崔彩云
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：贵州师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 小立碗藓C3H基因敲除载体的构建及C3H1-nptⅡ?C3H2目的片段最佳PCR条件筛选被引量：2
- 2016年
- 以小立碗藓作为试材,将总长为1 981bp的小立碗藓C3H基因分为上游片段(1 000bp),下游片段(981bp),并以此设计引物,得到上游臂(C3H1,735bp)、下游臂(C3H2,700bp)。在C3H1引物设计时引入XhoI、EcoRV酶切位点到两端,C3H2设计时引入NdeI、BamHI酶切位点到两端。以小立碗藓总DNA为模板,通过PCR扩增得到C3H1和C3H2片段。将C3H1和C3H2插入到pTN182载体中,获得敲除载体(C3H1-pTN182-C3H2质粒),通过PCR获得C3H1-nptⅡ?C3H2目的片段,并且采用单因素方法研究引物浓度与退火温度对PCR产物浓度及特异性的影响。结果表明:引物浓度为0.20μmol/L,退火温度为58.7℃,PCR产物特异性最高且产物浓度较高。
- 崔彩云晏国洪姜山
- 关键词：H基因基因敲除退火温度
