刘鹏琰
- 作品数：11 被引量：10H指数：1
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- 一种特异性抗噻虫嗪抗体的可变区序列及其重组全长抗体
- 本发明公开了一种特异性抗噻虫嗪抗体的可变区序列，重链可变区编码基因的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了一种抗噻虫嗪重组全长抗体，包括重链恒定区、重链可变区、轻链恒定区和轻链可变区，重链可变区编码基因的...
- 郭逸蓉刘鹏琰赵颖郭源昊焦沙沙柳颖朱国念
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- 一种抗噻虫胺和呋虫胺宽谱抗体的可变区序列及其重组完整抗体的制备
- 本发明公开了一种抗噻虫胺和呋虫胺宽谱抗体的可变区序列，重链可变区编码基因的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了一种抗噻虫胺和呋虫胺宽谱重组完整抗体，包括重链恒定区、重链可变区、轻链恒定区和轻链可变区，重...
- 郭逸蓉常云云赵颖刘鹏琰柳颖陈阳朱国念
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- 抗噻虫嗪重组全长抗体的制备与特异性识别机制研究
- 2021年
- 本研究旨在制备抗噻虫嗪的重组抗体,并采用计算机辅助的同源建模和分子对接的方法解析抗体和噻虫嗪的特异性分子识别机制。首先,采用表面等离子共振技术评价了抗噻虫嗪单克隆抗体的识别性能;其次,以抗噻虫嗪杂交瘤细胞株为基因来源,经分子克隆获得了抗体可变区序列,由哺乳动物细胞HEK 293(F)体外表达成功获得了全长重组抗体;最后,基于正确的可变区序列,采用同源建模和分子对接手段,研究了抗体高亲和力特异结合噻虫嗪的分子识别机制。结果表明,抗噻虫嗪单克隆抗体可特异性识别噻虫嗪,且与其具有较高的结合亲和力(解离平衡常数KD=7.995×10^(-11) mol/L)。由HEK 293(F)体外表达的全长重组抗体,采用间接竞争酶联免疫吸附分析方法进行评价,表明该重组全长抗体对噻虫嗪的IC_(50)值为0.41μg/L,与其他新烟碱类农药的交叉反应率<0.04%,表现出与亲本单克隆抗体一致的性能,即具有高特异性、高灵敏度的识别活性。分子对接计算结果表明,位于疏水结合口袋参与形成范德华力的8个氨基酸残基和参与形成氢键的Asn39(L-CDR1)残基与抗体的选择性(特异性)相关,位于重链CDR区的两个氨基酸His35(H-CDR1)和Trp108(H-CDR3)残基决定了抗体对噻虫嗪的结合亲和力。该研究制备的重组全长抗体可代替传统单克隆抗体建立多种免疫检测方法,应用于环境样品和农产品中噻虫嗪的残留检测。解析的噻虫嗪抗原抗体分子识别机制,可为后续改造更高亲和力的抗体提供理论依据。
- 刘鹏琰郭源昊焦沙沙陈阳郭逸蓉朱国念
- 关键词：噻虫嗪分子对接
- 一种特异性抗噻虫啉抗体的可变区序列及其重组完整抗体
- 本发明公开了一种特异性抗噻虫啉抗体的可变区序列，重链可变区编码基因的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了一种抗噻虫啉重组完整抗体，包括重链恒定区、重链可变区、轻链恒定区和轻链可变区，重链可变区编码基因的...
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- 一种特异性抗噻虫胺抗体的可变区序列及其重组完整抗体的制备与应用
- 本发明公开了一种特异性抗噻虫胺抗体的可变区序列，重链可变区编码基因的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了一种抗噻虫胺重组完整抗体，包括重链恒定区、重链可变区、轻链恒定区和轻链可变区，重链可变区编码基因的...
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- 抗对硫磷单链抗体在昆虫细胞中的表达及活性鉴定被引量：1
- 2016年
- 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,在Sf9昆虫细胞中表达抗对硫磷单链抗体,并评价该重组抗体sc Fv-4C6的分子识别活性。以分泌能特异性识别对硫磷的单克隆抗体的杂交瘤细胞株4C6为RNA来源,采用RT-PCR方法扩增抗体的重链和轻链可变区基因,经重叠延伸PCR方法串联拼接获得单链抗体基因片段(sc Fv-4C6)。构建包含目的片段的重组杆粒Bacmidsc Fv-4C6,转染Sf9细胞表达目的蛋白,采用免疫印迹法(Western blotting)检测表达产物,间接竞争酶联免疫吸附(ic-ELISA)法评价产物的生物活性。结果表明:sc Fv-4C6基因片段拼装正确,成功转染Sf9细胞,并在转染后72 h表达量最高,表达的单链抗体大小为28.3 k D;表达产物能特异性识别对硫磷,IC50值为7.9 ng/m L,对甲基对硫磷和杀螟硫磷分别有12%和1.8%的交叉反应率,与亲本单克隆抗体的识别性能相似。该研究表明,具有生物活性的抗对硫磷单链抗体sc Fv-4C6可在昆虫细胞中成功得到表达。
- 刘蕊项丹丹刘鹏琰梁晓郭逸蓉朱国念
- 关键词：对硫磷单链抗体酶联免疫吸附
- 一种抗噻虫胺和呋虫胺宽谱抗体的可变区序列及其重组完整抗体的制备
- 本发明公开了一种抗噻虫胺和呋虫胺宽谱抗体的可变区序列，重链可变区编码基因的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了一种抗噻虫胺和呋虫胺宽谱重组完整抗体，包括重链恒定区、重链可变区、轻链恒定区和轻链可变区，重...
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- 一种特异性抗噻虫嗪抗体的可变区序列及其重组全长抗体
- 本发明公开了一种特异性抗噻虫嗪抗体的可变区序列，重链可变区编码基因的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了一种抗噻虫嗪重组全长抗体，包括重链恒定区、重链可变区、轻链恒定区和轻链可变区，重链可变区编码基因的...
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- 10种杀虫剂对小菜蛾室内生物活性比较被引量：9
- 2011年
- 用浸叶法测定了10种杀虫剂对小菜蛾3龄幼虫的毒力。结果表明:10种杀虫剂对小菜蛾3龄幼虫毒力(LC50)大小顺序为阿维菌素>虱螨脲>溴虫腈>茚虫威>毒死蜱>硫丹>甲氧虫酰肼>辛硫磷>高效氯氰菊酯>虫酰肼。以毒死蜱为标准药剂,小菜蛾对阿维菌素敏感性最高,相对毒力指数达31530.0;其次为虱螨脲、溴虫腈和茚虫威,相对毒力指数分别为5236.3,2202.1和884.2;其余药剂的相对毒力指数均<100,对小菜蛾的敏感性较低,特别是虫酰肼,相对毒力指数仅为8.0,敏感性最差。测定结果可以为合理选择杀虫剂及小菜蛾的田间防治提供依据。
- 贾变桃刘鹏琰贾虎刘慧平
- 关键词：杀虫剂小菜蛾生物活性
- 一种特异性抗噻虫啉抗体的可变区序列及其重组完整抗体
- 本发明公开了一种特异性抗噻虫啉抗体的可变区序列，重链可变区编码基因的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了一种抗噻虫啉重组完整抗体，包括重链恒定区、重链可变区、轻链恒定区和轻链可变区，重链可变区编码基因的...
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