张双翼
- 作品数：10 被引量：9H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 在LPS诱导的天然免疫反应中前列腺素D_(2)与TLR2和TLR4的相互调控作用
- 2023年
- 体外培养小鼠腹腔巨噬细胞后通过实时荧光定量PCR、Western blot、ELISA和流式细胞仪检测,分析模式识别受体TLR2和TLR4对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导巨噬细胞前列腺素D合成酶表达和PGD_(2)分泌的影响。结果显示,在TLR2或TLR4缺失的情况下,LPS诱导巨噬细胞中H-PGDS和COX-2基因或蛋白的表达(P<0.05),以及PGD_(2)的分泌(P<0.01)会受到不同程度的影响。此外,分析了内外源性PGD_(2)对LPS诱导巨噬细胞TLR2和TLR4表达的影响。结果显示,前列腺素D合成酶抑制剂HQL-79和H-PGDS inhibitorⅠ预处理可显著下调LPS诱导TLR2的表达(P<0.001)。但是,当使用外源性PGD_(2)后,LPS诱导巨噬细胞TLR4的表达水平发生显著下调,而不是TLR2(P<0.05)。结果表明,TLR2和TLR4参与LPS诱导巨噬细胞中PGD_(2)合成分泌,且内外源性PGD_(2)对LPS刺激巨噬细胞诱导TLR2和TLR4的表达具有不同调控作用。
- 李成应巩志国张双翼刘博毛伟
- 关键词：脂多糖环氧合酶-2
- 基于网络药理学和分子对接探究中药复方防治奶牛乳房炎的作用机制被引量：1
- 2023年
- 【目的】通过网络药理学和分子对接技术对蒲公英、连翘和金银花组成的中药复方进行分析及预测,探究该复方在防治奶牛乳房炎中的作用。【方法】通过TCMSP和Herb数据库对中药复方蒲公英、连翘和金银花主要活性成分及相关靶点进行挖掘,于GeneCards和DisGeNET数据库查找奶牛乳房炎的相关靶点取交集,得到该中药复方防治奶牛乳房炎的关键靶点,并构建蛋白互作(PPI)网络;通过DAVID数据库对核心靶点进行GO功能与KEGG通路富集分析;通过AutoDock软件进行分子对接,并运用PyMOL对分子结果进行可视化处理。【结果】中药复方的有效活性成分主要包括山奈酚、七叶苷原、槲皮素、香豆素等,这些药物成分主要作用靶点370个,奶牛乳房炎的相关靶点216个。该中药复方防治奶牛乳房炎有32个预测靶点,主要包括白细胞介素6(IL6)、趋化因子8(CXCL8)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、表皮生长因子受体(EGFR)、肿瘤抑制基因(TP53)和Toll样受体4(TLR4)等。对上述32个靶点进行富集分析发现与正向调控RNA聚合酶Ⅱ启动子转录和正向调控IL10产生等生物过程,细胞核、细胞质、细胞外间隙等细胞组分,细胞因子活性、生长因子活性和受体连接等分子功能,以及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路(P13K-Akt)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)和癌症等通路相关。分子对接结果表明,该中药复方主要活性成分山奈酚和槲皮素均与关键靶点CXCL8和EGFR具有良好的结合活性。【结论】由蒲公英、连翘和金银花组成的中药复方可通过多成分、多靶点和多通路共同防治奶牛乳房炎。本研究为兽医临床应用该中药复方治疗奶牛乳腺炎提供了理论依据。
- 王超巩志国刘鑫煜赵佳敏杨效林王钰于琢雅白云洁曹金山刘博张双翼毛伟高瑞峰
- 关键词：中药复方网络药理学分子对接奶牛乳房炎
- MLKL对金黄色葡萄球菌感染所致小鼠肝脏和肾脏损伤的调控作用
- 2024年
