进行诱导表达。SDS-PAGE结果显示VP2基因在大肠杆菌Rosetta细胞中实现融合表达,蛋白大小约66 ku,且主要存在于细胞上清中,Western blot试验证实表达的VP2蛋白具有较好的反应原性。研究结果可为IBDV的诊断抗原及基因工程疫苗研究奠定基础。
- 杨阳刘莎莎贾艳艳胡茂志李银聚王伟杰张震
- 关键词:VP2基因原核表达
- 鼠伤寒沙门菌SL1344株cya基因缺失株生物学特性的检测
- 观察鼠伤寒沙门菌SL1344株cya基因缺失株生物学特性.cya(adenylate cyclase,cya)基因编码环化腺苷酸合成酶,细菌缺失cya时也就失去了生成cAMP的能力,因此在一定程度上影响细菌的各种生理活动...
- 刘莎莎贾艳艳张春杰陈松彪廖成水杨亚东王二鑫程相朝
- 关键词:兽医学鼠伤寒沙门菌生物学特性生理活动物质代谢
- 鼠伤寒沙门菌SseK1基因原核表达载体的构建及其表达鉴定
- 杨亚东张春杰程相朝陈松彪廖成水张俊峰颜云飞刘莎莎王二鑫
- 稳定携带PRRSV ORF5-ORF6融合基因的重组减毒猪霍乱沙门菌的构建及特性研究
- 杨亚东张春杰程相朝张俊峰陈松彪廖成水颜云飞刘莎莎王二鑫
- HN‑VP233‑221aa融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明公开一种HN‑VP2<Sub>33‑221aa</Sub>融合蛋白及其制备方法和应用,包括鸡传染性法氏囊病毒VP2<Sub>33‑221aa</Sub>的氨基酸序列、新城疫病毒血凝素‑神经氨酸酶(HN蛋白)的氨基酸...
- 贾艳艳张春杰刘莎莎廖成水何雷高冰李静郁川余祖华张晓洁程相朝丁轲
- 传染性法氏囊病毒VP2基因的克隆、序列分析及表达
- 引言/目的 鸡传染性法氏囊病(IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种高度接触性传染病,能破坏雏鸡法氏囊淋巴细胞而引起严重的免疫抑制,并可诱发多种疾病或使多种疫苗免疫失败.VP2是IBDV的主要结构蛋白,是...
- 刘莎莎贾艳艳张春杰余祖华何雷李蒙
- 重组减毒鸡白痢沙门菌△crpC79-13(pcDNA3-HN)的构建及生物学特性研究
- 引言/目的 沙门菌作为一种侵袭性胞内菌可直接将真核表达质粒携带进入动物细胞内表达相应的蛋白.本研究拟构建表达鸡新城疫病毒神经氨酸酶(NDV-HN)蛋白的重组减毒鸡白痢沙门菌△crpC79-13 (pcDNA3.0-HN)...
- 李蒙余祖华程相朝尚珂刘莎莎