王建平
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
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- 多瘤病毒T抗原致癌基因制备转基因动物模型的研究进展被引量：3
- 2012年
- 目的:总结多瘤病毒基因结构与功能,深入分析多瘤病毒T抗原在转基因动物模型中的研究进展。方法:应用PubMed数据库检索系统,以"SV40virus、simian virus40、JC virus、John Cunningham virus和BK virus"为关键词,检索1990-2011的相关文献,共检索到英文文献23 254条。纳入标准:1)多瘤病毒的基因组结构特点;2)多瘤病毒编码产物的生物学功能;3)多瘤病毒在转基因动物模型中的研究进展。根据纳入标准,符合分析的重要文献40篇。结果:多瘤病毒是小的环状闭合双链大约5 000bp的DNA病毒,包括早期编码区、晚期编码区和非编码调控区3个主要功能区。早期编码区通过选择性剪接形成大T抗原和小t抗原,大T抗原参与早晚期DNA的复制和转录调控,并与抑癌基因Rb和p53蛋白结合后使其失活,进而与多种恶性肿瘤发生关系密切。虽然SV40和JC病毒T抗原的序列同源性极高,但是大多数SV40T抗原转基因动物均可出现肿瘤,而JC病毒T抗原大多诱发出神经系统肿瘤,肿瘤的发生主要是由病毒T抗原的正确表达后完整存在决定的。结论:运用多瘤病毒T抗原建立恶性上皮肿瘤转基因动物研究不但可证实其与恶性上皮肿瘤的关系,也为揭示其致癌机制和上皮肿瘤的基因治疗提供重要手段。
- 王建平聂小毳郑华川
- 关键词：抗原致癌物
- 晶状体自发肿瘤转基因鼠脑横截面标本制备及鉴定被引量：4
- 2012年
- 目的确定JCV T抗原诱发晶状体肿瘤转基因鼠脑中肿瘤来源及路径。方法 18月龄转基因鼠麻醉后4%多聚甲醛灌流固定,EDTA脱钙颅骨软化后脑经横截制备石蜡标本并进行HE染色。免疫组化和免疫荧光确定脑组织T抗原表达。结果经过脱钙处理后颅骨组织非常软,横截后发现白色肿瘤组织蔓延至脑组织中,HE染色确定眼部和脑部白色组织均为晶状体肿瘤细胞,免疫组化和免疫荧光结果显示细胞核中存在T抗原强阳性表达。结论 JCV T抗原诱发晶状体肿瘤是经过视神经孔进入脑组织,鼠头横截面组织标本制备对研究头部肿瘤的毗邻关系和肿瘤组织在脑组织中侵袭部位极具应用价值。
- 王建平张梅英勾文峰高野康雄郑华川
- 关键词：转基因鼠T抗原
- JC病毒与恶性上皮肿瘤发生
- JC病毒（JCV）属于多瘤病毒家族成员,是一种环状双链DNA病毒,JCV可保持亚临床潜伏感染状态,一旦免疫系统被破坏后所致溶解性感染可引起进行性多灶性脑白质病。JC病毒基因组早期编码区由同一前体mRNA经选择性剪接分别编...
- 郑华川王建平徐小燕
- 文献传递
- JC病毒T抗原诱导自发肿瘤转基因动物模型建立及发癌机理研究
- 前言:
JC病毒(John Cunningham virus,JCV)是多瘤病毒家族成员之一,还包括SV40和BK病毒。血清学调查显示,普通成人JCV感染率高达80-90%。当机体免疫力低下时,JCV大量繁殖可损伤...
