李贞煌
- 作品数：1 被引量：8H指数：1
- 供职机构：河南农业大学园艺学院更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金博士科研启动基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 黄瓜DAMD反应体系的建立及种质遗传资源研究被引量：8
- 2010年
- 通过L16（45）正交试验,研究Mg^2＋、dNTPs、Taq酶、引物和模板DNA对黄瓜DAMD（direct amplificationof minisatellite region DNA）反应的影响.结果表明,适宜的DAMD反应体系包括1×Taq酶缓冲液、1.5 mmol/LMg^2＋、0.25 mmol/L dNTPs、1.2 UTaq酶、2.0μmol/L引物和10-80 ng模板DNA,总体积20μL.采用该体系并结合温度梯度PCR,确定了15种小卫星核心DNA引物的适宜退火温度.利用这些引物对20份不同类型的黄瓜材料进行扩增,引物平均检测到10.2个位点,平均多态性位点7.3个,平均多态性百分率71.4%.PCA分析表明,20份材料明显可分为3个区域,第I区包含绝大部分华南型黄瓜,第II区包含绝大部分华北型黄瓜,第III区为野生型黄瓜.此结果与SSR标记的研究结果基本一致,证明本实验构建的DAMD反应体系的稳定性及DAMD标记的可行性.
- 胡建斌张帆李贞煌李雅鸽刘丹花王建丽李建吾
- 关键词：黄瓜正交设计DAMD种质资源
