卢晓芳
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中山大学更多>>
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- 条件培养基抑制L-抗坏血酸钠介导的小鼠黑色素瘤细胞凋亡
- 2012年
- 目的探讨肿瘤细胞B16F10通过自分泌对抗由L-抗坏血酸钠(VitCNa)介导的凋亡作用。方法常规在75 cm^2培养瓶中培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10,待细胞长至90%～95%融合时吸取原DMEM/高糖培养液,用PBS反复清洗后加入无血清的DMEM/高糖10ml在培养箱中培养6～8 h,收集培养液用2500 r/min离心5min后上清用0.22μm滤器过滤,-20℃保存备用,在6孔板中每孔接种1×10~6 B16F10,常规培养24h后,实验组每孔加入2ml条件培养液(含有10%胎牛血清),对照组用普通培养液,两组均用10 mmol/L VitC Na促凋亡,分别在3、6、24 h观察细胞凋亡情况,hoechst染核,收集细胞免疫荧光检测caspase3和TUNEL、RT-PCR检测Bcl2表达。进而分离出条件培养液中相对分子质量大于5 000和小于5 000成分,分别煮沸,用蛋白酶K灭活后对B16F10促凋亡。结果发现条件培养基能够抑制VitC Na介导的小鼠黑色素瘤细胞B16F10凋亡,抗凋亡成分小于5 000,且不能被煮沸和蛋白酶K灭活,提示其是小分子抗凋亡物质。结论 B16F10可以分泌出拮抗细胞凋亡的小分子物质。
- 杨旭辉夏添余伟华卢晓芳项鹏何峰
- 关键词：黑色素瘤细胞凋亡条件培养基
- 慢病毒介导shRNA沉默巢蛋白表达对人黑色素瘤细胞转移特性的影响被引量：3
- 2012年
- 目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默黑色素瘤细胞株UACC903巢蛋白(nestin)的表达,研究其对黑色素瘤细胞转移能力的影响。方法以人nestin mRNA编码序列作为干扰靶点,以慢病毒基因PLL3.7作为质粒载体,构建靶向人nestin的shRNA表达质粒,另构建不针对任何已知mRNA的阴性对照shRNA表达质粒,分别感染UACC903细胞并流式分选获得高纯度的nestin干扰或对照组细胞。应用RT-PCR、免疫荧光及Western blotting检测不同组别nestin表达的变化。分别用Transwell侵袭试验检测跨膜细胞的数量评估各组黑色素瘤细胞的侵袭能力,划痕法检测迁移能力改变。光镜观察各组细胞形态变化,免疫荧光检测E-cadherin、N-cadherin和β-catenin在不同组别的表达变化。结果成功构建nestin shRNA慢病毒载体nestin-RNAi-LV。RT-PCR及免疫荧光结果显示干扰组UACC903细胞nestin mRNA及蛋白表达水平较对照组显著降低。nestin下调的UACC903细胞黏附、侵袭及迁移能力下降(P<0.05)。结论慢病毒介导的shRNA能有效地静默食管癌细胞nestin基因的表达,能抑制黑色素瘤细胞UACC903迁移。
- 杨旭辉夏添余伟华卢晓芳项鹏何峰
- 关键词：人黑色素瘤巢蛋白
- 超声引导下细针与粗针穿刺颈部淋巴结对诊断的价值分析被引量：10
- 2019年
- 目的比较超声引导下细针穿刺(FNA)与粗针穿刺(CNB)在诊断颈部良恶性淋巴结的价值。方法回顾性分析2015年1月至2017年5月因颈部淋巴结肿大行穿刺活检的88例患者,进行FNA(n=39例)或CNB(n=49例),比较两种方法诊断颈部良恶性肿大淋巴结的灵敏度、特异度及准确性。结果 39例FNA中33例取材成功,6例取材失败,其中5例最后诊断为反应性增生,1例为菊池病。49例CNB中48例取材成功,1例最后诊断为淋巴瘤的病例CNB取材失败。FNA和CNB取材成功率分别为84. 6%(33/39)、98%(48/49),两者比较差异有统计学意义(P=0. 000)。FNA和CNB诊断颈部淋巴结恶性病变的灵敏度、特异度、准确性分别为90. 9%、94. 1%、92. 3%,97. 2%、100%、98%,差异均有统计学意义(P <0. 01)。FNA和CNB诊断颈部淋巴结转移癌的灵敏度、特异度分别为100%、95. 2%,100%、100%。CNB与FNA诊断颈部淋巴结转移癌的灵敏度差异无统计学意义(P=0. 102),特异度差异有统计学意义(P=0. 000)。结论 CNB诊断颈部淋巴结恶性的灵敏度、特异度及准确性优于FNA。但在诊断淋巴结转移癌时,FNA与CNB灵敏度比较无明显区别,推荐FNA为首选。
- 梁凤平黄容王译斌纪巧梁璇坤王显翔黄羽君卢晓芳徐作峰
