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王强: 作品数：17 被引量：16H指数：2; 供职机构：中国科学院动物研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生农业科学一般工业技术更多>>

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Nodal/Smad2靶基因的系统鉴定及其在早期胚胎发育中的功能机制被引量：1: 2017年; Nodal/Smad2信号通路在脊椎动物胚胎中内胚层诱导及其背腹分化中发挥着主导作用,但是在胚胎早期发育中,Nodal/Smad2信号调控哪些靶基因表达,这些靶基因如何在Nodal/Smad2信号下游发挥作用,人们仍然所知甚少。以国家自然科学基金委员会"细胞编程与重编程的表观遗传机制"重大研究计划为依托,王强实验室在全基因组水平上对斑马鱼胚胎原肠早期Nodal/Smad2信号通路的靶基因进行了系统鉴定,并通过分析Smad2结合区域的其他转录因子保守的结合序列的出现频率,鉴定了一批潜在的Smad2的协同转录因子。研究发现,Nodal/Smad2的靶基因主要由转录因子、发育相关基因及重要信号通路的调控因子组成,其中F-actin捆绑蛋白Fascin1a和鸟核苷酸交换因子Net1分别通过调控受体内吞与Smad2转录活性反馈调控Nodal信号转导和中内胚层形成,而BPTF做为Smad2协同转录因子,通过调节核小体滑动来调控wnt8a表达,在中枢神经系统后部化过程中发挥重要作用。相关研究工作构建了Nodal/Smad2信号在斑马鱼中内胚层诱导及体轴建立中的分子网络,为理解脊椎动物早期胚胎发育过程中的基因表达调控机制提供了有意义的线索。; 宁国柱孟安明王强; 关键词：斑马鱼靶基因

斑马鱼胚胎胚盾特异表达基因的鉴定被引量：1: 2016年; 目的由于原肠期细胞的剧烈运动,在斑马鱼胚胎的背侧汇聚形成了称为胚盾(shield organizer)的结构,是胚胎发育的信号组织中心,在背腹轴建立和胚层诱导过程中具有关键作用。系统鉴定在胚盾特异表达的基因,可为进一步探讨胚盾形成的机制及其指导胚胎早期发育的分子机理提供参考。方法 Tg(gsc:GFP)转基因鱼在胚盾表达特异的绿色荧光。通过流式细胞分选技术分离富集GFP阳性细胞并提取总RNA进行RNA深度测序,检测可能在胚盾高水平表达的基因。然后利用荧光实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和原位杂交技术鉴定若干在胚盾特异表达的基因。结果从Tg(gsc:GFP)转基因鱼胚胎中分离富集到了纯度超过96%的GFP阳性细胞,RNA深度测序的结果显示有657个基因的表达水平比整胚细胞或GFP阴性细胞高2倍以上。最后,确认了KIAA1324、ripply1、twist2、isthmin1、nme4、zgc174153、rrbp1b等7个基因在胚盾特异表达。结论系统鉴定到了斑马鱼胚胎胚盾特异表达基因,为下一步研究这些基因的发育生物学功能奠定了基础。; 万传璐闫一芳曹羽王强; 关键词：斑马鱼原位杂交

Nodal信号靶基因dusp4抑制斑马鱼中内胚层形成被引量：1: 2012年; 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2(MKP-2/DUSP4)具有酪氨酸磷酸酶和丝氨酸/苏氨酸磷酸酶活性,可以作用于MAPKs(Mitogen-activated protein kinases)底物,使其去磷酸化。但dusp4在脊椎动物胚胎发育中的功能还所知甚少。为深入了解dusp4在发育中的作用,文章首先检测了其在斑马鱼胚胎的表达。通过整胚原位杂交实验,发现dusp4是斑马鱼母源表达的基因,并且随着发育的进行,在原肠早期特异表达在中内胚层区域。进一步的实验表明,Nodal信号对dusp4的表达至关重要。过表达Nodal信号的配体sqt、dusp4的表达水平明显升高,而在缺失Nodal信号的突变体MZoep中,几乎检测不到dusp4的表达。此外,文章利用反义核苷酸Morpholino(MO)敲降dusp4的表达,中内胚层标识基因gsc、sox17和sox32的表达水平显著升高,而过表达dusp4对中内胚层的形成没有明显的影响,表明dusp4对中内胚层形成的抑制作用是必需的,但不是充分的,可能还有其他未被鉴定的协同作用因子。以上研究结果表明,dusp4基因的表达受到Nodal信号调控,在原肠期具有抑制中内胚层形成的作用。; 刘昭廷魏奭王强; 关键词：转录调控

缺失mir122抑制斑马鱼肝脏前体细胞向肝细胞分化被引量：3: 2013年; 作为机体内最大的脏器之一,肝脏对于机体的新陈代谢、解毒作用以及内环境的稳定有着重要的作用。FGF、BMP以及WNT信号通路及众多转录因子形成的基因调节网络精密调控着肝脏的发育,然而小分子RNA在肝脏形成中的功能却所知甚少。近年来的研究发现,mir122在肝细胞中高表达,对于维持肝脏的代谢功能起着至关重要的作用,但是其在肝脏发育中的功能还不清楚。为了深入探讨mir122在斑马鱼(Danio rerio)胚胎发育中的作用,文章首先检测了mir122在发育过程中的时空表达,发现mir122特异表达在肝脏,并且在肝脏前体细胞向肝细胞分化过程中表达水平显著增高。文章还通过用反义核苷酸Morpholino(MO)敲降mir122的表达,发现敲降mir122对肝脏前体细胞的起源、肝原基的形成以及肝脏前体细胞的增殖没有明显的影响,但是,mir122的缺失导致肝脏前体细胞不能分化为肝细胞。因此,mir122不仅参与了成体肝脏代谢功能的调节,还在肝脏前体细胞向肝细胞分化过程中不可或缺。; 徐冉冉张从伟曹羽王强; 关键词：细胞分化肝脏斑马鱼

