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乔阳
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
天津医科大学基础医学院
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发文基金:
天津市自然科学基金
天津市高等学校科技发展基金计划项目
教育部留学回国人员科研启动基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
王青松
天津医科大学基础医学院
韩春勇
天津医科大学肿瘤医院
武莉莉
天津医科大学基础医学院
刘艺洁
天津医科大学基础医学院
孙琰
天津医科大学基础医学院
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作者
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吴云丹
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周慧
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年份
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2017
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CRISPR/Cas9系统介导的EZH2基因定点敲入Hut78细胞系的构建
被引量:1
2017年
目的利用CRISPR/Cas9系统构建定点敲入EZH2基因的Hut78细胞系。方法构建EZH2表达载体pMD-18T-EZH2和单向导RNA(sg RNA)表达载体pSpCas9(BB)-2A-Puro-sg RNA,将两个载体共转染Hut78细胞,通过qPCR检测EZH2 mRNA的表达情况,通过Western Blot检测EZH2和H3K27me3蛋白的表达情况。结果测序结果显示,构建的pMD-18T-EZH2和pSpCas9(BB)-2A-Puro-sg RNA表达载体插入序列完全正确。将构建的两个质粒共转染Hut78细胞,qPCR结果显示EZH2基因在RNA水平上表达显著上调;Western blot结果显示EZH2和H3K27me3蛋白表达水平显著提高。结论通过CRISPR/Cas9系统成功构建了定点敲入EZH2基因的Hut78细胞系。
鲁卓林
熊显佳
吴云丹
周慧
贾军
王双林
武莉莉
刘艺洁
乔阳
杨冰
赵秀娟
王青松
韩春勇
张玲
孙琰
关键词:
甲基化
EZH2基因
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