薛雪
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南京医科大学基础医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠感染日本血吸虫后IL22来源细胞的动态观察
- 2013年
- 目的观察C57BL/6小鼠感染日本血吸虫后,体内细胞因子IL 22来源细胞的动态变化,并分析小鼠体内IL 22的主要来源。方法分别提取感染日本血吸虫0、3、5、8、13周的小鼠淋巴结和脾脏细胞,采用流式细胞术检测各个感染时期IL 22来源细胞的比例。结果感染小鼠的淋巴结和脾脏中,产生IL 22的细胞比例显著升高。在所有产生IL 22的细胞中,有80%左右为T细胞。产生IL 22的CD4-T细胞的比例在感染后3周内明显升高,而产生IL 22的CD4+T细胞的比例到感染第3周后才开始升高,至第8周显著增加。结论日本血吸虫感染小鼠的淋巴结和脾脏中,IL 22由T细胞和非T细胞两大群细胞产生,其中T细胞是细胞因子IL 22最主要的来源。产生IL 22的T细胞分为CD4-T细胞和CD4+T细胞两群,其中产生IL 22的CD4-T细胞在日本血吸虫感染早期迅速增加;而在感染进入慢性期后产生IL 22的CD4+T细胞大量增加。
- 李永杨晓玮董潇潇陈晓军徐志鹏张伟伟薛雪孔文珺周莎朱继峰刘丰苏川
- 关键词：日本血吸虫小鼠T细胞CD4细胞
- 日本血吸虫可溶性成虫抗原和虫卵抗原诱导调节性T细胞能力差异的比较被引量：4
- 2013年
- 目的观察并比较日本血吸虫可溶性成虫抗原(SWA)与可溶性虫卵抗原(SEA)诱导CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞水平及其抑制能力的差异。方法分别以PBS、SWA和SEA免疫小鼠,取小鼠脾淋巴细胞,采用流式细胞术检测各组Treg细胞占CD4+T细胞的比例,以及Treg细胞中产IL 10、TGFβ的细胞比例。采用磁珠分选出各组小鼠的Treg细胞后,以3H TdR掺入法检测其抑制靶细胞增殖的能力。结果与SWA相比,SEA可诱导更多的Treg细胞(P<0.05),刺激Treg细胞免疫抑制功能的能力也更强(P<0.05);SWA、SEA免疫小鼠后,SEA刺激Treg细胞产生IL 10、TGFβ的能力更强(P<0.01)。结论SEA较SWA能更好地活化诱导Treg细胞发挥免疫抑制作用。
- 董潇潇张萃杨晓玮李永陈晓军薛雪张伟伟徐志鹏孔文珺朱继峰周莎刘丰苏川
- 关键词：日本血吸虫可溶性虫卵抗原免疫抑制调节性T细胞
- 日本血吸虫可溶性成虫抗原及虫卵抗原对CD4^+T细胞分化的影响被引量：4
- 2013年
- 目的观察并比较日本血吸虫可溶性成虫抗原(SWA)及虫卵抗原(SEA)在诱导CD4+T细胞分化中的不同作用。方法分别用SWA、SEA免疫C57BL/6小鼠后分离脾细胞,或用SWA、SEA体外刺激正常小鼠来源的脾细胞后,采用流式细胞术(FCM)检测脾细胞中产生IFNγ及IL 4的细胞比例,以及CD4+T细胞中Th1、Th2细胞亚群的比例。结果SWA比SEA更能优势诱导CD4+T细胞产生IFNγ(P<0.05),SEA比SWA更能优势诱导CD4+T淋巴细胞产生IL 4(P<0.05)。结论SWA较SEA更能优势诱导Th1细胞分化,SEA较SWA更能优势诱导Th2细胞分化。
- 杨晓玮张萃董潇潇李永徐志鹏张伟伟孔文珺薛雪陈晓军朱继峰周莎贺蕾刘丰苏川
- 关键词：日本血吸虫可溶性虫卵抗原CD4+T细胞分化
- IKK2EE重组慢病毒载体的构建及其在NF-κB信号通路中的功能验证
- 2016年
