王菲
- 作品数：9 被引量：31H指数：3
- 供职机构：遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金遵义市科技局联合基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 过表达miR-125a-5p慢性病毒载体构建方法及其应用
- 本发明公开了过表达miR‑125a‑5p慢性病毒载体构建方法及其应用，构建方法是依据GenBank中has‑miR‑125a‑5p序列，从miRBase中获得成熟的hsa‑miR‑125a和前体序列hsa‑pre‑miR...
- 周建国马虎吕水萍张钰王菲王怡刘大海宋林霞
- 文献传递
- 抑制Rab25基因表达的人NSCLC厄洛替尼耐药细胞PC9/ER的建立被引量：1
- 2016年
- 目的 Rab25在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)等多种肿瘤中过度表达,提示其可能在NSCLC的发生发展及耐药形成中发挥重要作用。为进一步探讨Rab25的功能及其在NSCLC酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)耐药形成中的作用,建立稳定慢病毒介导的shRNA靶向干扰Rab25基因人非小细胞肺癌厄洛替尼耐药细胞PC9/ER稳定株。方法实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)检测PC9/ER及PC9细胞中Rab25基因mRNA的相对表达情况。筛选出Rab25基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA并构建GV248-shRNA-Rab25慢病毒载体,酶切和测序鉴定正确后,经病毒包装,感染PC9/ER细胞,经嘌呤霉素筛选稳定表达细胞株。RT-PCR鉴定PC9/ER的表达,CCK-8检测对厄洛替尼的敏感性。结果 PC9/ER细胞中Rab25基因的mRNA表达水平显著高于PC9细胞。构建的重组慢病毒质粒经测序鉴定正确。RT-PCR证实,干扰Rab25后,PC9/ER细胞株中Rab25表达水平明显降低,抑制率为88.3%。通过传代10次后,PC9ER-Rab25i稳定细胞株中Rab25基因的mRNA表达水平显著低于阴性对照组,P<0.05。PC9ERRab25i稳定细胞株的IC_(50)为(2.133±0.222)μmol/L,显著低于阴性对照组的(6.375±0.799)μmol/L,P=0.007。结论成功构建了Rab25-shRNA慢病毒表达载体,建立了稳定抑制Rab25基因表达的人NSCLC厄洛替尼耐药细胞PC9/ER,初步验证Rab25基因能够改善肺癌EGFR-TKIs获得性耐药,为进一步研究Rab25在NSCLCEGFR-TKIs获得性耐药的机制及逆转其获得性耐药提供了可靠的细胞模型。
- 周建国罗清王菲王怡张钰吕水萍柏玉举沈刚石磊马虎
- 关键词：RAB25NSCLC酪氨酸激酶抑制剂耐药慢病毒
- 厄洛替尼治疗非小细胞肺癌并发贫血的Meta分析被引量：5
- 2016年
- 目的NCCN指南推荐厄洛替尼作为伴有EGFR突变的晚期非小细胞肺癌（non-smallcell1ungcancer，NSCLC）一线治疗的标准方案，但厄洛替尼与贫血发生的相关性无相应的系统评价参考，拟通过系统评价分析厄洛替尼治疗NSCLC并发贫血的风险。方法收集2005-01—2015—06Cochrane图书馆、PubMed、Embase、webofscience、中国学术期刊全文数据库、万方数据库和中国生物医学文献数据库等，纳入厄洛替尼治疗NSCLC并发贫血的随机对照试验（randomizedcontrolledtrials，RCTs）。2名评价者独立评价纳入研究的质量、提取资料并交叉核对，同质研究采用Stata12．0软件进行Meta分析，使用SAs9．0软件进行效能检验。结果共纳入15项研究，包括17个随机对照试验，干预组2380例，对照组2381例。Meta分析结果显示，厄洛替尼单药相比较于单纯化疗而言，所有等级尤其三级以上贫血并发症均明显减少，三级以上相对危险度（riskratio，RR）为0．57，95％CI为0．40～0．81，P=0．002；所有等级RR为0．47，95％CI为0．25～0．89，P=0．015。厄洛替尼联合化疗组，所有等级贫血并发症差异无统计学意义，三级以上RR为1．10，95％CI为0．75～1．63，P=0．626；所有等级RR为0．95，95％CI为0．67～1．35，P=0．764。效能检验结果显示，三级以上贫血并发症的效能为92．0％，总的贫血并发症的效能为10．0％。结论与化疗相比，厄洛替尼单独用药治疗NSCLC能够明显减少贫血并发症的风险；厄洛替尼联合化疗不能降低并发贫血的风险。
- 马虎周建国柏玉举张钰王菲王怡吕水萍
- 关键词：非小细胞肺癌厄洛替尼化疗META分析
- 中国学者在PROSPERO平台注册系统评价/Meta分析的现状调查被引量：8
- 2016年
- 目的了解中国学者在PROSPERO平台注册系统评价/Meta分析(SR/MA)的现状,以期为提高注册率、注册质量,为最终提高SR/MA质量提供参考。方法检索PROSPERO注册平台,查找由中国学者注册的SR/MA,检索时间截至2014年12月31日。由2名研究员独立筛选文献和提取资料,采用Excel 2013建立数据库,Stata 12.0软件进行统计分析。结果截止2014年12月31日,我国学者在PROSPERO平台共注册了322个SR/MA,注册数量呈逐年递增的趋势,以2014年最多(195个,60.6%);研究类型以干预性研究的SR/MA为主(247个,76.7%);涉及21个系统疾病,SR/MA数最多的系统疾病为肿瘤(65个,20.2%);注册者来自全国26个省(市、自治区),注册单位多为"循证医学中心";半数以上(56.2%)的计划书报告了基金资助情况;合作机构为2个及以上的仅占39.8%。结论我国学者在PROSPERO平台注册的SR/MA增长迅速,但绝对数量仍然较少,存在合作意识薄弱,部分省市、科研机构对注册、发表计划书的认识不够等问题。
- 周建国吕水萍张钰葛龙王菲王怡柏玉举田金徽马虎
- 关键词：PROSPEROMETA分析
- 肠内营养支持对接受放化疗的肺癌患者的临床疗效与可行性研究的系统评价
- 目的 系统评价肠内营养支持对接受放化疗的肺癌患者的临床疗效与可行性. 方法 计算机检索相关主要中英文数据库,并手工检索相关营养学杂志.采用The Cochrane Collaboration's tool for ass...