- 王建平
- 关键词：转基因动物JC病毒
- JCV病毒T抗原诱发晶状体上皮肿瘤动物模型建立被引量：5
- 2011年
- 目的利用α-crystallin启动子构建晶状体上皮细胞中JCV T抗原表达转基因鼠,试图建立晶状体自发肿瘤动物模型。方法利用限制性内切酶BclI分离pBSK(pBluescript SK)-T抗原,BamH I同尾连接插入以pBSK为载体的α-crystallin启动子下游,通过NciI酶切电泳分离带有α-crystallin启动子的T抗原核酸序列后显微注射入C57BL/6J小鼠受精卵中。PCR检测转基因阳性鼠及JCV病毒T抗原拷贝数,大体和组织学观察眼球及病变组织,免疫组织化学观察T抗原、p53和β-catenin表达。结果成功构建α-crystallin JCV T抗原表达质粒,转基因阳性鼠中2号鼠(αAT-2)拷贝数最高,该鼠眼球于11个月表现出肿瘤样改变,肿瘤细胞中T抗原、p53和β-catenin呈强阳性表达。结论 JCV T抗原直接诱发晶状体上皮肿瘤动物模型建立为JCV T抗原嵌入所致上皮肿瘤提供了直接实验依据,为JCV所致上皮肿瘤发生和演进分子机理研究奠定坚实基础,同时为抗肿瘤药物筛选及基因治疗监控提供了良好的动物模型。
- 王建平张梅英徐小燕王巍夏蒲郑志宏王禄增高野康雄郑华川
- 关键词：JC病毒T抗原转基因鼠晶状体
- 大鼠面神经压榨损伤对面神经核神经元p27蛋白表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的研究p27在面神经纤维压榨伤后大鼠面神经核中的表达变化及其作用。方法制做成年大鼠面神经压榨伤模型,观察大鼠行为变化,利用免疫组织化学技术观察大脑面神经核运动神经元中p27蛋白表达的时程变化。结果面神经纤维压榨伤后压榨侧触须垂下,拂动消失,眼睑不能闭合。1周后面神经功能开始恢复,4周后完全恢复正常。检测面神经压榨侧6h、12 h、1周、2周、3周、4周等时间点p27含量均高于正常侧,差异有统计学意义(P<0.05),而在1 d、2 d、3 d时压榨侧与健侧相比无统计学差异﹙P>0.05﹚。结论面神经压榨伤后早期p27升高可能与机体的应激反应有关,晚期p27升高的机制可能是与其参与损伤神经元的DNA修复有关。
- 王巍王建平
- 关键词：P27面神经
- 胃癌组织中ATBF1蛋白的表达及临床病理意义被引量：2
- 2012年
- 目的观察胃癌发生和演进过程中ATBF1蛋白表达的作用及相关机制。方法福尔马林固定、石蜡包埋的胃癌及癌旁黏膜标本制作成组织芯片,制备4种ATBF1抗体(NT440、1-12、D1-120和AT6)后进行免疫组化反应,检测胃癌中ATBF1蛋白表达,并比较其与胃癌临床病理特征和ki-67表达的关系。结果胃癌中细胞质NT440和AT6阳性表达率低于癌旁黏膜(P<0.05),但细胞核NT440的表达与其相反(P<0.05)。老年胃癌患者中D1-120和AT6的阳性表达率高于年轻患者(P<0.05),D1-120和AT6表达与胃癌淋巴结转移或局部脉管侵袭呈正相关(P<0.05)。值得注意的是,胃癌中1-12和ki-67阳性表达水平呈正相关(P<0.05)。结论胃癌发生和演进中异常ATBF1表达及核质转位发挥重要作用,ATBF1表达通过调节细胞增殖参与胃癌局部脉管侵袭和淋巴结转移。
- 王建平勾文峰川口诚高野康雄郑华川
- 关键词：胃癌癌发生演进增殖
- 选择性剪接变异体的RT-PCR检测及结果分析被引量：1
- 2012年
- 目的利用RT-PCR方法检测并分析mRNA选择性剪接变异体。方法针对糖原合成酶激酶(GSK)3β和B细胞转位基因(BTG)3基因变异体差别设计引物,利用RT-PCR扩增后进行电泳和克隆DNA测序。结果 GSK3β和BTG3的RT-PCR产物电泳均出现3条带,经过电泳和克隆DNA测序发现GSK-3β中上面2条带为同一产物。对BTG3上(位于319 bp)、下(位于70 bp)2条带进一步PCR扩增后测序,结果发现3个条带均为同一产物。结论 RT-PCR法检测选择性剪接产物操作方便,对Western蛋白印迹结果评价具有指导意义,但是产生的非特异条带可能是由于某种特殊原因造成,如选择性剪接部位的特异核酸序列,需DNA测序做进一步确定。
- 勾文峰杨雪徐小燕王建平郑华川
- 关键词：选择性剪接RT-PCR
