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梅翔
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
重庆理工大学化学化工学院制药工程系
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
张继兰
重庆理工大学化学化工学院制药工...
陈海容
重庆理工大学化学化工学院制药工...
王彦
重庆医科大学药学院
范开
重庆理工大学化学化工学院制药工...
邱宗荫
重庆医科大学药学院
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1篇
2009
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重组人睫状神经因子的表达、纯化以及聚乙二醇修饰
被引量:2
2009年
目的研究重组人睫状神经因子(rh-CNTF)的表达、纯化及聚乙二醇化修饰、纯化方法。方法重组人睫状神经因子(rh-CNTF)工程菌经37℃培养至对数生长期,加入IPTG诱导4h,经QSepharose F.F凝胶柱纯化和复性后得到纯化的rh-CNTF。以体外培养鸡胚背根神经节(DRG)方法测定重组蛋白rh-CNTF的神经营养活性。用单甲氧基聚乙二醇丁醛(mPEG-ButyrALD-20k)对rh-CNTF进行修饰,所得修饰产物经DEAESepharose F.F和Superdex 75凝胶分离纯化后获得mPEG-rh-CNTF偶联物。结果目的蛋白占总蛋白30%左右,为包涵体,经QSepharose F.F凝胶柱纯化和复性,获得纯度达90%的rh-CNTF。表达的rh-CNTF能促进培养的鸡胚背根神经节神经突起的生长。修饰后的单聚PEG-rhCNTF经DEAESepharose F.F和Superdex 75凝胶纯化后纯度达到95%。结论确立了rh-CNTF蛋白表达纯化及PEG修饰的方法。
王彦
范开
夏永鹏
张继兰
梅翔
陈海容
李秀梅
邱宗荫
关键词:
纯化
聚乙二醇修饰
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