- 运用ELISA、免疫荧光法、苏木素-伊红染色法以及流式细胞术分析了金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)分别感染MLKL基因敲除(MLKL^(-/-))和C57BL/6J小鼠后肝脏和肾脏中促炎性细胞因子(TNF-α和IL-1β)和抗炎因子(IL-10)的分泌、组织脏器的损伤水平、血液中中性粒细胞募集和小鼠存活情况。结果显示,在S.aureus感染MLKL^(-/-)小鼠肝脏和肾脏中TNF-α的分泌水平显著高于C57BL/6J小鼠肝脏和肾脏中TNF-α的分泌水平(P<0.001)。此外,S.aureus感染C57BL/6J小鼠肝脏和肾脏中,IL-10的分泌水平显著高于MLKL^(-/-)小鼠(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,与C57BL/6J小鼠相比,S.aureus感染MLKL^(-/-)小鼠后肝脏和肾脏中组织损伤标志物HMGB1蛋白表达处于较高水平(P<0.01)。病理切片结果显示,使用S.aureus感染后,MLKL^(-/-)小鼠肝脏和肾脏损伤程度显著高于C57BL/6J小鼠。S.aureus感染后,MLKL^(-/-)小鼠血液中CD11b和Gr-1双阳性的比例显著高于C57BL/6J小鼠血液中的比例(P<0.01)。使用高低剂量S.aureus分别感染小鼠后,发现MLKL^(-/-)小鼠的生存率低于C57BL/6J小鼠。结果表明,MLKL对S.aureus感染诱导的宿主细胞因子分泌具有一定的下调作用,进而发挥对宿主脏器损伤的保护作用,降低小鼠的病死率。
- 刘博巩志国赵佳敏于琢雅刘谕泽白云洁王超秦少杰吴敬泽包文慧张双翼
- 关键词：脏器损伤小鼠
- 前列腺素D_(2)对大肠杆菌感染奶牛子宫内膜组织中细胞因子和损伤相关因子表达的影响
- 2024年
- 以体外培养奶牛子宫内膜组织为研究对象,运用ELISA、荧光定量PCR、HE染色和免疫荧光法分析了内源性和外源性前列腺素D_(2)(prostaglandin D_(2),PGD_(2))在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)感染奶牛子宫内膜组织过程中对细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)和损伤相关因子(HMGB-1)表达的调控作用。结果显示,与空白对照组相比较,E.coli感染组奶牛子宫内膜组织中COX-2和H-PGDS的基因表达显著升高(P<0.001);PGD_(2)分泌量也显著上升(P<0.001);内源性PGD_(2)抑制剂(H-PGDS inhibitor 1、HQL-79)能够显著抑制E.coli感染奶牛子宫内膜组织中促炎细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)的分泌、损伤相关因子(HMGB-1)的表达并减轻了组织损伤;外源性添加PGD_(2)后可显著促进E.coli感染奶牛子宫内膜组织中促炎细胞因子的分泌,HMGB-1的表达及组织损伤程度明显增加。结果表明,PGD_(2)能够通过调控E.coli感染奶牛子宫内膜组织的过程促炎细胞因子和损伤相关因子的表达,进而加剧了由细菌感染引起的组织损伤。
- 郭莉莉杨效林龚鹏飞王钰钱英红张双翼何建文刘博刘博曹金山
- 关键词：大肠杆菌细胞因子
- 金黄色葡萄球菌对奶牛中性粒细胞PGE_(2)的分泌及其合成酶COX-2和mPGES-1的影响
- 2023年
