袁玉娟
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：华南农业大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金广东省粤港关键领域重点突破项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 抑制猪Xist基因表达对克隆胚胎发育的影响
- 本研究获得了猪Xist基因，并在Xist基因第1,4,5,6外显子上设计了4对anti-Xist siRNA，成功构建了靶序列与EGFP融合表达的靶质粒。筛选出了干扰效果最好的siRNA1，其对Xist基因表达的抑制效率...
- 黄志华袁玉娟李紫聪刘德武吴珍芳
- 关键词：克隆猪基因敲除胚胎发育
- 文献传递
- 猪Xist基因部分外显子电子克隆与验证及靶除Xist基因载体的构建
- 本实验拟通过生物信息学分析和RT-PCR产物直接测序等方法获得并验证猪Xist基因及其外显子序列，并希望通过敲除供体细胞Xist基因来提高猪的克隆效率。
- 黄志华袁玉娟李紫聪吴珍芳刘德武
- 关键词：克隆效率同源重组
- 稳定转染纤维素酶相关基因的猪胎儿成纤维细胞系的建立被引量：1
- 2013年
- 旨在构建带有双筛选标记的纤维素酶基因的腮腺特异性表达载体,筛选稳定转染该载体的猪胎儿成纤维细胞系,为制备转纤维素酶基因的转基因克隆猪提供核供体细胞。采用SOE-PCR和PCR方法,分别扩增获得筛选标记基因NEO-T2A-EGFP序列和纤维素酶相关基因的融合序列SP-EGX-F2A-BGL1,构建腮腺特异性表达载体pPSP-SP-EGX-F2A-BGL1-CMV-NEO-T2A-EGFP,经PCR、酶切、测序鉴定正确后,通过脂质体转染猪胎儿成纤维细胞,利用G418抗性和绿色荧光蛋白进行稳定筛选,并利用PCR和Western blot进行检测。结果表明,成功构建了带双筛选标记的腮腺特异表达纤维素酶基因的表达载体,并获得稳定转染该载体的猪胎儿成纤维细胞系。该结果为生产腮腺特异表达纤维素酶的转基因克隆猪研究奠定基础。
- 黄妙容张献伟刘德武邹娴帅亮袁玉娟朱财林吴珍芳
- 关键词：纤维素酶
