孙慧力
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
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- 内质网蛋白29在维持肾小管上皮细胞极性中作用
- 2018年
- 目的观察内质网蛋白(ERP)29在大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型中表达变化及对细胞极性蛋白Par-3表达的影响。方法选取清洁级雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组(n=6)与模型组(n=18)。假手术组打开腹腔及分离输尿管,未进行结扎;模型组打开腹腔,双结扎左侧输尿管后缝合切口,造模为UUO模型大鼠。模型组于术后第3、7、14天各处死6只大鼠,假手术组6只大鼠于第14天处死。取两组大鼠肾组织,Western印迹、免疫荧光、免疫组化法进行病理染色及检测E-钙粘素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Par-3蛋白和ERP29蛋白表达情况。结果 Masson染色显示,模型组大量肾小管萎缩消失,广泛纤维化,且肾间质的纤维化程度逐渐加重。Western印迹及间接免疫荧光/免疫组化结果显示,模型组E-cadherin表达、细胞极性Par-3蛋白、ERP29表达下调;α-SMA表达上调。模型组14 d的E-cadherin蛋白表达与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05);模型组各时点α-SMA表达均较假手术组上调,差异有统计学意义(P<0.05);模型组14 d时Par-3蛋白表达下调显著,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05);模型组各时间点ERP29蛋白表达与假手术组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 UUO大鼠模型中发生肾小管上皮细胞转分化过程中,肾小管上皮细胞中ERP29表达下调,可能通过减少细胞极性蛋白的表达而致上皮细胞极性丧失,提示ERP29在维持肾小管上皮细胞极性中发挥重要作用。
- 王向阳孙慧力王康郭宝春张欣洲
- 关键词：上皮细胞转分化细胞极性
- 比较分析气阴两虚型IgA肾病患者与正常人肾系膜细胞的蛋白质组学被引量：4
- 2010年
- 目的:创建气阴两虚型IgA肾病患者与正常人的血清IgA1刺激人肾系膜细胞的蛋白质组学图谱,并分析表达有差异的蛋白,试图寻找IgA肾病的特异性生物标志物及筛选药物治疗IgA肾病的可能靶点。方法:①Jacalin亲和层析联合分子筛层析分离气阴两虚型IgA肾病患者与正常人血清IgA1并用Western blot方法鉴定;②双向电泳技术分离气阴两虚型IgA肾病患者与正常人血清aIgA1刺激肾系膜细胞的蛋白质,凝胶用银染显色,扫描仪获取凝胶图像并对其进行软件分析。结果:同组实验重复3次,IgAN(Test)组蛋白质点数有(602±13)个,匹配率平均为95.97%;正常人(Control)组有(569±5)个,匹配率平均为93.27%,具有较好的重复性。IgAN组与正常人组比较,表达增加大于3倍的点有22个,且有8个点仅表达于IgAN组,有6个点仅表达于正常组。结论:气阴两虚型IgA肾病患者与正常人的肾系膜蛋白表达有差异,这可能与IgA肾病的发生发展有密切关系。
- 程小燕李顺民孙慧力戈娜
- 关键词：IGA肾病气阴两虚系膜细胞蛋白质组学
- 内质网蛋白29在肾小管上皮细胞转分化中的作用被引量：1
- 2017年
- 目的:观察TGF-β1诱导的正常大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)转分化过程中内质网蛋白29(ERP29)表达变化及上调表达ERP29蛋白对TGF-β1诱导NRK52E细胞极性蛋白Par-3的影响。方法:应用TGF-β1(10 ng/ml)刺激NRK52E细胞,采用Western印迹和免疫荧光方法分别检测内质网蛋白29、Par-3mRNA及蛋白的表达;应用Lipofectmine2000将ERP29质粒瞬时转染NEK52E细胞,采用Western印迹方法检测细胞极性蛋白Par-3表达变化。结果:TGF-β1刺激后,NRK52E细胞内质网蛋白29表达呈时间依赖模式逐渐下调,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。脂质体转染外源性质粒pcDNA/ERP29上调表达ERP29可显著上调表达细胞极性蛋白Par-3。结论:TGF-β1诱导NRK52E细胞转分化进程中内质网蛋白29表达显著下调,基因转染上调表达ERP29可显著提高细胞极性蛋白Par-3表达,提示ERP29在维持细胞极性、阻抑转分化进程中发挥重要作用。
- 王向阳张蓉蓉孙慧力王康郭宝春张欣洲
- 关键词：上皮细胞转分化细胞极性
