刘蓉
- 作品数:2 被引量:6H指数:2
- 供职机构:江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 应用抗黄曲霉毒素单链抗体检测酱油中黄曲霉毒素B1被引量:3
- 2011年
- 利用本实验室制备的抗黄曲霉毒素B1的单链抗体(ScFv),通过棋盘实验确定了抗原抗体的最适工作浓度,在此之上根据间接竞争酶联免疫法(ELISA)绘制标准曲线,检测酱油中AFB1的含量;通过改变样品的盐浓度及pH来确定其对ELISA检测结果的影响。研究结果表明,利用ScFv检测黄曲霉毒素的最小检测值为0.10ng/mL,平均加标回收率在84%~109%之间,本文建立的ELISA方法在pH5~8,盐浓度小于10%时较稳定。本文建立的利用抗AFB1的ScFv检测黄曲霉毒素含量的方法方便快捷,稳定性较好,并且成本较低,适合于食品中黄曲霉毒素的检测。
- 刘蓉杨炼孙秀兰张根义张灏姚卫蓉
- 抗黄曲霉毒素B_1单链抗体的表达载体的比较被引量:4
- 2010年
- 目的:比较4种不同的pET载体在表达抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的单链抗体(scFv)克隆的特点,确定用以表达scFv-H4的合适载体。方法:将目的基因H4分别克隆到载体pET20b、pET22b、pET28a和pET32a上,分别转入大肠杆菌BL21(DE3)或Origami(DE3)中,比较诱导过程中细胞的生长状况和诱导结束后细胞破碎液中scFv-H4的生物活性以及细胞各部分包涵体。结果:pET20b和pET22b能表达具有生物活性的scFv-H4,这些具有生物活性的蛋白主要存在于周质中;pET28a和pET32a不能表达有生物活性的scFv-H4,而pET32a仅能在细胞质中产生大量的包涵体。结论:pET22b可能是表达AFB1的单链抗体较优的表达载体。
- 杨炼刘自琴刘蓉陈海琴陈卫张灏
- 关键词:黄曲霉毒素单链抗体大肠杆菌PET