滕云飞
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 供职机构：华东师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新型肝癌标志CA125及其靶向毒素在肝癌生物治疗中的作用研究被引量：7
- 2014年
- 目的:对实验室已构建的新型免疫毒素IAB-TAT-BH3在肝癌靶向治疗中的作用进行初步评价。方法:首先通过免疫组化技术对人肝癌组织芯片中CA125的表达进行检测,同时利用RT-PCR、Western blot和流式细胞术从RNA和蛋白水平对肝癌细胞中CA125的表达进行系统分析;然后通过Western blot和流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测免疫毒素IABTAT-BH3与肝癌细胞株SMMC-7721的结合能力,最后采用MTT法检测其对于SMMC-7721的靶向杀伤作用。结果:CA125在人类肝癌组织芯片和肝癌细胞株SMMC-7721中呈现高表达;免疫毒素IAB-TAT-BH3对于SMMC-7721具有良好的结合能力,且与两种对照免疫毒素相比,具有更强的细胞杀伤作用,IC50值约0.3μmol/L。结论:膜蛋白CA125是潜在的肝癌分子靶标,靶向CA125的新型免疫毒素IAB-TAT-BH3在体外对肝癌细胞具有一定的特异性杀伤作用,在肝癌靶向治疗上具有潜在的应用前景。
- 范鸣滕云飞虞丽平任华何苗壮钱旻杜冰
- 关键词：CA125分子靶标肝癌靶向治疗
- 一种新型免疫毒素IAB-TAT-BH3的表达、纯化及初步鉴定
- 2013年
- 利用能与CA125结合的间皮素最小活性片段IAB与跨膜肽TAT和凋亡肽BH3连接后,插入至质粒pET32a(+)中,构建成免疫毒素IAB-TAT-BH3融合表达载体pET32a(+)-IAB-TAT-BH3。将此重组质粒及对照组质粒pET32a(+)-IAB-BH3分别转化E.coli BL21(DE3),表达后经western blot验证,获得了相应的可溶性蛋白表达产物。表达菌的裂解上清经镍柱亲和层析、超滤脱盐后,分别收集到高纯度且浓度均大于250μg/ml的融合蛋白。经MTT检测,这两种融合蛋白针对细胞表面表达有受体蛋白CA125的癌细胞并具有抑制其增殖的作用。其中IAB-TAT-BH3与对照IAB-BH3相比,具有更强抑制细胞增殖的作用。IAB-TAT-BH3这一新型免疫毒素的表达、纯化及初步鉴定,为CA125阳性癌细胞的靶向治疗研究奠定了基础。
- 范鸣滕云飞虞丽平杜冰何苗壮钱旻任华
- 关键词：CA125免疫毒素纯化
