夏丹 作品数:14 被引量:86 H指数:8 供职机构: 安徽中医药大学 更多>> 发文基金: 安徽省自然科学基金 国家自然科学基金 安徽省教育厅重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
黄芩苷联合氟康唑对白念珠菌生物膜的抑制作用研究 被引量:12 2015年 目的探讨中药有效成分黄芩苷(baicalin,BA)联合氟康唑(fluconazole,FLC)对白念珠菌(Candida albicans,C.albicans)生物膜的抑制作用。方法通过棋盘法考察BA联合FLC对白念珠菌浮游菌与生物膜的部分抑菌浓度指数(FICI);通过时间-杀菌曲线检测两药联合对白念珠菌标准株(C.albicans SC5314)的杀菌作用;以XTT减低法和干重法检测两药联合对白念珠菌SC5314生物膜代谢及生物量的影响;采用扫描电镜(Scanning electron microscopy,SEM)和激光共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)观察两药联合对白念珠菌SC5314生物膜形态结构的影响;以水-烃法检测两药联合对白念珠菌SC5314生物膜细胞表面疏水性(cell surface hydrophobicity,CSH)的影响;通过实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,qRT-PCR)检测两药联合对白念珠菌生物膜和CSH相关基因表达的影响。结果黄芩苷与氟康唑联用抗白念珠菌浮游菌的FICI介于0.28~0.75之间,对生物膜的FICI介于0.16~0.5之间,表现为协同作用;SEM和CLSM在生物膜结构上验证了两药的协同效果;两药联合可降低生物膜表面疏水性,以及使ALS1、ALS3、EAP1、SUN41和CSH1分别下调6%、51%、24%、13%和39%。结论黄芩苷具有协同氟康唑抗白念珠菌生物膜作用。 颜贵明 施高翔 邵菁 汪天明 夏丹 汪长中关键词:黄芩苷 白念珠菌 生物膜 氟康唑 黄连解毒汤乙酸乙酯提取物抑制白念珠菌菌丝的形成 被引量:8 2014年 目的:探讨黄连解毒汤乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Huanglian Jiedu decoction,EAHD)对白念珠菌菌丝形成的影响。方法:以0,78,312,1 250 mg·L-1EAHD干预白念珠菌6 h,采用倒置显微镜、荧光显微镜及扫描电镜分别观察白念珠菌菌丝形态;固体培养基上观测菌落形态;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测白念珠菌菌丝形成相关基因HWP1,ALS3,UME6,SUN41,CSH1,Ca PDE2的表达量。结果:312,1 250 mg·L-1EAHD可显著抑制白念珠菌菌丝的形成及菌落的形态;qRT-PCR检测显示1 250 mg·L-1EAHD使HWP1,ALS3,UME6,CSH1表达分别下调4.13,3.64,2.46,2.75倍,SUN41表达上调7.26倍,Ca PDE2表达无变化。结论:EAHD可能通过抑制HWP1,ALS3,UME6,CSH1等相关基因的表达来抑制白念珠菌菌丝的形成。 汪天明 严园园 施高翔 夏丹 邵菁 汪长中关键词:白念珠菌 菌丝 新医科背景下基础医学实验教学改革与实践 被引量:5 2021年 “新医科”背景下深入探讨基础医学实验教学面临的挑战,整合基础医学实验教学资源,构建“多层次覆盖、多学科融合”的立体化实验教学体系,积极探索切实可行的基于器官和系统的整合医学模式下基础医学实验教学的方法和措施,为新时期基础医学实验教学体系和模式的构建提供经验和借鉴。 王靓 王舒舒 夏丹 洪星辉 宋睿 邹莹莹关键词:基础医学实验 教学改革 黄连解毒汤醋酸乙酯提取物对白色念珠菌毒力因子的作用 被引量:5 2014年 目的探讨黄连解毒汤醋酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Huanglianjiedu Decoction,EAHJD)对白色念珠菌毒力因子的作用。方法分别采用卵黄培养基法检测磷脂酶(PL)活力、牛奶平板法检测天冬氨酸蛋白酶(Sap)活力、橄榄油乳化法检测脂肪酶(Lip)活力;水-烃两项测定实验检测细胞表面疏水性(CSH);RT-PCR法检测毒力因子相关基因的表达。