三七总皂苷对斑马鱼胚胎初级和次级造血的抑制作用: 2019年; 目的探讨三七总皂苷(Panax notoginsenosides,PNSs)对斑马鱼胚胎造血的作用,为三七的药理学应用提供实验依据。方法通过乙醇提取得到PNSs,用50、100μg/mL的PNSs从75%外包时期开始处理斑马鱼胚胎。收集发育至不同时期的胚胎,检测药物处理后,斑马鱼初级造血和次级造血的分子标记的变化。结果 PNSs处理后,初级造血的分子标记gata1、hbbe3明显下降,生成的红细胞显著减少;PNSs处理还可以抑制造血干细胞(hematopoietic stem cell, HSC)发育。次级造血的分子标记runx1,cmyb在PNSs处理下表达下调,由HSC分化生成的T淋巴细胞分子标记rag1表达也显著降低。有意思的是,PNSs对斑马鱼初级和次级造血的抑制作用均呈剂量依赖效应。结论孕期可能需要慎重使用三七总皂苷药物。; 孙一涵毛爱华王强; 关键词：三七总皂苷造血干细胞斑马鱼

miR-127通过Lefty2调节胚层分化: 研究表明microRNA参与调控动物原肠运动,但是microRNA调控动物原肠发生的分子机制还不清楚.为研究microRNA在小鼠原肠发生过程中的功能,我们通过microarray分析筛选到30个microRNA在小鼠E...; 马海霞李磊林宇赵振奥王强

斑马鱼胚胎背腹轴建立的分子机制被引量：2: 2019年; 脊椎动物胚胎发育起始于体轴的建立,是胚胎早期发育过程中最重要的事件之一。Wnt、BMP、Nodal和FGF等多个信号通路协同调控细胞分化和细胞运动,促进胚胎胚层的形成和空间上的分离,调控胚胎背腹轴、前后轴和左右轴线的分化,为胚胎进一步发育勾勒出蓝图。本文主要综述斑马鱼胚胎背腹轴建立的分子机制,包括背部组织中心简介;母源Wnt/β-catenin信号调控背部组织中心形成的分子机制;BMP信号调控背腹轴建立的分子机制。; 闫一芳王强; 关键词：WNT信号通路斑马鱼

斑马鱼药物筛选模型在人口腔鳞癌中的应用被引量：1: 2022年; 目的建立新型斑马鱼的人口腔鳞状细胞癌(OSCC)药物筛选模型,并在体内实时动态观察山竹醇(Garcinol)对OSCC细胞的影响。方法培养转基因斑马鱼Tg(fli1a:EGFP),不同浓度的Garcinol处理胚胎5天,筛选最适浓度。培养人OSCC细胞系SCC-15,不同浓度的细胞膜红色荧光探针(DiI)标记细胞,筛选最适浓度。通过显微注射建立斑马鱼OSCC模型。通过Garcinol药物实验,实时动态观察0.5μmol/L、1μmol/L Garcinol处理24 h和48 h后对体内OSCC细胞增殖的影响。结果利用斑马鱼初步建立一种新型的OSCC药物筛选模型,并发现天然产物Garcinol能明显抑制斑马鱼体内OSCC细胞的增殖,其抑制能力呈一定的浓度依赖性。结论 Garcinol对OSCC细胞增殖有明显的抑制作用,有作为治疗口腔癌药物的应用前景。此外,斑马鱼OSCC药物筛选模型可以应用于抗口腔癌药物筛选的初步研究。; 文金林康桂花宿颖尹盼盼王强张辛燕; 关键词：斑马鱼 GARCINOL

组蛋白修饰在卵母细胞成熟过程中的变化及作用: 王强; 关键词：组蛋白修饰乙酰化磷酸化卵母细胞减数分裂

microRNA-23a调控斑马鱼颅神经嵴细胞迁移和分化被引量：6: 2017年; 目的探讨miRNA-23a对斑马鱼颅面软骨,尤其是咽区软骨发育过程中神经嵴细胞诱导、迁移和分化的影响。方法通过在胚胎中注射吗啉环修饰的反义核苷酸(antisense morpholino oligonucleotide,MO),抑制胚胎内源性miRNA-23a的活性。阿尔新蓝染色观察敲低mi RNA-23a对斑马鱼颅部软骨发育的影响。整胚原位杂交检测不同发育时期神经嵴细胞特异基因的表达情况。分别在Tg(sox10:EGFP)和Tg(col2a1:h2a-mCherry)转基因胚胎中敲低mi RNA-23a,激光共聚焦显微镜活体检测咽区软骨形成和神经嵴细胞向软骨分化过程中存在的缺陷。结果受精后96小时的敲低miRNA-23a胚胎头部背侧颅骨部分的索旁软骨后段缺失,且头部腹侧咽区软骨中的麦氏软骨、腭方软骨和角舌骨明显变短,基舌骨和角鳃骨缺失。后续的原位杂交实验及共聚焦显微镜拍摄结果表明,敲低miRNA-23a没有影响神经嵴细胞的形成及向头部迁移,但从后脑迁移到咽区的神经嵴细胞明显减少,而且不能分化为成熟的软骨细胞,致使角鳃骨缺失。结论 miRNA-23a对颅神经嵴细胞向咽区迁移并分化为软骨细胞具有重要作用。; 魏安瑶赵鹏辉夏景兰王强杜兴华; 关键词：斑马鱼神经嵴细胞

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