吴靖
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
- 供职机构:北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 江西省猪细环病毒1型和2型流行情况调查及全基因组克隆与序列分析被引量:4
- 2016年
- 目前在我省许多地区猪群中是否存在TTSuV感染尚未见相关报道,为更好的了解猪细环病毒1型和2型在猪群中进化情况以及进一步研究其遗传变异,根据NCBI已发表的猪细环病毒两种基因型全基因组序列,在序列保守区域用设计特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)进行该病毒的检测及全基因的扩增。通过将扩增产物胶回收后进行T-A克隆,然后进行序列测定和同源性与系统进化分析。本试验检测出猪群TTSuV1型和TTSuV2型在猪群中的感染情况,全基因测序得到的序列确定为TTSuV1和TTSuV2全基因序列。对测得序列进行同源性分析与遗传进化分析,分析结果表明,分离株(JX TTSuV)与国内外不同地域TTSuV全基因组序列之间差异较大,同源性为67.8%~97.2%;进化分析表明,JX TTSuV与其他株TTSuV参考株亲缘关系远近各不相同,与日本分离株(AB076001)和巴西分离株(AY823991)亲缘关系较近。
- 田光玲何后军张黎王伟松叶丽娜吴靖蔡高峰
- 关键词:全基因组
- 抗牛传染性鼻气管炎病毒囊膜gD糖蛋白的单链抗体在昆虫细胞中表达及活性检测被引量:4
- 2017年
- 为了获得具有生物学活性的牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gD蛋白特异性单链抗体,试验采用PCR方法扩增杂交瘤细胞的cDNA单链抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,通过重叠延伸PCR及Linker序列获得完整的单链抗体基因,将单链抗体基因克隆至杆状病毒载体pFB-LICBse中,构建重组转移载体pFB-VH-VL,将其转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒rBacmid-VHVL,将重组杆粒rBacmid-VH-VL转染至Sf9细胞中获得携带单链抗体基因的重组杆状病毒。该重组杆状病毒在Sf9细胞中表达了分子质量约为30ku的单链抗体蛋白。Western blotting结果显示,重组单链抗体蛋白能被His标签抗体特异性结合,也能特异性结合gD蛋白。间接免疫荧光试验结果显示,该单链抗体蛋白能够识别感染牛肾细胞MDBK中的IBRV。本研究在昆虫细胞中成功表达了具有识别IBRV的gD蛋白特异性单链抗体,为牛传染性鼻气管炎的诊断与治疗奠定了基础。
- 吴靖许健黄秀芬沈俊俊何后军李永清
- 关键词:牛传染性鼻气管炎病毒单链抗体杆状病毒表达系统
- 猪细环病毒2型ORF1截短基因的原核表达被引量:1
- 2015年
- 细环病毒(rITrV)又称输血传播病毒,是隶属于指环病毒科的一种环形DNA病毒。输血传播病毒于1997年由日本学者从一名输血后的肝炎患者血清中发现,人群感染率可达10%以上。1999年,美国学者在猪体内发现猪源细环病毒(TorquetenoSUSvirus,TTllSuV),之后世界各地陆续可见TTSuV病例的报道一。
- 张黎田光玲王伟松蔡高峰吴靖何后军
- 关键词:DNA病毒原核表达基因日本学者输血