结果 EAHJD对PL的活力无影响;1 250μg/m L EAHJD可显著抑制Sap与Lip的活力,312μg/m L EAHJD效果次之;EAHJD对CSH呈现剂量依赖性抑制,CSH1分别下调了7.69、3.57、2.95倍;分泌型酶相关基因在EAHJD作用下呈现不同倍数的变化,其中PLC1、Sap2、Sap3、Sap9、Lip3、Lip4、Lip6下调,PLB1、PLC2、Sap10、Lip5无明显变化。结论 EAHJD可抑制白色念珠菌毒力因子的活力。 汪天明 严园园 夏丹 施高翔 邵菁 汪长中关键词:黄连解毒汤 白色念珠菌 毒力因子 磷脂酶 天冬氨酸蛋白酶 基于PKCδ/NLRC4/IL-1Ra轴对NLRP3炎症小体的负调控研究白头翁汤正丁醇提取物治疗外阴阴道念珠菌病的作用机制 被引量:4 2023年 该研究旨在从PKCδ/NLRC4/IL-1Ra轴负调控NLRP3炎症小体的角度探讨白头翁汤正丁醇提取物(n-butanol alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB)治疗外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)小鼠的作用机制。实验中,将雌性C57BL/6小鼠分为6组,分别为空白对照组,VVC模型组,BAEB高、中、低剂量组(80、40、20 mg·kg^(-1))和氟康唑组(20 mg·kg^(-1)),除空白对照外,其余各组利用雌激素依赖性的方法构建VVC小鼠模型,模型构建成功后,空白对照组不作处理,BAEB高、中、低剂量组分别给予80、40、20 mg·kg^(-1)BAEB治疗,氟康唑组给予20 mg·kg^(-1)氟康唑治疗,VVC模型组则灌胃等量的生理盐水。每日观察各组小鼠的一般状态和体质量;革兰染色观察小鼠阴道灌洗液中白念珠菌形态的变化;微量稀释法检测小鼠阴道分泌物的真菌载量,处死小鼠后,巴氏染色法检测阴道灌洗液中中性粒细胞的浸润程度,enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)法检测阴道灌洗液中炎症因子interleukin(IL)-1β、IL-18以及lactate dehydrogenase(LDH)的含量;hematoxylin-eosin(HE)染色进行阴道组织病理学分析;免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测阴道组织中NLRP3、PKCδ、pNLRC4、IL-1Ra的表达和分布;免疫荧光(immunofluorescence,IF)检测阴道组织中pNLRC4、IL-1Ra的表达与分布,免疫印迹(Western blot,WB)检测阴道组织中NLRP3、PKCδ、pNLRC4、IL-1Ra的蛋白表达;qRT-PCR检测NLRP3、PKCδ、pNLRC4、IL-1Ra mRNA的表达。结果显示,与空白对照组比较,VVC模型组小鼠阴道出现红肿以及白色分泌物,与VVC模型组比较,BAEB能改善VVC小鼠的一般状态。革兰染色、巴氏染色、微量稀释法以及HE染色结果显示,与空白对照组比较,阴道灌洗液中分布有大量菌丝且有大量中性粒细胞浸润,阴道灌洗液中真菌载荷显著增加,阴道组织黏膜被破坏且有大量炎性细胞浸润,BAEB可减少白念珠菌菌丝形成,BAEB中、高剂量组可显 胡凯帆 莫玲 张浩 夏丹 施高翔 吴大强 汪天明 邵菁 汪长中关键词:负调控 白头翁汤正丁醇提取物对白念珠菌VVC临床株体外生物膜形成的抑制作用 被引量:9 2015年 目的探讨白头翁汤正丁醇提取物(Butyl alcohol extract of Bai Tou Weng decoction,BAEB)对分离自外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)的白念珠菌临床分离株(以下简称VVC临床株)生物膜形成的影响。方法采用微量稀释法测定BAEB对白念珠菌的最低抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC);甲基四氮盐(XTT)还原法测定BAEB对白念珠菌生物膜代谢活性的影响,Time-kill法检测BAEB对白念珠菌活菌数的影响;结晶紫染色法测定BAEB对白念珠菌生物膜生物量(Biomass)的影响;扫描电镜(SEM)观察BAEB对白念珠菌生物膜形态结构的影响;激光共聚焦显微镜(CLSM)检测BAEB对白念珠菌生物膜荧光信号强度的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测生物膜相关基因UME6、PES1和HSP90的转录水平变化。