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可诱导剔除选择标记基因的pBLCK载体及其构建方法: 本发明公开了一种可诱导剔除选择标记基因的pBLCK载体及其构建方法，涉及DNA重组技术。本发明所述pBLCK载体是在pBRACT806载体的基础上，经过多次酶切、连接、转化操作，引入ubiquitin启动子序列、loxP...; 谢晓东丁博杨文丽郭雨李明王俊斌陈小强陈帅君; 文献传递

小麦TaWRKY71a基因克隆、生物信息学及表达分析被引量：10: 2018年; WRKY蛋白是主要存在于植物体内一类转录因子家族,在植物的生长发育和逆境应答中发挥重要作用。为了揭示小麦WRKY基因功能,从普通小麦中克隆出Ta WRKY71a基因后进行氨基酸序列分析,并对Ta WRKY71a基因在不同组织及不同胁迫条件下的表达模式进行分析。结果表明,Ta WRKY71a基因编码一个含有355个氨基酸的蛋白质。氨基酸序列分析显示,Ta WRKY71a蛋白含有1个WRKY结构域及1个C2H2锌指结构。预测分析表明,Ta WRKY71a蛋白定位在细胞核;其二级结构包含28.17%的α-螺旋、16.34%的延伸链、4.79%的β-转角和50.70%的无规则卷曲。不同物种间WRKY蛋白的同源性分析比较表明,Ta WRKY71a与粗山羊草WRKY71、水稻WRKY71、高粱WRKY71和拟南芥WRKY40的氨基酸序列之间具有高度的保守性。q RT-PCR分析表明,Ta WRKY71a在叶、根、茎、花和种子中均有不同程度表达,并受ABA、Na Cl和PEG诱导表达,推测该基因可能参与小麦逆境胁迫应答。研究结果为进一步研究Ta WRKY71a的生物学功能奠定了基础。; 王俊斌杨文丽杨文丽丁博吴天文谢晓东; 关键词：小麦克隆基因表达生物信息学

小麦TaWRKY46-1基因克隆及建立在Gateway技术上的可诱导表达载体的构建被引量：2: 2011年; 以小麦品种扬麦158为材料,根据NCBI中小麦TaWRKY46基因序列设计引物,采用RT-PCR技术从小麦总RNA中分离了大小为870 bp的cDNA片段。测序表明,该片段与NCBI中已克隆的小麦TaWRKY46基因高度同源,包含完整的读码框,值得注意的是此蛋白保守氨基酸序列WRKYGQK突变为WRKYGEK,为TaWRKY46的新等位基因,命名为TaWRKY46-1。采用Gateway克隆技术构建了该基因的可诱导型超量表达载体,并转化农杆菌,为接下来转基因验证TaWRKY46-1的功能奠定了基础。; 李明丁博牛有雄吕芳芳杨文丽Silin Zhong孙守钧谢晓东; 关键词：小麦 WRKY转录因子

用于单子叶植物启动子功能分析的pUKGF载体构建被引量：2: 2014年; 为了对单子叶植物重要性状相关基因启动子进行研究,以载体pGWB450为基本骨架,利用酶切方法将ubiquitin启动子序列和NPTⅡ抗性基因引入该载体,构建了新载体pUKGF。其转基因单子叶植株可通过卡那霉素进行抗性筛选;另外,该载体含有Gateway元件,启动子可高效重组到该载体中;启动子下游是绿色荧光蛋白基因,根据该报告基因的表达部位,可确定启动子功能的组织特异性。该载体在单子叶植物启动子鉴定方面将有广阔的应用前景。; 丁博杨文丽李明王俊斌陈帅君谢晓东; 关键词：单子叶植物启动子绿色荧光蛋白限制性内切酶

TA载体pEASY-T1 Simple在基因克隆中的新应用被引量：4: 2011年; 在基因克隆操作中,由于常用克隆载体多克隆位点的酶切位点数目有限,造成一些DNA片段的克隆、连接受限。为解决这一问题,本文利用pEASY-T1 S imp le载体无酶切位点的特点,通过TA克隆的方法引入多个单一酶切位点,并对所构建的克隆载体进行了验证。最后证明,这种方法可高效构建含有不同多克隆位点的载体,克服了对常用克隆载体的依赖,大大提高了基因操作的灵活性和有效性。; 杨文丽丁博王俊斌李明吕芳芳谢晓东; 关键词：TA克隆 SIMPLE 多克隆位点

可诱导剔除选择标记基因的pBLCK载体及其构建方法: 本发明公开了一种可诱导剔除选择标记基因的pBLCK载体及其构建方法，涉及DNA重组技术。本发明所述pBLCK载体是在pBRACT806载体的基础上，经过多次酶切、连接、转化操作，引入ubiquitin启动子序列、loxP...; 谢晓东丁博杨文丽郭雨李明王俊斌陈小强陈帅君

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杨文丽