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2株猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离及其基因测序: 2012年; 2006年，我国爆发了高致病性猪繁殖与呼吸综合征（HP—PRRSV），给养猪业造成了严重的经济损失，该HP-PRRSV在Nsp2区有30个氨基酸的不连续缺失。分子流行病学调查证实，目前我国流行的PRRSV毒株主要是HP—PRRSV毒株。2011年，从山东某猪场成功分离到2株PRRSV，分别命名为PRRSV-SDA2和PRRSV—SDA3；基因测序结果显示PRRSV-SDA2全长为15349bp，PRRSV-SDA3全长为15350bp。通过与涵盖欧洲型和北美型的24个毒株全基因比对，发现这2个毒株均属于北美型HP—PRRSV，与HuN4毒株的同源性最高，均高达99．5％，其NSP2蛋白的482和533～561位缺失了30个氨基酸。成功分离的SDA2和SDA32个HP—PRRSV及完成的基因测序，为构建HP—PRRSV毒株的感染性克隆奠定了基础。; 张枫李江南尹曼曼郭东伟刘琴芳王朝翁长江熊涛; 关键词：基因测序 NSP2

非洲猪瘟快速检测方法的建立及主要免疫原基因P54的原核表达: 非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性、发热性、高度接触传染性疾病。世界动物卫生组织将其列为A类动物疫病，我国也将其列为一类动物疫病。本研究通过对非洲猪瘟主要免疫原基因P54基因序列进行分析，查找出P54蛋白的跨膜区在3...; 王晓玲蔺文成胡峰王朝刘朝霞周顺毕克东刘业兵崔尚金; 关键词：非洲猪瘟原核表达

猪捷申病毒8型rVP1-ELISA检测方法的建立被引量：8: 2012年; 为建立猪捷申病毒(PTV)抗体的间接ELISA检测方法,将PTV-8VP1基因克隆至原核表达载体pET-30a中,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta表达重组的VP1蛋白。SDS-PAGE及Western-blot分析结果表明,表达的重组蛋白分子质量约为36.2ku,且能被PTV-8阳性血清特异性识别。以纯化的重组蛋白包被ELISA反应板,建立了检测PTV抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果表明,重组VP1蛋白与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型和猪瘟病毒阳性血清不发生反应。敏感性试验结果表明血清稀释至1∶800时仍检测为阳性。该方法的批内、批间变异系数均小于10%,表明具有较好的重复性。利用建立的方法对633份临床样品进行检测,阳性率是88.10%。选取58份临床样品与间接免疫荧光方法作比对试验,两者的符合率是94.80%。; 胡峰刘杉杉蔺文成王晓玲张超范王朝刘朝霞胡泉博崔尚金; 关键词：猪捷申病毒原核表达间接ELISA

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王朝