聂飞
- 作品数：3 被引量：16H指数：3
- 供职机构：广东省农业厅更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 应用环介导逆转录等温扩增技术快速检测新城疫病毒被引量：10
- 2008年
- 参考新城疫病毒融合基因(fusion gene,F gene)序列,设计了2对能够特异性地识别F基因上的6个区域的引物,并以此建立了一种简单、快速、有效的环介导逆转录等温扩增(RT-LAMP)方法检测NDV.试验结果表明:该方法用时短(2 h内完成)、特异性好而且灵敏度高,最小检测限可达100 pg;对人工发病样品进行鸡胚分离和RT-LAMP检测,二者的阳性符合率高达93.5%;同时采用镁离子沉淀对检测结果进行可视化处理,方便利用肉眼直接观察.
- 孔令辰侯佳蕾蒋文泓聂飞敖艳华廖明任涛
- 关键词：新城疫病毒
- 新城疫病毒F蛋白免疫活性片段的原核表达被引量：3
- 2008年
- 利用已构建的新城疫病毒F基因重组质粒,通过氨基酸序列分析和InsightⅡ基因工作站的MODELER程序和同源模建技术,预测了试验株F蛋白的表面抗原分布位置。设计引物扩增了2段含有多个抗原位点的多肽片段,通过双酶切定向克隆到原核表达载体pET32a,获得了重组质粒pET32a-F1和pET32a-F2以及2个片段串联起来后克隆的重组质粒pET32a-F3。重组质粒经诱导表达并取产物进行分析,结果显示,F1、F2、F3片段均获得了融合表达。Western-blotting证实,表达产物F1、F2和F3与NDV阳性血清均具有免疫反应性。用表达的重组蛋白加免疫佐剂经皮下接种免疫鸡,免疫2次后产生较高的抗体水平,用100 LD50的超强毒株GD-05-2攻击,重组蛋白免疫组鸡可达到约70%的保护率,并可显著抑制排毒。
- 敖艳华陈晓春廖明蒋文泓聂飞任涛
- 关键词：新城疫病毒F蛋白抗原表位原核表达
- 新城疫病毒单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2009年
- 以纯化的新城疫病毒ND35免疫Balb/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合.经筛选,获得5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株.特异性试验表明,7G5单克隆抗体仅与ND35病毒株反应,而不与禽流感病毒AIV(H5亚型)、产蛋下降综合症病毒(EDS-76V)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、马立克氏病毒(MDV)、禽肺病毒(APV)反应.通过Western-blot对7G5单克隆抗体进行鉴定,发现其在相对分子质量47 500～62 000之间出现条带,表明其与NDV抗原有特异性结合.这5株单克隆抗体属于IgG1、IgG2b亚类,κ轻链.
- 王琴罗晶璐蒋文泓聂飞任涛
- 关键词：新城疫病毒单克隆抗体单克隆抗体制备