- 关键词：淋巴结
- 新型慢病毒载体的构建及其在人骨髓间充质干细胞基因转导中的应用被引量：1
- 2011年
- 背景:构建一个组成性表达某特定基因同时携带荧光报告基因和抗生素筛选基因的慢病毒载体目前未见报道。目的:观察新型慢病毒载体pLVpuro/EF1α-PEDF-IRES-EGFP在人骨髓间充质干细胞基因转导中的表达。方法:通过PCR在PEDF基因的两端加上attB位点,构建表达载体pLVpuro/EF1α-PEDF-IRES-EGFP,将表达载体与包装质粒(ViraPowerTM Lentiviral Packaging Mix)共转染293FT细胞。通过多次感染的方法将慢病毒载体导入人骨髓间充质干细胞,转导后第7天开始使用1～5mg/L嘌呤霉素筛选5d,得到表达PEDF和EGFP的人骨髓间充质干细胞,并进行Western、Elisa的鉴定分析。结果与结论:经PCR和测序证实,慢病毒表达载体pLVpuro/EF1α-PEDF-IRES-EGFP构建成功;将其成功导入人骨髓间充质干细胞,经过筛选获得纯化的过表达PEDF基因的绿色荧光细胞群。
- 卢晓芳杜晶春李磊赖文玉张秀明李伟强杨霞项鹏
- 关键词：慢病毒人骨髓间充质干细胞PEDFEGFP
- PACAP27对Ⅱ型糖尿病诱导的睾丸损伤的保护作用被引量：2
- 2021年
- 目的研究垂体腺苷酸环化酶激活肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,PACAP)对Ⅱ型糖尿病大鼠睾丸损伤的保护作用。方法18只雄性SD大鼠随机平均分为对照组、Ⅱ型糖尿病组和Ⅱ型糖尿病PACAP27干预组3组。腹腔注射链脲霉素和60%高脂饲料喂食,建立Ⅱ型糖尿病模型,通过HE染色观察睾丸细胞形态;通过免疫组织化学染色检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平;通过分光光度计及酶联免疫吸附实验检测睾丸及附睾中的活性氧化物和丙二醛水平,通过Western blot方法检测睾丸细胞中Caspase 9水平。结果糖尿病组大鼠睾丸组织形态明显受损,睾丸活性氧化物和丙二醛增多,VEGF免疫反应性降低,Caspase 9水平升高,而经过PACAP27干预2周后,睾丸损伤明显减轻,活性氧化物和丙二醛的增加、VEGF免疫反应性的降低和Caspase 9水平的升高都在一定程度上得到缓解。结论PACAP27可通过改善糖尿病鼠睾丸氧化应激和睾丸血管损伤以及抑制睾丸细胞的凋亡作用,从而改善Ⅱ型糖尿病引起的睾丸损伤。
- 卢晓芳梁英杰廖定准王冰洋柴翠翠
- 关键词：垂体腺苷酸环化酶激活肽糖尿病睾丸损伤
- 三例肾脏原发少见肿瘤的临床特征及诊治分析
- 2020年
- 目的总结分析3例肾脏原发少见肿瘤的临床特征及诊治方法,提高对肾脏原发少见肿瘤的认识。方法回顾性分析2018年5月至9月于中山大学附属第七医院泌尿外科诊治的术后病理证实的3例肾脏原发少见肿瘤的临床资料。结果3例患者分别为:(1)54岁女性,因体检发现左肾占位1周入院,CT提示左肾巨大软组织肿块及肾门多个肿大淋巴结,行腹腔镜下根治性左肾切除术+淋巴结清扫术,术后病理:肾黏液管状与梭形细胞癌,术后3个月随访肿瘤无复发转移;(2)44岁男性,因左侧腰腹部胀痛1个月入院,MR提示左肾巨大占位病变,开放探查见肿瘤与降结肠粘连明显,遂行根治性左肾切除+降结肠部分切除术,术后病理:肾脏癌肉瘤,术后1个月局部复发并腹腔内多发转移,入肿瘤内科后辅以紫杉醇+多柔比星化疗及阿帕替尼靶向治疗,目前未观察到肿瘤继续恶化;(3)70岁男性,因左侧腰痛伴肉眼血尿3个月入院,CT提示左肾上极不规则低密度灶及腹膜后多发肿大淋巴结,行腹腔镜下根治性左肾切除+淋巴结清扫术,术后病理:高级别浸润性尿路上皮癌,拟二次手术,患者拒绝,术后6个月随访肿瘤无复发转移。结论肾脏原发少见肿瘤临床症状及影像学表现常无明显特异性,容易误诊,应注意鉴别诊断,治疗以根治性切除为主,部分肿瘤预后不良,术后需密切随访,必要时尽早辅以放化疗及靶向治疗。
- 杨祥伟黄儒卢晓芳廖国龙熊海云严彬元唐嘉妮陈楚杰庞俊史复
- 关键词：癌肉瘤尿路上皮癌
- 浅谈如何顺利开展免疫组织化学染色的室间质控被引量：4
- 2021年
- 根据国家卫生健康委以及国家病理质控中心的要求,省级病理质控中心应在本省定期开展免疫组织化学(IHC)染色的室间质量评价(EQA,又称为室间质控)。广东省临床病理质量控制中心开展IHC染色室间质控工作已有10余年,在质控方面积累了比较丰富的经验。本文着重介绍开展IHC染色室间质控的目的、意义、主要流程以及注意事项。希望能给尚未开展或者正在开展IHC染色室间质控的省级或者地级市病理质量控制中心的质控工作提供一些参考和建议。
- 郑晓克侯景辉卢佳斌杜洪卢晓芳颜敏邵春奎王连唐
- 关键词：室间质控IHC免疫组织化学染色
