孙航
- 作品数：5 被引量：47H指数：4
- 供职机构：大连海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家海洋公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 太平洋鳕ATG5基因的克隆及表达分析被引量：4
- 2015年
- ATG5(Autophagy related gene 5)基因是一种自噬相关基因,是形成自噬体的重要基因,ATG5基因的表达对自噬调控的成熟有重要作用。本研究中通过克隆,首次得到太平洋鳕Gadus macrocephalus ATG5c DNA部分序列,该序列长为895 bp,含有完整的开放阅读框(Open reading frame,ORF),编码275个氨基酸,其编码的蛋白质相对分子量约为32 200;经核苷酸序列比对发现,太平洋鳕ATG5核苷酸序列与半滑舌鳎Cynoglossus semilaevis、尼罗罗非鱼Oreochromis niloticus ATG5核苷酸序列的相似性均高达87.27%;利用太平洋鳕与其他物种ATG5核苷酸序列构建系统进化树,结果显示,ATG5核苷酸序列系统进化树反映的亲缘关系基本符合传统分类学观点;氨基酸序列分析结果显示,ATG5蛋白氨基酸序列具有较高的保守性;利用绝对荧光定量PCR方法对ATG5基因在太平洋鳕各组织中的转录水平进行检测,结果显示,肝、脾和肾中的表达量高于其他组织,鳃、肾、脾、脑、肝和肌肉各组织中的ATG5 mRNA拷贝数分别为11.617 08、20.449 25、19.706 87、4.839 84、27.434 97、2.954 75 copies/ng。本研究结果将为进一步研究太平洋鳕细胞吞噬机制奠定基础,也为太平洋鳕的免疫机理和相关研究提供基础数据。
- 孙航毛明光蒋洁兰姜志强李幸温施慧
- 关键词：克隆
- 太平洋鳕IRF3基因的克隆及绝对定量表达分析被引量：2
- 2015年
- 本研究通过克隆首次得到太平洋鳕(Gadus macrocephalus)干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)的部分序列。该序列长1878 bp,包含长1377 bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),编码459个氨基酸,其编码的蛋白质分子量约为51 k D。经氨基酸序列比对发现,太平洋鳕IRF3的氨基酸序列包括1个含有5个保守色氨酸残基的DNA结合域(DNA binding domain,DBD)和1个保守的C端IRF关联域(IRF association domain,IAD);系统进化树分析表明,太平洋鳕IRF3与其他物种的IRF3亲缘关系较近。应用绝对荧光定量PCR方法对IRF3在不同组织和不同日龄(days post-hatching,dph)仔鱼的表达水平进行检测,并对干扰素在仔鱼期的免疫作用进行分析。组织表达绝对定量结果显示,性腺,肝和胸腺表达量高于其他组织。不同日龄仔鱼IRF3表达量结果显示,IRF3在受精卵就已经表达,在25 dph表达量大幅提高。本研究的结果为进一步研究太平洋鳕干扰素作用机制以及其在早期发育中的作用奠定了基础。
- 孙航姜志强蒋洁兰温施慧李幸暴宁苏鹏毛明光
- 关键词：干扰素
- 太平洋鳕神经坏死病毒衣壳蛋白(CP)的原核表达及条件优化被引量：8
- 2016年
- 为深入研究太平洋鳕Gadus macrocephalus神经坏死病毒(Pacific cod nervous necrosis virus,PCNNV)衣壳蛋白(capsid protein,CP)的功能,将PCNNV cp基因连接到p ET-32a原核表达载体中,构建原核表达重组载体p EVCP,将其转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)表达系统中进行融合表达,对诱导剂IPTG浓度、诱导时间和温度等诱导表达条件进行优化,采用SDS-PAGE及质谱技术鉴定表达产物。结果表明:本研究中成功构建了重组载体p EVCP,表达的目的蛋白相对分子质量约为55 000;目的蛋白经质谱鉴定,有6个肽段的氨基酸序列与预期一致;对重组菌株p EVCP/BL21的最佳诱导条件为IPTG浓度0.1 mmol/L、最佳诱导时间3 h、温度30℃。本研究结果可为后续冷水鱼类病毒疫苗的研制及病毒快速检测试剂盒的研发奠定基础。
- 毛明光温施慧姜志强蒋洁兰孙航吕绘倩李幸
- 关键词：神经坏死病毒衣壳蛋白原核表达
- 绒杜父鱼卵营养成分分析及评价被引量：16
- 2014年
- 为了对绒杜父鱼卵的营养品质进行评价,本试验采用常规方法对绒杜父鱼卵的一般营养成分以及氨基酸和脂肪酸组成进行测定。结果表明:绒杜父鱼卵中粗蛋白质含量为17.26%(鲜重基础),总氨基酸(TAA)、必需氨基酸(EAA)和非必需氨基酸(NEAA)含量分别为78.77%、33.24%、38.95%(干重基础),EAA/TAA、EAA/NEAA分别为0.42、0.85;蛋氨酸+半胱氨酸为第一限制性氨基酸,其氨基酸评分(AAS)为0.82,化学评分(CS)为0.47。绒杜父鱼卵的必需氨基酸指数(EAAI)为75.19。绒杜父鱼卵中粗脂肪含量为2.83%(鲜重基础),其中饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)分别占脂肪酸总量的24.73%、23.86%、50.29%。此外,绒杜父鱼卵中C20∶5n-3(EPA)+C22∶6n-3(DHA)含量高达40.59%,EPA/DHA为0.68。由此得出,绒杜父鱼卵具有较高的营养价值,较为适合生产鱼子酱。
- 杨晶晶姜志强左然涛王双耀温施慧孙航
- 关键词：氨基酸脂肪酸营养评价
- 壳寡糖对红鳍东方鲀血液指标和非特异性免疫指标的影响被引量：17
- 2016年
- 为研究壳寡糖(chitosan-oligosaccbarides,COS)对红鳍东方鲀Takifugu rubripes血清和血液生化指标及非特异性免疫指标的影响,选用体质量为(129.2±3.1)g的红鳍东方鲀600尾,随机分为C0、C1、C2、C3 4组,每组设3个平行,在基础饲料中分别添加0、500、1000、2000 mg/kg的壳寡糖,经56 d饲养后,测定其血液指标、抗氧化酶活性及其攻毒耐受性。结果表明:饲料中添加壳寡糖能显著提高血清中碱性磷酸酶、溶菌酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活力和全血中血小板数量(P<0.05),各项指标随壳寡糖添加量的增加整体呈升高趋势;饲料中添加壳寡糖能显著提高红鳍东方鲀肝脏组织中过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活力(P<0.05),显著降低丙二醛含量(P<0.05);壳寡糖能明显提高红鳍东方鲀对迟缓爱德华氏菌和哈维弧菌的抵抗力。研究表明,在本试验条件下,饲料中添加2000 mg/kg壳寡糖能够提高红鳍东方鲀的非特异性免疫功能。
- 苏鹏潘金露韩雨哲刘海映霍圃宇孙航姜志强
- 关键词：红鳍东方鲀壳寡糖血清生化指标非特异性免疫
