吴阳阳
- 作品数:6 被引量:33H指数:3
- 供职机构:广州中医药大学临床药理研究所免疫研究室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金陕西省教育厅省级重点实验室科研与建设计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 小檗碱对小鼠RAW264.7巨噬细胞极化的影响被引量:1
- 2014年
- 【目的】观察小檗碱对脂多糖(LPS)、白细胞介素-4(IL-4)诱导的小鼠RAW264.7细胞极化的影响。【方法】体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,模型组和给药组分别加入LPS(终浓度100 ng/mL)或IL-4(终浓度10 ng/mL),给药组用终浓度20μmol/L的小檗碱分别进行干预,同时空白对照组给予等体积磷酸盐缓冲液(PBS)。采用荧光定量聚合酶链反应检测精氨酸酶-1(Arg-1)、一氧化氮合酶(iNOS)、细胞因子信号传导抑制蛋白2(SOCS2)、细胞因子信号传导抑制蛋白3(SOCS3)的mRNA表达水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及IL-10的分泌量。【结果】小檗碱对LPS刺激的巨噬细胞TNF-α分泌量的增加以及iNOS、SOCS3 mRNA表达水平的上升均有显著的下调作用(P<0.05或P<0.01);对IL-4刺激的巨噬细胞IL-10分泌量的增加和Arg-1 mRNA表达水平的上升均有显著下调作用(P<0.05),而对SOCS2 mRNA的表达无显著影响(P>0.05)。【结论】小檗碱能抑制巨噬细胞向M1型极化,亦能抑制巨噬细胞向M2型极化,提示其可能在维持M1/M2动态平衡中发挥调节作用。
- 朱瑞丽吴阳阳罗进芳易浪董燕
- 关键词:脂多糖基因表达调控细胞培养
- 巨噬细胞极化的信号通路及其与疾病的关系被引量:21
- 2014年
- 巨噬细胞是具有异质性的一类免疫细胞,近年来巨噬细胞极化受到关注。巨噬细胞在体内外不同环境影响下可极化为不同表型。目前认为巨噬细胞极化是单核细胞活化后一系列功能状态的两个极端。由于巨噬细胞极化涉及到不同信号通路及多种转录因子的调控,且极化后与多种疾病发生发展相关,故本文介绍巨噬细胞极化相关情况、极化信号通路及调控因子、可塑性及其与相关疾病的关系。中药对巨噬细胞极化的影响可能是其发挥免疫调节作用的重要机制。
- 谢冰冰董燕吴阳阳王培训
- 关键词:信号通路
- 青藤碱对细菌内毒素刺激的小鼠及巨噬细胞嘌呤受体A2A、P2X_7表达的影响被引量:5
- 2016年
- 【目的】探讨青藤碱(sinomenine,SIN)对细菌内毒素(LPS)刺激的小鼠内毒素血症模型及巨噬细胞RAW264.7细胞炎症模型嘌呤受体A2A、P2X7表达的影响。【方法】选用BALB/c小鼠设空白对照组,模型组,青藤碱组(剂量分别为40、80、160 mg/kg),青藤碱组给予腹腔注射青藤碱30 min后,模型组和青藤碱组给予腹腔注射LPS(剂量为15 mg/kg)建立内毒素血症小鼠模型,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝脏、脾脏嘌呤受体A2A、P2X7的表达。RAW264.7细胞设空白组、LPS组、青藤碱组,青藤碱组给予青藤碱(300μmol/L)干预2 h后,LPS组和青藤碱组均给予LPS(剂量为100 ng/m L),继续培养8 h后,采用ELISA法检测上清TNF-α分泌量,RT-PCR法检测细胞P2X7、A2A m RNA表达。【结果】在LPS刺激下,小鼠血清TNF-α和IL-6水平显著上升,肝脏、脾脏组织中嘌呤受体A2A、P2X7的表达显著升高,青藤碱能下调TNF-α和IL-6水平,并抑制A2A、P2X7的表达(均P<0.05);体外LPS刺激下,RAW264.7细胞分泌TNF-α增加,A2A、P2X7的表达增加,青藤碱可抑制TNF-α的分泌,并下调P2X7的表达(均P<0.05),但对A2A的表达有促进作用。【结论】青藤碱对LPS刺激的小鼠肝脏、脾脏及体外巨噬细胞中嘌呤受体P2X7的表达增加均表现抑制作用,而对不同组织细胞中A2A表达的影响不同,相关机制有待深入。
