李晓娟
- 作品数：13 被引量：36H指数：3
- 供职机构：昆明医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省卫生科技计划项目云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HOTAIR过表达慢病毒载体的构建及稳定细胞株的建立被引量：3
- 2021年
- 目的构建稳定过表达HOTAIR的人滋养细胞HTR-8/SVneo细胞系,并验证HOTAIR的表达。方法利用PCR技术扩增HOTAIR基因全长序列,并将其克隆入LV5载体中,构建LV5-HOTAIR载体,重组质粒经双酶切鉴定及测序验证成功后,转染人胚肾细胞293T,包装过表达病毒颗粒,制备并浓缩慢病毒颗粒。将构建好的过表达HOTAIR慢病毒载体感染HTR-8/SVneo细胞,采用嘌呤霉素筛选出HOTAIR稳定表达的细胞系,荧光显微镜观察绿色荧光表达;qRT-PCR验证HOTAIR表达。结果重组质粒酶切得到的条带与预期相符,过表达HOTAIR慢病毒载体中序列与目标序列一致。荧光显微镜下过表达HOTAIR组细胞有绿色荧光表达;qRT-PCR结果表明过表达HOTAIR的HTR-8/Svneo稳定细胞株中HOTAIR表达是Control组的206.3倍(P<0.05),是NC组的232.8倍(P<0.05)。结论成功建立稳定过表达HOTAIR的HTR-8/SVneo细胞,且过表达HOTAIR的HTR-8/Svneo稳定细胞株中HOTAIR mRNA表达水平明显升高。
- 李晓娟王珏王珏何建萍钱源
- 关键词：慢病毒载体子痫前期
- 维生素D通过下调miR-21的表达促进人胎盘滋养细胞的迁移和侵袭被引量：7
- 2019年
- 目的探讨维生素D对microRNA-21表达的调控作用以及对人胎盘滋养细胞迁移、侵袭能力的影响。方法不同剂量维生素D刺激HTR-8/SVneo细胞24、48、72 h后,RT-qPCR检测microRNA-21表达情况;将miR-21 mimic、miR-21 mimic-nc、miR-21 inhibitor和miR-21 inhibitor-nc分别转染至HTR-8/SVneo细胞,或将miR-21 mimic、miR-21 inhibitor联合维生素D共同刺激细胞,Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,western blot检测E-cadherin、Fibronectin、MMP9的蛋白表达水平。结果维生素D刺激HTR-8/SVneo细胞后抑制了micoRNA-21的表达,且抑制作用呈浓度-时间依赖性增强。单独转染miR-21 mimic抑制HTR-8/SVneo细胞的迁移、侵袭能力,E-cadherin表达水平增加,Fibronectin、MMP9表达水平降低;联合维生素D共同刺激细胞则可以减弱该作用。单独转染miR-21 inhibitor促进了HTR-8/SVneo细胞的迁移、侵袭能力,E-cadherin表达水平降低,Fibronectin、MMP9表达水平增加;联合维生素D共同作用与单细胞独转染miR-21 inhibitor相比,细胞迁移、侵袭能力以及蛋白水平无明显改变。结论维生素D可能通过下调microRNA-21的表达来影响子痫前期发生发展。
- 周芝熠李晓娟蒋国庆王珏钱源
- 关键词：维生素DMIR-21迁移
- 孕晚期产妇血清sHLA-g与子痫前期的Meta分析
- 2020年
- 目的:系统评价孕晚期产妇血清sHLG-g水平与子痫前期发病的相关性。方法:利用计算机检索the Cochrane library、EMBASE、Medline、PubMed、万方、中国知网、中国生物医学文献数据库等数据库,收集2019年8月,以前发表的关于sHLA-g表达与子痫相关性的中英文文献。按纳入与排除标准筛选文献、评价文献质量、提取数据。采用Review Manager 5.3软件对纳入的文献进行Meta分析。结果:最终纳入7篇文献共514例患者(病例组244例,对照组270例)。子痫前期孕妇血清中sHLA-g的表达水平较正常孕妇出现明显下降,差异有统计学意义(MD=-21.14,95%CL[-25.24~17.30])。采用相同的检测试剂的研究共3篇,病例组90例,对照组117例,研究结果间无统计学异质性(χ2=0.10,P>0.05,I 2=0%),病例组血清sHLA-g水平低于对照组,差异有统计学意义(MD=-27.94,95%CL[-35.48~20.40]);采用其它检测试剂的研究共4篇,病例组154例,对照组153例,研究结果间存在统计学异质性(χ2=23.50,P<0.0001,I 2=87%),病例组血清sHLA-g水平低于对照组,差异有统计学意义(MD=-19.47,95%CL[-23.63~15.32])。结论:子痫前期孕妇血清中sHLA-g的表达水平较正常孕妇有明显下降,sHLA-g对于监测子痫前期的发生是一个潜在的生物标志物。