- 为了阐明金黄色葡萄球菌感染奶牛中性粒细胞过程中炎症介质PGE_(2)分泌的变化及机制,本试验以体外培养的奶牛中性粒细胞为研究对象,应用金黄色葡萄球菌对其进行感染,采用RT-PCR、Western-blot检测COX-2、m PGES-1基因和蛋白的表达,ELISA检测细胞上清PGE_(2)的分泌量。结果显示,与空白对照组(CON)相比,金黄色葡萄球菌(SA113)组感染奶牛中性粒细胞中COX-2、m PGES-1基因和蛋白的表达明显增高(P<0.001),细胞上清中PGE_(2)的分泌量在感染后第3小时无明显变化(P>0.05),但在第6小时和第9小时分泌量明显上升(P<0.05,P<0.01),在第12小时和第24小时分泌量极显著升高(P<0.001)。为进一步证明COX-2和m PGES-1是否对PGE_(2)的分泌产生影响,本试验加入COX-2抑制剂CAY10404和m PGES-1抑制剂MF63,使用ELISA和RT-PCR检测细胞上清中PGE_(2)的分泌和细胞中PGE_(2)基因的表达。结果显示,在感染后第12小时和第24小时与金黄色葡萄球菌(SA113)组相比,加入CAY10404、MF63和同时加入CAY10404、MF63抑制剂时细胞上清和细胞中PGE_(2)的分泌及其基因的表达明显降低(P<0.001)。结果表明:在24 h内金黄色葡萄球菌感染奶牛中性粒细胞过程中COX-2和m PGES-1合成酶的基因和蛋白的表达及炎症介质PGE_(2)的分泌都是随着细菌感染时间的增加逐渐升高且PGE_(2)的合成和表达受COX-2和m PGES-1合成酶的影响。本试验证明了金黄色葡萄球菌可通过提高奶牛中性粒细胞COX-2和m PGES-1合成酶的表达进而促进炎症介质PGE_(2)的分泌。
- 张凯姜雪莹钱英红王超曹金山刘博刘博巩志国张双翼
- 关键词：金黄色葡萄球菌环氧合酶2
- 布劳恩脂蛋白耐受对大肠杆菌感染诱导奶牛子宫内膜炎症反应的调控作用
- 2024年
- 子宫内膜炎是奶牛常见的生殖障碍疾病,大肠杆菌是引起该病的主要病原微生物。耐受是宿主的一种防御策略,可以减少感染对宿主适应性的负面影响。但布劳恩脂蛋白(Braun lipoprotein,BLP)耐受是否对大肠杆菌感染诱导的奶牛子宫内膜炎具有调控作用目前尚不清楚。本研究分析了BLP对大肠杆菌感染后子宫内膜上皮细胞和子宫内膜组织中炎症介质分泌的影响,以及BLP对子宫内膜组织中HMGB1的表达水平。此外,探究了BLP对子宫内膜上皮细胞中信号通路激活的影响。试验结果表明,BLP的存在可显著下调脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)或大肠杆菌诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞和子宫内膜组织中促炎性细胞因子的分泌水平,同时上调抗炎因子分泌水平。免疫荧光结果表明,BLP可显著降低奶牛子宫内膜组织中HMGB1的表达。值得注意的是,BLP的存在可显著下调LPS或大肠杆菌刺激诱导的MAPK p38和NF-κB p65的磷酸化水平。结果表明,BLP耐受在大肠杆菌诱导的子宫内膜炎中起着至关重要的作用,BLP耐受可显著降低奶牛子宫组织的炎症反应。
- 于琢雅巩志国任佩佩赵佳敏毛伟张双翼刘谕泽吴敬泽刘博
- 关键词：耐受奶牛子宫内膜炎大肠杆菌脂多糖
- 奶牛子宫内膜组织体外培养方法的建立及前列腺素E_2和F_(2α)受体分布的研究被引量：5
- 2016年
- [目的]建立体外培养荷斯坦奶牛子宫内膜组织的方法及检测子宫内膜组织中前列腺素E_2和前列腺素F_(2α)受体的分布情况。[方法]挑选新鲜、健康的发情前期奶牛子宫内膜组织,采集双侧子宫角部位内膜组织,体外悬浮培养组织小块并通过组织学形态鉴定培养效果。通过RT-qPCR方法检测PGE_2受体EP1、EP2、EP3(EP3A、EP3B、EP3C、EP3D)、EP4和PGF_(2α)受体FP的表达情况。[结果]HE染色表明,体外培养的奶牛子宫内膜组织结构完整,细胞和腺体形态完好,细胞核完好;发情前期奶牛子宫角部位内膜组织中PGE_2和PGF_(2α)受体均有表达,且表达量存在差异,其中PGE_2受体EP4相对表达量最高,而EP1、EP3B及PGF_(2α)受体FP的相对表达量较低。[结论]成功地建立了奶牛子宫内膜组织的体外培养方法;PGE_2和PGF_(2α)的受体在奶牛子宫内膜组织中均有表达,但不同受体的表达量有所不同。
