徐莹莹
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:温州医科大学更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- γ-GT、γ-GT/ALT与肥胖儿童合并脂肪肝的相关性研究
- 徐莹莹
- 致病性大肠埃希菌毒素基因的Allglo探针技术鉴定被引量:3
- 2014年
- 目的基于Allglo探针技术结合多重荧光PCR,建立快速、简便鉴定致病性大肠埃希菌相关毒素基因的方法。方法选取致病性大肠埃希菌的紧密黏附素基因(eae)、志贺样毒素Ⅰ基因(stx I)、志贺样毒素II基因(stx II)和转录激活因子基因(aggR)作为靶点。通过设计引物和Allglo探针,建立多重荧光PCR反应体系。同时,构建了4种毒素基因标准质粒,进而评价方法的特异性、灵敏性和重复性。结果基于Allglo探针技术的多重荧光PCR方法可同时准确、特异地鉴定致病性大肠埃希菌所携带的4种毒素相关基因,eae基因和aggR基因的灵敏度为10 copies/μL,stx I基因和stx II基因的灵敏度为1 copies/μL;定量检测的批间和批内变异系数均小于5%。对356份腹泻粪便样本进行评价,结果显示检出39份基因阳性。39份阳性样本中,eae基因阳性为53.85%,stxⅠ基因和stx II基因阳性为23.08%,aggR基因阳性为46.15%。通过直接测序方法进行鉴定,符合率达到100.00%。结论本实验建立的基于Allglo探针技术结合多重荧光PCR方法具有操作简便、特异性好和灵敏度高等特点,为致病性大肠埃希菌鉴定提供了一种快速、可靠的检测方法。
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- 关键词:致病性大肠埃希菌毒素基因