姚凌云
- 作品数:10 被引量:7H指数:2
- 供职机构:江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金:江苏省农业科技自主创新基金公益性行业(农业)科研专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 犬流感病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株F112及应用
- 本发明涉及一种犬流感病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株F112,属于生物技术领域。本发明是运用淋巴细胞杂交瘤技术,用犬流感病毒流行毒株A/Canine/Nanjing/11/2012(H3N2)制备免疫抗原,从中筛选出一株强效杂...
- 夏兴霞王永山王晓丽安欣欧阳伟诸玉梅潘群兴王晶宇楼晶瑶姚凌云吴世妍毕振威芮荣刘永杰
- 文献传递
- 淫羊藿苷对哺乳动物生殖的作用(综述)
- 淫羊藿(Epimedium)又称仙灵脾,是小檗科(Berberidacea)淫羊藿属(Epimedium)多年生草本植物,也是祖国传统医学中一味应用广泛、历史悠久且具有补肾壮阳、祛除风湿和强筋健骨功效的补益中药。淫羊藿苷...
- 姚凌云芮荣
- 关键词:哺乳动物淫羊藿苷生殖调控
- 文献传递
- 犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌多重PCR检测方法的建立及初步应用被引量:3
- 2019年
- 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究根据3种真菌基因内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)区域的序列差异设计4条引物,通过优化多重PCR反应条件,建立了一种可同时快速检测这3种真菌的多重PCR,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286、596、188 bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6、8.8、13.6pg/μL;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示阳性检出率分别为74.07%(20/27)和83.72%(36/43);采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56);两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本研究建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。
- 钱晶欧阳伟王晶宇姚凌云吴世妍王晓丽潘群兴夏兴霞诸玉梅刘军刘国芳王永山
- 关键词:真菌病犬小孢子菌石膏样小孢子菌多重PCR
- 犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌多重PCR检测方法的建立及初步应用
- 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究旨在建立一种快速检测这三种真菌病原的多重PCR方法。根据真菌ITS区域的序列差异设计了4条引物,优化了多重PCR反应条件,同时对其特异性、灵敏性...
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- 关键词:真菌病犬小孢子菌石膏样小孢子菌多重PCR
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- 犬干扰素α2的原核表达及抗病毒活性分析被引量:4
- 2018年
- 本研究将人工合成的犬干扰素α2成熟区序列插入原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组表达质粒p ET-28a-Ca IFN-α2;然后将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态中进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,分子量约为23 k Da的目的蛋白表达,表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,表达量约占菌体总蛋白的52.5%。包涵体蛋白经变性、复性和纯化处理后,获得的重组Ca IFN-α2纯度为92%;用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测重组蛋白的抗病毒活性为3.16×106/m L。本研究结果为进一步研制新型犬用干扰素制品奠定了物质基础。
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- 关键词:原核表达系统抗病毒活性
- Aurora A在猪早期胚胎发育过程中的表达与功能研究
- 极光激酶A(AuroraAkinase)是一种参与调控有丝分裂启动、中心体复制与分离、纺锤体组装与胞质分裂等生物学事件的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,大量研究表明AuroraA在肿瘤形成及抗癌药物等方面发挥至关重要的作用,而在...
- 崔盼盼廖丫丫陈长超张子霄姚凌云张越芮荣剧世强
- 文献传递
- PIK1在猪卵母细胞减数分裂过程中的表达与作用的研究
- PlK1(Polo-like kinase 1)是一种广泛存在于真核生物中的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。其结构和功能都十分保守。研究表明,PlK1在肿瘤细胞有丝分裂过程中扮演着重要角色,而在猪卵母细胞减数分裂中的研究较少。本...
- 廖丫丫崔盼盼陈长超张子霄姚凌云张越芮荣剧世强
- 文献传递
- 犬流感病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株F112及应用
- 本发明涉及一种犬流感病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株F112,属于生物技术领域。本发明是运用淋巴细胞杂交瘤技术,用犬流感病毒流行毒株A/Canine/Nanjing/11/2012(H3N2)制备免疫抗原,从中筛选出一株强效杂...
- 夏兴霞王永山王晓丽安欣欧阳伟诸玉梅潘群兴王晶宇楼晶瑶姚凌云吴世妍毕振威芮荣刘永杰
- 犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌多重PCR检测方法的建立及初步应用
- 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究旨在建立一种快速检测这三种真菌病原的多重PCR方法。根据真菌ITS区域的序列差异设计了4条引物,优化了多重PCR反应条件,同时对其特异性、灵敏性...
- 钱晶欧阳伟王晶宇姚凌云吴世妍王晓丽潘群兴夏兴霞诸玉梅王永山
- 关键词:真菌病犬小孢子菌石膏样小孢子菌多重PCR
- 文献传递
- 犬流感病毒NP基因在昆虫细胞中的表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立
- 2017年
- 旨在利用昆虫细胞表达犬流感病毒(CIV)核蛋白(NP),并以此作为抗原建立检测CIV抗体的间接ELISA方法。从CIV感染的MDCK细胞中提取总RNA,用RT-PCR法扩增NP基因,连接到pFastBacHTA载体上,转化含Bacmid的DH10Bac感受态细胞,获得穿梭质粒NP-DH10,穿梭质粒转染sf-9昆虫细胞,获得重组病毒P1-NP。病毒传至第3代后,用Western-blot及IFA鉴定昆虫细胞表达的蛋白与兔抗犬流感病毒NP蛋白多克隆抗体及鼠抗CIV血清发生特异性反应。NP蛋白纯化后作为抗原,建立检测CIV抗体的间接ELISA方法。优化后确定蛋白最佳包被浓度为2 g/mL,血清最佳稀释度为1∶100。用建立的间接ELISA方法和血凝抑制(HI)同时检测136份血清样品,ELISA法检出129份阳性,检出率为94.85%;HI检出120份阳性,检出率为88.23%,二者符合率为93.38%,ELISA检测方法的阳性率高于血凝抑制。结果表明,利用昆虫细胞表达的NP蛋白做为抗原,建立的检测CIV抗体的间接ELISA方法特异性好,重复性高,可用于犬流感的诊断和流行病学调查。
- 楼晶瑶王晓丽欧阳伟夏兴霞诸玉梅潘群兴王晶宇安欣姚凌云王永山刘永杰
- 关键词:NP蛋白杆状病毒表达系统