目的探讨镉暴露对HepG2细胞转录因子NF-E2相关因子2(NRF2)信号通路的影响。方法采用甲臢比色法测定CdCl_2(0、1、2.5、5、10、25、50、100、200μmol/L)处理24 h后,HepG2细胞活力变化;应用蛋白免疫印迹法检测CdCl_2(1、2、5、10、20μmol/L)处理细胞6 h后,NRF2蛋白水平;采用RT-q PCR方法检测10μmol/L CdCl_2处理细胞2、4、6、12、24 h后,GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 m RNA水平变化,检测CdCl_2(1、2、5、10、20μmol/L)处理细胞6 h后,GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 m RNA水平变化。结果 HepG2细胞活力随镉处理剂量升高而降低(P<0.05);与对照组(0.60±0.01)比较,1、2、5、10、20μmol/L镉处理组HepG2细胞NRF2蛋白表达水平[分别为(0.65±0.01)、(1.37±0.04)、(1.94±0.05)、(2.24±0.07)、(2.22±0.05)]均明显升高(P<0.05);与对照组比较,镉处理6 h时,HepG2细胞内GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 m RNA水平[分别为(45.76±7.04)、(114.21±5.23)、(59.52±1.50)、(674.13±27.12)]明显升高(P<0.05);与对照组比较,5μmol/L镉处理组HepG2细胞内GCLC和GCLM m RNA水平[分别为(24.77±2.16)、(29.93±0.67)]升高,2μmol/L镉处理组HepG2细胞内HO1和AKR1C1 m RNA水平[分别(28.55±2.02)、(186.32±12.63)]升高(P<0.05)。结论镉暴露能激活HepG2细胞系中NRF2信号通路。
目的研究急性亚砷酸钠暴露对小鼠主动脉NF-E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)通路的影响。方法选择健康成年清洁级雄性野生型C57BL/6小鼠作为实验动物。将15只小鼠按体重随机分成4组,分别为0(对照,n=3)及2、6、12h亚砷酸钠染毒组(n=4)。采用腹腔注射方式给予5 mg/kg亚砷酸钠溶液。将10只小鼠按体重随机分成3组,分别为对照(磷酸盐缓冲溶液,n=3)组和1.25 mg/kg(n=4)、5 mg/kg(n=3)亚砷酸钠染毒组。采用腹腔注射方式染毒6 h。检测小鼠主动脉中Nrf2及其下游基因谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚单位(GCLC)、谷氨酰半胱氨酸连接酶修饰亚单位(GCLM)以及NAD(P)H醌氧化还原酶(NQO1)m RNA的表达水平。结果与对照组相比,5 mg/kg亚砷酸钠染毒2 h小鼠主动脉GCLC m RNA的表达水平及染毒6 h小鼠主动脉GCLM、NQO1 m RNA的表达水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05);而亚砷酸钠染毒不同时间小鼠主动脉Nrf2 m RNA的表达水平无明显变化。且随着亚砷酸钠染毒时间的延长,小鼠主动脉Nrf2、GCLC、GCLM及NQO1 m RNA的表达水平均呈先上升后下降的趋势。与对照组相比,5 mg/kg亚砷酸钠染毒6 h小鼠主动脉GCLC、GCLM及NQO1 m RNA的表达水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05);而各剂量亚砷酸钠染毒6 h小鼠主动脉Nrf2 m RNA的表达水平均无明显改变。且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,小鼠主动脉Nrf2、GCLC、GCLM及NQO1 m RNA的表达水平均呈上升趋势。结论急性亚砷酸钠处理能激活小鼠主动脉Nrf2通路,提示急性无机砷暴露引起主动脉内发生氧化应激。