结果 BAEB对12株白念珠菌的MIC在64~256μg/mL之间,对白念珠菌生物膜的SMIC80(抑制80%生物膜形成的最低药物浓度)为1 024μg/mL或以上;Time-Kill曲线显示在12h之后,512、1 024μg/mL浓度的BAEB对白念珠菌均具良好的杀伤作用;结晶紫染色法表明512、1 024μg/mLBAEB能够减少其生物膜生物量;SEM观察到1 024μg/mL BAEB能够有效抑制白念珠菌在不同黏附介质上生物膜的完整度;CLSM显示512、1 024μg/mL的BAEB可以明显降低生物膜荧光信号强度;qRT-PCR检测显示在256、512、1 024μg/mL的BAEB作用下,UME6转录水平分别下调了72%、71%、77%,在512、1 024μg/mL的BAEB下HSP90转录水平上调了2.23和3.31倍,而PES1未有明显变化。结论 BAEB可以抑制白念珠菌VVC临床株体外生物膜的形成。 张梦翔 陆克乔 夏丹 夏雪 施高翔 邵菁 吴大强 汪天明 汪长中关键词:白念珠菌 外阴阴道念珠菌病 生物膜 基于NLRP3炎症小体研究白头翁汤正丁醇提取物对白念珠菌定植下小鼠溃疡性结肠炎的作用机制 被引量:16 2022年 目的研究白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB)对白念珠菌异常定植下的葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium salt,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用,以及对Dectin-1/脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,Syk)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)信号通路的影响。方法将105只C57BL/6小鼠随机分为对照组、DSS组、DSS+白念珠菌组及BAEB低、中、高剂量(20、40、80 mg/kg)组和美沙拉嗪(200 mg/kg)组。对照组小鼠每日自由饮水;DSS组予3%DSS溶液,自由饮用连续7 d;其他组在DSS组基础上,在第1、3、5、7天ig白念珠菌(1×108 CFU/只)。第8天开始分别ig相应药物,1次/d,连续7 d。每天称定小鼠质量,观察一般状态,收集粪便,采用平板培养法检测粪便真菌载荷。末次给药次日,处死小鼠,测量结肠长度,苏木素-伊红(HE)染色法进行结肠组织学分析;ELISA法检测结肠组织炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-18水平;免疫组化法检测结肠组织Occludin和闭锁连接蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)表达;Western blotting检测结肠组织Dectin-1、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、Syk、凋亡相关微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cleaved cysteinasparate protease-1,cleaved Caspase-1)和NLRP3蛋白表达。结果与对照组和DSS组比较,DSS+白念珠菌组小鼠粪便培养出更多的白念珠菌(P<0.01);结肠黏膜损伤程度严重(P<0.01);结肠组织炎症因子IL-1β、IL-18水平明显升高(P<0.01);结肠组织Occludin和ZO-1蛋白表达明显下降(P<0.05);结肠组织NLRP3、NF-κB和Dectin-1蛋白表达水平显著升高(P<0.01),ASC、cleaved Caspase-1和Syk蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。与DSS+白念珠菌组相比,BAEB组小鼠肠道白念珠菌显著减少(P<0.01);结肠组� 王亚东 徐志庆 徐志庆 张梦翔 夏丹 邵菁 张梦翔关键词:白念珠菌 溃疡性结肠炎 白头翁汤正丁醇提取物对白念珠菌VVC临床株黏附作用的影响 被引量:11 2015年 目的探讨白头翁汤正丁醇提取物(Butyl alcohol extract of Bai Tou Weng decoction,BAEB)对外阴阴道念珠菌病(Vulvovaginal Candidiasis,VVC)白念珠菌临床分离株黏附作用的影响。