王春艳
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 未成熟血小板在血小板减少性疾病中的应用
- 目的 应用Sysmex XN-20全自动血细胞分析仪检测外周血中的未成熟血小板分数(IPF％)和未成熟血小板绝对值(IPF＃)，探讨其在血小板减少性疾病中的临床应用价值。方法 对该分析仪检测IPF％和IPF＃进行性能评价...
- 邱凯刘志伟王春艳孙德华
- 关键词：血小板减少性疾病
- 不同离心方法提取及鉴定精浆外泌体的效果比较被引量：2
- 2019年
- 目的超速离心法、ExoPerfect^(TM)?MU法和PEG6000法比较提取精浆外泌体的应用报道较少。文中旨在比较及鉴定超速离心法,ExoPerfect^(TM)?MU法及PEG6000法提取的精浆外泌体,为外泌体的研究提供不同的选择方法。方法收集2017年3月至7月南方医科大学南方医院检验中心30例正常志愿者的精浆样本。随机平均分成3份,分别采用超速离心法,ExoPerfect^(TM)?MU法及PEG6000法获取提取物,随后采用纳米颗粒跟踪分析仪分析其大小,透射电子显微镜观察其形态,蛋白印迹法检测其典型标志蛋白质。结果超速离心法提取的精浆外泌体中CD63、TSG101含量[(3.29±0.22)、(0.84±0.03)]最多,其次分别是ExoPerfect^(TM)?MU法[(3.25±0.17)、(0.75±0.02)]、PEG6000法[(2.62±0.06)、(0.54±0.10)],差异有统计学意义(P<0.05)。纳米颗粒跟踪分析仪结果提示MODE曲线线性流畅,精浆外泌体直径大小较为集中,粒径峰值平均值分别为105、102、115 nm,差异无统计学意义(P>0.05)。PEG6000法提取精浆外泌体的浓度、电镜下数量[(11.90±1.78)×108/mL、(4.7±1.7)个]较超速离心法[(21.20±0.98)×108/mL、(7.0±1.6)个],ExoPerfect^(TM)?MU法[(19.74±1.45)×108/mL、(6.0±1.63)个]均明显降低(P<0.01);ExoPerfect^(TM)?MU法离心时间[(30±5)min]较超速离心法、PEG6000法[(140±20)、(120±10)min]明显缩短(P<0.001)。结论超速离心法、ExoPerfect^(TM)?MU法、PEG6000法均能成功提取及鉴定精浆外泌体。超速离心法、ExoPerfect^(TM)?MU法外泌体产量较多,ExoPerfect^(TM)?MU法简捷方便。根据不同试验的实际需要,选择合适高效的外泌体提取方法尤为重要。
- 郭文彬张万松杨诚卞军杨建昆刘存东亓涛王春艳
- 关键词：精浆外泌体超速离心PEG6000
- 基于PEG6000富集精液来源外泌体的提取及鉴定被引量：10
- 2016年
- 目的介绍PEG6000富集精液来源外泌体的提取和鉴定方法,为精液外泌体相关研究奠定基础。方法选自南方医科大学南方医院检验中心6名正常志愿者精液,经8%PEG6000富集并多步离心结合超速离心方法获取提取物,然后采用透射电子显微镜观察其形态,纳米颗粒跟踪分析仪分析其大小,蛋白印迹法检测其蛋白组成成分。结果提取物呈类圆形、椭圆形囊泡,质膜完整,大小约为30-150 nm,内部含有低电子密度物质,均阳性表达CD63、ALIX、TSG101蛋白,且不含精子细胞内质网Calnexin蛋白。结论经过对提取物的形态、大小以及其蛋白成分分析证实所提取到的物质为精液来源的外泌体,为后续开展精液外泌体临床及基础研究提供了方法学基础。
- 杨诚郭文彬张万松卞军杨建昆亓涛王春艳刘存东
- 关键词：精液外泌体PEG6000离心