- 黄浪张钰周建国王菲王怡吕水萍李信娟马虎
- 关键词：肠内营养肺癌临床疗效可行性
- Rab25基因3'UTR荧光素酶报告基因载体及突变体的构建
- 2016年
- 目的针对Rab25基因3＇端非翻译区（untranslated region,3＇UTR）构建Rab25荧光素酶报告基因载体及突变体,为研究miR-125a-5p在肺癌耐药中调控其靶基因RAB25提供有效的工具。方法 PCR扩增包含Rab25的3＇UTR的DNA片段,克隆至荧光素酶载体GV306,构建GV306/Rab25＇UTR载体;通过Trget Scan Release 6.2查找Rab25与miR-125a-5p结合区域并设计突变序列,参照构建GV306/Rab25＇UTR载体方法构建GV306/Rab25＇UTR突变载体。结果通过获得Rab25与miR-125a-5p的种子区域及侧翼部分120~126 nt,并上下延伸150 bp,合成Rab25＇UTR,并且在120~126 nt区域设计突变序列,构建了GV306/Rab25 3＇UTR及其突变载体。结论成功构建了含Rab25基因3＇UTR区的荧光素酶报告基因载体及突变体,为进一步研究Rab25在非小细胞肺癌EGFR-TKIs耐药中的作用打下基础。
- 周建国张钰吕水萍王菲王怡柏玉举苟晓丽张廷友沈刚马虎
- 关键词：RAB25非小细胞肺癌基因调节
- 肿瘤微环境中的各组成成分在肿瘤发生、发展中的作用被引量：14
- 2018年
- 肿瘤微环境(TME)是一个极其复杂的内环境网络,由癌症相关成纤维细胞、神经内分泌细胞、脂肪细胞、免疫细胞、血管和淋巴管网络、细胞外基质和物理因素如pH值、乏氧、间质液体压力及其他因素等组成,与肿瘤起始、进展、转移中的每一步都紧密相关。本文基于现有的对肿瘤微环境细胞水平上的研究,针对肿瘤微环境中各细胞成分和各种因子水平的变化在肿瘤的起始、进展、侵袭过程中所起的主要作用作一综述,为肿瘤防治寻找新的靶点提供依据。
- 唐妍张梦梅王菲杨泽韦祥耀王元艳柏玉举
- 关键词：肿瘤微环境免疫逃逸乏氧
- 青蒿琥酯对肺腺癌PC9细胞中Axl及其下游信号分子的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察青蒿琥酯处理前后人肺腺癌PC9细胞增殖率的变化、对Axl与下游信号分子表达水平的变化及凋亡相关蛋白的影响。方法用不同终浓度的青蒿琥酯分别处理PC9细胞,24、48、72 h后通过cck-8检测细胞的增殖率。经25μmol/L及100μmol/L青蒿琥酯分别处理PC9细胞48 h后用qRT-PCR检测Axl、Akt mRNA的表达水平,用Western blot检测Axl、Akt及凋亡相关蛋白的表达水平。结果 1青蒿琥酯以剂量和时间依赖性地抑制PC9细胞的增殖,且凋亡相关蛋白caspase-3、PARP表达上调。2用药48 h后可以下调p-Axl、p-Akt的表达。结论青蒿琥酯能抑制肺腺癌细胞的增殖,导致凋亡相关蛋白表达上调,且能下调Axl及下游信号分子Akt mRNA和蛋白的表达。
- 张钰韩静周建国王菲王怡马虎陈正堂
- 关键词：非小细胞肺癌青蒿琥酯增殖凋亡AXL
- miR-125与肺癌相关性研究进展被引量：2
- 2016年
- 肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,其中85%为非小细胞肺癌,15%为小细胞肺癌。目前认为肺癌的形成是一个多因素、多步骤的过程,其具体的发病机制尚不清楚。microRNA(miRNA)是一类非编码的小分子RNA,能在转录后水平调控基因蛋白的表达,参与肿瘤细胞增殖、分化、侵袭和转移,对非小细胞肺癌的发生和发展与预后具有重要的影响。miR-125是当前研究miRNA在非小细胞肺癌发病机制的热点之一,本文就miR-125在肺癌中的研究进展作一综述。
- 周建国张钰王菲王怡马虎
- 关键词：MICRORNA非小细胞肺癌