方法平板法检测与BAEB共培养2 h、4 h时白念珠菌的CFU;XTT还原法检测与BAEB共培养2 h、4 h的白念珠菌代谢活性;试管法检测白念珠菌絮凝能力;水-烃两相法检测白念珠菌细胞表面疏水性(cell surface hydrophobicity,CSH);荧光显微镜观察菌体活力;扫描电镜观察白念珠菌细胞形态;qRT-PCR法检测黏附相关基因ALS1、CSH1、HWP1、ALS5、ALA1、INT1、MNT2与ALS3的表达。结果 512、1 024μg/m L BAEB可显著抑制黏附2 h、4 h时的白念珠菌的CFU及代谢活性;肉眼和倒置显微镜下观察发现512、1 024μg/m L BAEB可明显延缓絮凝产生的时间;256、512、1 024μg/m L的BAEB均能够显著减少白念珠菌的细胞表面疏水性;qRT-PCR检测表明1 024μg/m L的BAEB作用后,ALS1、CSH1、ALA1、ALS3、INT1、HWP1分别下调18.7%、36%、37.8%、29.6%、19.9%、21.6%,ALS5与MNT2未产生明显变化。结论 BAEB可能通过调节黏附相关基因抑制白念珠菌VVC临床株的黏附作用。 张梦翔 夏丹 施高翔 陆克乔 邵菁 吴大强 汪天明 汪长中关键词:外阴阴道念珠菌病 白念珠菌 白头翁汤抑制小鼠阴道念珠菌的增殖并降低炎性细胞因子水平 被引量:10 2016年 目的研究白头翁汤对外阴阴道念珠菌病(VVC)小鼠Th17细胞及炎性因子的调控作用。方法选取昆明种雌性小鼠72只,随机分为空白对照组、模型组、氟康唑治疗组、(7.5、15.0、22.5)g/kg白头翁汤治疗组。通过对注射雌二醇造成假发情期的小鼠阴道灌注白念珠菌复制出VVC小鼠模型,经过7 d治疗,采用稀释涂布法检测VVC小鼠阴道白念珠菌载荷;Gram染色法观察VVC小鼠阴道分泌物白念珠菌形态;ELISA检测VVC小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、IL-17、IL-21、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;免疫组织化学染色法检测阴道组织中的转录因子维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)的含量。结果成功建立了VVC小鼠模型;与模型组相比,22.5 g/kg白头翁汤治疗组与氟康唑治疗组的VVC小鼠阴道内白念珠菌载荷数量显著性减少;Gram染色显示,VVC小鼠阴道分泌物中,模型组小鼠含有大量白念珠菌菌丝,7.5 g/kg白头翁汤治疗组小鼠仍有大量较长菌丝,15 g/kg白头翁汤治疗组小鼠虽有菌丝但部分白念珠菌为酵母相,22.5 g/kg白头翁汤治疗组与氟康唑治疗组未见菌丝,只有少量酵母相;经过7 d治疗后,与模型组比较,氟康唑治疗组、(15.0、22.5)g/kg白头翁汤治疗组VVC小鼠血清中IL-6、IL-17、IL-21、TNF-α水平降低;氟康唑治疗组、(15.0、22.5)g/kg白头翁汤治疗组VVC小鼠阴道组织中RORγt水平降低。结论白头翁汤可抑制VVC小鼠白念珠菌增殖并降低炎性细胞因子水平。 夏丹 张梦翔 施高翔 徐志庆 吴大强 邵菁 汪天明 汪长中关键词:白头翁汤 白念珠菌 黄连解毒汤乙酸乙酯提取物对光滑念珠菌黏附作用的影响 被引量:6 2015年 目的:探讨黄连解毒汤乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Huanglian Jiedu decoction,EAHD)对光滑念珠菌Candida glabrata黏附作用的影响。方法:采用二倍稀释法测定黄连解毒汤乙酸乙酯提取物对光滑念珠菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);采用XTT还原法评价EAHD对光滑念珠菌黏附作用的影响;利用倒置显微镜、扫描电子显微镜与荧光显微镜观察EAHD对光滑念珠菌早期黏附形态学影响;采用半定量与实时荧光定量PCR检测其黏附相关基因EPA1,EPA6和EPA7的表达量。结果:EAHD对光滑念珠菌的MIC为320 mg·L-1,阳性对照药氟康唑对光滑念珠菌的MIC为1 mg·L-1;EAHD对光滑念珠菌2,4 h的黏附的干预作用较明显,其中对4 h效果优于2 h;PCR结果显示EAHD可显著抑制EPA1,EPA6和EPA7的表达。结论:EAHD可能通过抑制光滑念珠菌部分黏附基因的表达而抑制其早期黏附。 汪天明 张梦翔 施高翔 严园园 邵菁 夏丹 汪长中关键词:光滑念珠菌