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贾静
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
刘喆
中国医学科学院北京协和医学院基...
赵雪梅
中国医学科学院北京协和医学院基...
梁平
中国医学科学院北京协和医学院基...
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2008
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抗阿尔茨海默病Aβ人源单链抗体基因的筛选和表达
被引量:3
2008年
目的从人源噬菌体单链抗体库中筛选与阿尔茨海默病发病中起关键作用的B淀粉样多肽(Aβ)142特异性结合的单链可变区抗体(scFv)基因,利用原核生物大肠杆菌进行可溶性表达,以获得抗Aβ142人源抗体。方法利用噬菌体展示技术对人源噬菌体单链抗体库进行多轮富集,以AB1-42啦为抗原经酶联免疫吸附(ELISA)检测,筛选与Aβ1-42特异性结合的阳性噬菌体克隆,再用阳性噬菌体感染E.coli HB2151进行可溶性表达,经SDS-PAGE、Western blot及ELISA法检测scFv单抗的可溶性表达水平及抗原结合活性。并对阳性scFv抗体基因进行基因测序鉴定。结果获得了7个特异性的抗Aβ1-42scFv阳性噬菌体克隆,其中4个克隆ELISA检测吸光度值(A值)高于阴性对照5倍以上;其中1株(A10)获得可溶性单链抗体的成功表达,表达产物主要位于菌体中,ELISA效价显示在全菌蛋白中A值高于对照5倍以上。其相对分子质量约为33000。DNA测序表明所获抗体的可变区基因属于scFv抗体基因,推导得到的氨基酸序列具有典型的抗体可变区结构。结论用人源噬菌体单链抗体库筛选出抗Aβ1-42越的人源抗体单链可变区基因,并成功表达了具有抗原结合活性的可溶性单链抗体,为进一步研究阿尔茨海默病的发病机制和治疗奠定了基础。
贾静
刘喆
赵雪梅
梁平
关键词:
阿尔茨海默病
大肠杆菌噬菌体
淀粉样Β蛋白
抗体生成
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