李月阳
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 供职机构：南京林业大学森林资源与环境学院江苏省有害生物入侵预防与控制重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省高校优势学科建设工程资助项目国家林业公益性行业科研专项江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 根癌农杆菌介导的异角状拟盘多毛孢菌转化系统研究被引量：5
- 2012年
- 以携带潮霉素B磷酸转移酶抗性基因(hph)的pBHt1作为转化载体,根癌农杆菌AGL-1作为转化介体,实施转化异角状拟盘多毛孢菌。研究发现,异角状拟盘多毛孢菌的最优转化体系为:异角状拟盘多毛孢菌分生孢子悬浮液浓度为1×106个/mL,根癌农杆菌OD600为0.3,共培养时间48 h,共培养温度为25℃,诱导培养基中乙酰丁香酮(AS)浓度为200μmol/L,选择培养基添加250μg/mL潮霉素B、250μg/mL头孢噻肟钠。1×106个异角状拟盘多毛孢菌分生孢子可以产生200～300个转化子,随机挑选10个转化子进行PCR检测,均能扩增出预期条带,且在不含潮霉素B的PDA培养基平板上转化子连续培养5代后,hph基因仍能稳定遗传,这表明T-DNA已经插入到异角状拟盘多毛孢菌的基因组中。此次建立的异角状拟盘多毛孢菌的转化体系可为该病菌的功能基因研究和寄主与病原菌的互作研究提供有效的工具。
- 张林平叶建仁李月阳黄麟许剑涛张扬
- 关键词：根癌农杆菌