- 王珏李晓娟李晓娟
- 关键词：SHLA-G子痫前期META分析
- 重度子痫前期胎盘microRNA谱差异表达研究被引量：4
- 2019年
- 目的筛选云南地区重度子痫前期孕妇与正常孕妇胎盘组织中microRNA差异表达,探究microRNA与重度子痫前期发病机制的关系。方法通过对3例重度子痫前期患者和3例正常孕妇胎盘组织抽提Total RNA样品检测,Small RNA Sample Pre Kit文库构建,上机行HiSeq测序,获得microRNA的表达数据。对差异表达的microRNA进行差异分析、靶基因预测、靶基因注释等生物信息学分析。结果通过对实验组与对照组microRNA表达谱的对比,筛选出了41个差异表达的microRNA,其中22个表达上调,19个表达下调。对候选靶基因KEGG富集最显著的20条分析结果显示:候选靶基因功能富集通路与Rap1信号通路、雌激素信号通路、焦点黏着、FcγR介导的吞噬作用、调节干细胞多能性的信号通路、钙信号通路、炎症介质调节的TRP通道、Ras信号通路、TGF-β信号通路的炎症介质调节等相关。结论重度子痫前期与正常产妇胎盘组织存在差异表达的microRNA,可能与重度子痫前期的发病机制相关,胎盘组织中差异表达的microRNA为探寻新的重度子痫前期诊断标记物及潜在治疗靶点提供依据。
- 李晓娟周芝熠王珏钱源
- 关键词：重度子痫前期MICRORNAS生物标记物
- ALKBH5通过抑制上皮-间质转化降低人滋养细胞的迁移和侵袭能力被引量：2
- 2020年
- 目的探讨去甲基酶ALKBH5对滋养细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭功能及对上皮-间质转化(EMT)过程的影响。方法将ALKBH5高表达、抑制及其阴性对照NC质粒转染人滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Westen boltting(WB)实验检测各组细胞中ALKBH5 mRNA及ALKBH5蛋白的表达水平。并通过Transwell实验检测转染后滋养细胞迁移、侵袭功能变化,同时通过WB实验检测各组细胞中上皮-间质转化(EMT)相关蛋白:Vimentin、Fibronectin、E-cadherin、N-cadherin、MMP9及MMP2的表达水平。结果ALKBH5组与未转染组(Control)和无意义序列组(NC)相比,ALKBH5 mRNA及蛋白高表达效果显著(P<0.05);shALKBH5组与未转染组(Control)和无意义序列组(NC)相比,ALKBH5 mRNA及蛋白抑制效果显著(P<0.05)。ALKBH5高表达后HTR-8/Svneo细胞迁移、侵袭功能降低(P<0.05),EMT相关蛋白中上皮标记物E-cadherin蛋白表达上调,间质标记物Fibronectin、N-cadherin、MMP2蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。ALKBH5表达抑制后HTR-8/Svneo细胞迁移、侵袭功能增强(P<0.05),EMT相关蛋白中上皮标记物E-cadherin蛋白表达下调,间质标记物Fibronectin、N-cadherin、MMP2蛋白表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ALKBH5通过抑制EMT过程降低滋养细胞迁移、侵袭能力,从而参与子痫前期的发病机制。
- 何建萍李晓娟吕梦欣王珏王珏罗胜军钱源
- 关键词：子痫前期上皮-间质转化细胞迁移细胞侵袭
- 骨肉瘤保肢与截肢治疗的Meta-分析
- [目的]骨肉瘤是一种侵袭性恶性肿瘤,对于接受保肢手术治疗或截肢手术治疗的骨肉瘤患者,其术后生存期和功能恢复的研究被发现存在争议。在本研究中,我们通过Meta分析比较了骨肉瘤患者保肢手术和截肢手术的相关临床指标,旨在明确骨...