- 目的:构建含IKK2EE的重组慢病毒载体,并检测其对核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路的影响。方法:以真核表达质粒p MIGR1-IKK2EE为模板扩增出IKK2EE基因片段,并将其插入至慢病毒载体p CDHCMV-MCS-EF1-cop GFP中,构建重组质粒p CDH-IKK2EE。将此重组质粒和NF-κB虫荧光素酶报告质粒共同转染人胚肾上皮细胞(293 T细胞),24 h后检测IKK2EE对NF-κB活性的影响。将重组质粒p CDH-IKK2EE与包装质粒psPAX2和包膜质粒p MD2.G共同转染293 T细胞,包装表达IKK2EE的重组慢病毒,采用病毒梯度稀释法测定病毒滴度。将重组慢病毒感染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),通过免疫印迹法检测IKK2EE以及NF-κB信号通路中相关蛋白的表达,进一步采用免疫荧光法检测NF-κB p65亚基的核定位。结果:质粒双酶切鉴定以及核酸测序比对结果证实重组质粒p CDH-IKK2EE构建成功。虫荧光素酶报告实验结果显示,IKK2EE能够显著增强NF-κB报告质粒的活性。病毒梯度稀释法测得重组慢病毒滴度约为2×107pfu/m L。重组慢病毒感染HUVECs后,蛋白质印迹结果显示,细胞中磷酸化的NF-κB抑制子(inhibitor of NF-κB,IκB)激酶β(IKKβ)表达升高,IκBα表达下降以及磷酸化的p65表达上升。免疫荧光检测结果表明,重组慢病毒介导的IKK2EE能够显著促进HUVECs中NF-κB p65亚基入核。结论:成功构建了含IKK2EE的重组慢病毒载体,且其能够增强NF-κB信号通路活性。
- 薛雪胡敏敏秦娣卢春
- 关键词：核转录因子ΚBIKKΒ转染慢病毒
- ICR小鼠感染日本血吸虫后Tc1和Tc2细胞的动态观察及其功能分析被引量：1
- 2012年
- 目的观察日本血吸虫感染ICR小鼠后不同时期T淋巴细胞中杀伤性T细胞(Tc)亚型Tc1和Tc2比例的动态变化,并分析两者分别与Th1和Th2细胞比例变化的相关性。方法分别取日本血吸虫感染0、3、5、8、13周的小鼠脾脏淋巴细胞,采用流式细胞术检测各个时期Tc1、Tc2和Th1、Th2细胞亚群分别占T淋巴细胞的比例。结果与0周对照比较,感染3、5、8、13周小鼠T淋巴细胞中Tc1细胞比例显著增高(P均<0.01),感染5、8、13周小鼠T淋巴细胞中Tc2细胞比例显著增高(P均<0.01)。比较Tc1和Tc2细胞比例在相同时间点的增速发现,感染3周时Tc1细胞比例增高最显著,而感染5周时Tc2细胞比例的增高最显著。感染各个时间点CD3+T细胞中的Th1细胞比例与Tc1细胞比例平行增长,且两者呈正相关(r=0.978,P=0.004);CD3+T细胞中的Th2细胞比例与Tc2细胞比例平行增长,且两者呈正相关(r=0.974,P=0.005)。体外可溶性成虫抗原(SWA)刺激脾细胞可优势增加T淋巴细胞中的Tc1细胞比例(P<0.01),而可溶性虫卵抗原(SEA)刺激脾细胞可优势增加T淋巴细胞中的Tc2细胞比例(P<0.01)。结论日本血吸虫感染不同阶段,小鼠T淋巴细胞中的Tc1和Tc2细胞比例均显著升高,并分别与Th1和Th2细胞比例呈正相关。在感染3周时主要以Tc1细胞比例升高为主,而感染5周时主要以Tc2细胞比例升高为主。SWA可优势诱导Tc1细胞,而SEA可优势诱导Tc2细胞。
- 徐志鹏张伟伟李永董潇潇李莎莎杨晓玮陈晓军朱继峰薛雪孔文珺周莎贺蕾刘丰苏川
- 关键词：日本血吸虫CD8+T细胞小鼠
