李章富
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：辽宁大学生命科学院更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- δ-睡眠肽与GFP融合蛋白的表达和纯化
- 2012年
- 构建δ-睡眠肽(DSIP)蛋白与GFP的融合基因表达载体,高效表达和纯化GFP-DSIP融合蛋白。通过SOE-PCR拼接DSIP全长编码基因,并使得DSIP上游具有肠激酶识别位点,经双酶切定向克隆至表达载体pET-28a,构建重组载体pET-28a-DSIP,通过PCR扩增GFP全长编码基因,经双酶切定向克隆至pET-28a-DSIP,构建原核重组表达载体pET-28a-GFP-DSIP,通过双酶切和测序鉴定后,导入E.coli BL21宿主菌中,IPTG诱导表达融合蛋白,采用镍亲和层析和分子筛凝胶层析获得高纯度蛋白,SDS-PAGE分析鉴定。经测序鉴定成功构建了原核重组表达载体pET-28a-GFP-DSIP,在IPTG诱导下获得可溶性的绿色荧光蛋白与睡眠肽的融合蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化成功获得高纯度的融合蛋白。成功构建了DSIP与GFP融合基因的重组表达载体,确定了GFP-DSIP融合蛋白诱导表达的最佳条件,获得了较高纯度的融合蛋白,为进一步研究DSIP蛋白的生物学功能奠定了基础。
- 崔小进杨帆戴有金李章富吕永通胡风庆
- 关键词：基因克隆融合蛋白原核表达
- 出口辣白菜中蛔虫卵检出新方法被引量：1
- 2011年
- 铁岭辣白菜是出口创汇的主要产品之一,如辣白菜中存在有蛔虫卵不仅严重危害人类健康,而且会给铁岭辣白菜产业造成不可估量的经济损失.本研究从源头出发,对制作辣白菜的大白菜中的蛔虫卵进行检验,并采用模拟阳性辣白菜样品进行了猪蛔虫卵的回收率实验.建立包括洗脱、过滤、离心、漂浮、镜检等程序的虫卵检验标准方法,泡菜样品中猪蛔虫卵的检出率达32.6%,蛔虫卵检出高效准确,明显优于现有检验方法.
- 胡风庆赵小慧王旭李章富陈蓝鹏刘世恩刘栋
- 关键词：辣白菜蛔虫卵