- 李景吴阳阳周海松朱瑞丽易浪董燕王培训
- 关键词:嘌呤受体基因表达调控小鼠
- 鱼腥草叶片总蛋白的提取及双向电泳体系的建立被引量:1
- 2013年
- 【目的】比较鱼腥草叶片蛋白质提取方法,建立适用于鱼腥草蛋白质组双向电泳分析方法。【方法】以鱼腥草叶片为材料,分别采用凯基试剂盒、三氯乙酸/丙酮沉淀法、尿素/硫脲提取法及酚法4种方法提取鱼腥草叶片总蛋白,使用Bradford法测定蛋白质浓度,计算蛋白提取率,并对所提取的蛋白样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及双向电泳(2-DE)分析,所得2-DE凝胶图片采用PDQuest软件进行分析。【结果】4种方法的提取率分别为2.90、2.55、3.90、3.80 mg/g,分别检测到186、153、356、315个蛋白点,酚法提取蛋白质的2-DE图谱效果较好,结果的重复性较好。【结论】不同方法提取鱼腥草叶片总蛋白的2-DE结果存在差异,以酚法提取的2-DE效果较好,适用于鱼腥草叶片蛋白质组分析。
- 华贵煌董燕易浪吴阳阳
- 关键词:鱼腥草叶片蛋白质提取双向电泳
- 小檗碱对LPS、IL-4诱导的小鼠RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-10的影响被引量:4
- 2014年
- 目的观察小檗碱(Berberine,Ber)对脂多糖(LPS)以及白介素-4(IL-4)诱导的RAW264.7细胞株分泌炎症因子中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、抑炎因子白介素(IL-10)的影响,初步探讨Ber对巨噬细胞极化的影响,方法噻唑蓝(MTT)法测定小檗碱对RAW264.7细胞增殖的影响,选取半数抑制浓度(IC50)以下的小檗碱浓度作为干预剂量;酶联免疫法(ELISA)检测小檗碱对LPS以及IL-4不同诱导状态下RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-10的影响。结果小檗碱对RAW264.7细胞的IC铀在400~800μmol·L-1之间。LPS作用下RAW264.7细胞促炎因子TNF-α分泌量明显升高,Ber(剂量分别为5,10,20μmol·L-1)有显著的抑制作用,并有剂量依赖关系(均P〈0.01);而LPS刺激下细胞IL-10分泌量也明显升高(P〈0.05),而Ber仅在20μmol·L-1剂量下表现抑制作用。在IL-4作用下,RAW264.7细胞抗炎因子IL-10分泌量明显升高,Ber(剂量分别为5,10,20μmol·L-1)有显著的抑制作用,并呈现剂量依赖关系(均P〈0.01);IL-4作用下TNF-α分泌量明显降低(P〈0.05),Ber对TNF-α分泌量的影响无剂量依赖性。结论Ber对LPS刺激下促炎因子TNF-α的分泌具有抑制作用,对IL-4诱导下1L-10分泌量的升高也有抑制作用,提示Ber在巨噬细胞极化过程中有调节作用.
- 吴阳阳董燕易浪王青
- 关键词:小檗碱白介素-4白介素-10
- 开口箭DNA提取方法比较被引量:3
- 2015年
- 目的:筛选从开口箭不同类型材料中提取DNA的最佳方法。方法:采用十二烷基磺酸钠(SDS)法,改良SDS法,十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和改良CTAB法4种方法分别对开口箭的新鲜茎、硅胶干燥茎、烘干茎、新鲜叶片和硅胶干燥叶片这5类材料进行DNA提取。从DNA的完整性、纯度、得率等方面对DNA进行比较,确定开口箭不同材料DNA提取的最适方法。结果:采用改良CTAB法提取的硅胶干燥茎和叶片的A260 nm/A280 nm均在1.8~1.9,纯度最高,且完整性较高,提取效果较其他方法更佳;其余材料则均有不同程度的污染,新鲜叶片的A260 nm/A280 nm普遍很低。结论:从硅胶干燥叶片和茎的开口箭材料中更容易提取出纯度高、完整度好的DNA。改良CTAB法是适合开口箭DNA提取的有效方法,通过改良CTAB法从硅胶干燥叶片和茎的开口箭中更容易提取纯度高、完整度好的基因组DNA。
- 周天华陈征李康肖瑛吴阳阳王新红陈雨杰
- 关键词:开口箭DNA提取纯度完整性改良CTAB法