目的:探讨PD-L1(Programed Death Ligand-1)表达的调控以及其对Jurkat细胞增殖分化及凋亡的影响。方法:通过IFN-γ在体外诱导Jurkat细胞使PD-L1表达上调,并设计针对PD-L1的siRNA对Jurkat细胞进行转染抑制PD-L1的表达,通过RT-PCR、PCR测定Jurkat细胞分泌IL-2的变化;流式细胞术测定Jurkat细胞的凋亡情况。结果:运用β-actin进行半定量后,根据相应的模板量进行PCR,在设计的3条针对PD-L1的siRNA(siRNA-A,siRNA-B,siRNA-C)中选出一条可以高效抑制PD-L1表达的即siRNA-A,siRNA-A终浓度80nM转染Jurkat细胞24小时后PD-L1的表达明显抑制。使用IFN-γ终浓度2000U/ml作用于Jurkat细胞24小时后PD-L1表达明显增高,通过RT-PCR、PCR观察到PD-L1表达高低与Jurkat细胞分泌IL-2水平呈负相关,流式细胞术显示PD-L1表达增强能降低Jurkat细胞凋亡。结论:体外合成的针对PD-L1基因特异性siRNA,转染Jurkat细胞后可特异性抑制PD-L1的表达。IFN-γ在体外可刺激Jurkat细胞PD-L1表达增高。PD-L1信号在体外对Jurkat细胞分泌IL-2呈负相关,并且PD-L1能抑制Jurkat细胞凋亡。
