将乳酸片球菌接种于MRS培养基,37℃静置培养17h后产生抑菌物质细菌素。用三步法从培养液中分离纯化细菌素:首先根据细菌素在pH6.0时与菌体的吸附力最强,pH2.0时吸附力最弱,通过调节pH和离心来收集细菌素,然后经过SP Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析和Sephadex G-50凝胶层析进行纯化,最后细菌素的得率为0.19%,比活为5.17×104AU/mg,纯化了34.54倍。得到的细菌素样品通过Tricine-SDS-PAGE电泳出现清晰条带,大小约为4600D。