- 张双翼毛伟刘博曹金山
- 关键词：PGE2PGF2Α受体
- 雌二醇对奶牛子宫内膜组织中结缔组织生长因子基因表达的影响被引量：1
- 2017年
- 观察雌二醇(17β-estraidol,E_2)对奶牛子宫内膜组织中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)mRNA表达的影响,并探讨雌激素对奶牛子宫内膜组织修复的机制。体外培养奶牛子宫内膜组织,应用荧光定量PCR技术检测E_2对奶牛子宫内膜组织中CTGF mRNA表达的影响。结果显示,与空白对照组相比较,E_2能够极显著(P<0.01)地抑制CTGF mRNA的表达。由研究结果可知,E_2能够对奶牛子宫内膜组织中CTGF的基因表达产生调节作用。
- 李茜如钱英红毛伟刘博刘博张双翼沈媛
- 关键词：雌二醇结缔组织生长因子基因表达
- PTGER2激活对奶牛子宫内膜组织中生长因子表达的影响
- 2023年
- 为了探索并分析用布他前列素(butaprost)激活前列腺素E_(2)(PGE_(2))受体2(PTGER2)后对奶牛子宫内膜组织中参与组织修复过程的生长因子表达的影响,本试验分离并体外培养了奶牛子宫内膜组织,用不同终浓度(10^(-9)-10^(-5)mol/L)的PTGER2激动剂布他前列素处理,分别在相应处理后的时间点(2,4,8,12,18,24,36或48 h)提取组织mRNA和总蛋白,通过实时荧光定量PCR和Westernblot分析奶牛子宫内膜组织中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)、成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor 2,FGF-2)、转化生长因子-β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK-18)和成纤维细胞特异蛋白1(fibroblast-specific protein 1,FSP-1)的表达情况。结果表明,终浓度为10-7mol/L的布他前列素可在不同处理时间点诱导奶牛子宫内膜组织中CTGF、FGF-2、TGF-β1和VEGFA mRNA和蛋白的表达量显著升高(P<0.05)。此外,在使用布他前列素激活PTGER2后,奶牛子宫内膜组织中PCNA、CK-18和FSP-1表达水平也出现显著上调(P<0.05),说明PTGER2的激活可能诱导组织中上皮细胞和成纤维细胞的增殖。上述结果说明,PTGER2的激活可能对奶牛子宫内膜组织的修复具有一定促进作用。
- 冯爽赵佳敏巩志国刘博张双翼
- 关键词：细胞增殖
- 前列腺素F_(2α)-PTGFR通路的激活对奶牛子宫内膜组织中生长因子表达的影响被引量：2
- 2021年
- 子宫内膜修复和前列腺素F_(2α)(PGF_(2α))分泌之间存在正相关关系,但PGF_(2α)在子宫内膜修复中发挥的具体作用目前仍未知。本试验通过体外培养奶牛子宫内膜组织,研究激活PGF_(2α)受体(prostaglandin F_(2α) receptor, PTGFR)对参与子宫内膜修复的一系列生长因子表达的影响。结果显示,在使用氟前列醇(fluprostenol)激活PTGFR后,子宫内膜组织中结缔组织生长因子(CTGF)、成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和血管内皮生长因子(VEGFA)的mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05)。此外,子宫内膜组织中能够代表细胞发生增殖的增殖细胞核抗原(PCNA)水平也出现显著上升(P<0.05)。结果表明,PGF_(2α)-PTGFR通路的激活可通过诱导生长因子的表达对奶牛子宫内膜的生长起到促进作用。
- 冯爽张双翼李茜如赵佳敏巩志国刘博