- 李晓娟
- 关键词：META分析保肢截肢骨肉瘤
- 维生素D与子痫前期关系研究进展被引量：12
- 2019年
- 子痫前期是妊娠20周后出现血压升高伴蛋白尿,并可出现头痛、眼花、恶心、呕吐、上腹部不适等症状,是围生期严重威胁母儿健康的常见疾病,也是导致孕产妇和围生儿发病率及病死率上升的重要原因。其发生机制尚未完全阐明,若能找到有效预测指标并及早干预将给母儿带来更多益处。维生素D是一种脂溶性维生素,目前以血清25-羟基维生素D[25-hydroxyvitamin D,25-(OH)VitD]水平反映机体维生素D的状况。
- 李晓娟钱源
- 关键词：维生素D子痫前期维生素D受体滋养细胞
- 他汀类药物在肿瘤治疗中的研究进展被引量：2
- 2016年
- 本文概括目前他汀类药物在肿瘤治疗方面的研究进展,阐述了背景、结构、作用机制等相关内容,他汀类药物的进程,各类他汀药物如何发挥作用,在促进细胞凋亡、诱导细胞分化、抑制肿瘤血管生成、抑制肿瘤细胞增殖及他汀与肿瘤的具体研究、进展等相关内容,并展望未来他汀类药物的前景。
- 陈彦锦杨祚璋张晶张曌昕李东奇夏俊峰李惠玲李晓娟李素
- 关键词：他汀类药物肿瘤
- 基于RNA-seq技术对重度子痫前期孕妇胎盘组织差异性表达circRNA的研究被引量：3
- 2020年
- 研究环状RNA在重度子痫前期患者胎盘组织与正常胎盘组织中表达的差异性。选取重度子痫前期(sPE)患者、正常妊娠孕妇的胎盘组织各3例,应用高通量测序技术检测两组样本中环状RNA的表达情况,使用miRanda软件对筛选出的环状RNA进行miRNA靶基因预测。有3007个环状RNA在实验组与对照组中均有表达,其中差异表达的环状RNA共有89个,包含44个上调基因和45个下调基因。多数筛选出的差异表达环状RNA具有has-let-7、miR-100、miR-101、miR-103家族成员的结合位点。研究表明胎盘组织中环状RNA的表达失调可能参与了sPE的发生发展过程。
- 周芝熠李晓娟蒋国庆钱源
- 关键词：高通量测序技术重度子痫前期胎盘
- HOTAIR上调miR-152靶向调控HLA-G的生物信息作用预测与验证
- 2019年
- 目的预测并验证HOX转录反义RNA(HOTAIR)通过上调miR-152-3p对人类白细胞抗原-G(HLA-G)靶向调控作用。方法利用生物信息学网站及软件预测miR-152-3p与HOTAIR和HLA-G基因3′非翻译区(UTR)的结合位点,设计合成含有与miR-152-3p结合位点的HOTAIR和HLA-G基因3′-UTR序列及其突变序列,并构建HOTAIR和HLA-G野生型和突变型双荧光素酶报告基因载体。经双酶切电泳和测序鉴定后,HOTAIR和HLA-G野生型与突变型双荧光素酶报告基因载体分别与miR-152-3p模拟物(mimics)和miRNA无义序列阴性对照(mimicsNC)共转染HTR-8/SVneo细胞,检测荧光素酶活性,观察miR-152-3p对HOTAIR和HLA-G表达的影响。结果双酶切电泳和测序结果显示,野生型和突变型的HOTAIR和HLA-G基因载体片段大小、序列与实验预期一致,载体构建成功。转染miR-152-3pmimics后的HOTAIR及HLA-G野生型荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而对突变型HOTAIR和HLA-G载体的荧光素酶表达无明显抑制作用(P>0.05)。结论HOTAIR通过上调miRNA-152-3p靶向调控HLA-G。
- 李晓娟周芝熠王珏钱源
