胡金龙 作品数:5 被引量:30 H指数:3 供职机构: 滨州医学院 更多>> 发文基金: 山东省科技发展计划项目 山东省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
大肠癌中Beclin1、LC3和mTOR的表达及意义 被引量:15 2014年 目的探讨Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达及意义。方法采用免疫组化En Vision法、Western blot和RT-PCR技术检测Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果 Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的阳性率分别为90.50%、87.19%和46.28%,均明显高于癌旁组织(P<0.05),且LC3蛋白在中+低分化大肠癌中的表达(91.34%、89.58%)高于高分化大肠癌(77.61%),在有淋巴结转移组的表达(95.41%)高于无淋巴结转移组(80.45%),m TOR在有淋巴结转移组的表达(57.80%)高于无淋巴结转移组(35.33%)(P<0.05),Beclin1过表达与大肠癌分化程度和淋巴结转移均无关(P>0.05)。LC3与Beclin1在大肠癌中表达呈正相关(rs=0.593,P<0.01),与m TOR表达呈负相关(rs=-0.165,P<0.01),Beclin1和m TOR表达之间无明显相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Beclin1和LC3均阳性、m TOR阴性、无淋巴结转移的大肠癌患者5年生存率高于Beclin1和LC3均阴性、m TOR阳性及有淋巴结转移的患者。多因素分析显示,LC3、m TOR和淋巴结转移是影响大肠癌预后的独立因素。RT-PCR和Western blot检测结果显示:Beclin1、LC3和m TOR mRNA和蛋白表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05)。结论自噬相关基因Beclin1、LC3和m TOR的异常表达可能与大肠癌的发生、发展及预后相关;联合检测Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达有助于评估进展程度和预后判断。 吴淑华 胡金龙 何双 温菲菲 孙晨博 田东关键词:大肠肿瘤 BECLIN1 LC3 自噬相关基因Beclin1、LC3与大肠癌多药耐药性的相关性 被引量:3 2014年 目的检测自噬相关基因Beclin1、LC3和多药耐药基因LRP、GST-π、TopoⅡ在大肠癌中的表达,探讨自噬对大肠癌多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的影响。方法应用免疫组化EnVision法检测202例大肠癌中Beclin1、LC3、LRP、GST-π和TopoⅡ的表达,并结合临床病理参数进行分析。结果 Beclin1和LC3蛋白在大肠癌中的阳性率(90.10%、86.63%)均明显高于正常大肠黏膜(48.0%、40.0%),差异具有统计学意义(P<0.05),且LC3蛋白在中+低分化大肠癌中的表达(92.52%、90.00%)高于高分化大肠癌(72.73%),在淋巴结转移组的表达(94.31%)高于无淋巴结转移组(80.70%),差异具有统计学意义(P<0.05)。LRP、GST-π和TopoⅡ在大肠癌中的阳性率分别为94.55%、71.78%和97.03%,且TopoⅡ在大肠癌男性患者中的表达(100%)略高于女性患者(93.88%),差异具有统计学意义(P<0.05)。经Spearman相关性分析,在大肠癌中,Beclin1蛋白表达与LC3、LRP及GST-π蛋白表达均呈正相关,相关系数分别为0.552、0.140和0.160(P<0.05);LC3蛋白表达与LRP、GST-π蛋白表达均呈正相关,相关系数分别为0.162和0.142(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Beclin1阳性、LC3阳性、GST-π阴性、无淋巴结转移者5年生存率高于Beclin1阴性、LC3阴性、GST-π阳性及淋巴结转移者,多因素分析显示,LC3、GST-π和淋巴结转移是影响大肠癌患者术后生存的独立因素。结论 Beclin1、LC3在大肠癌组织中表达增加,可能与大肠癌的发生、发展及MDR有关;检测Beclin1、LC3蛋白表达对判断大肠癌的预后以及合理筛选有效的化疗药物具有重要参考价值。 胡金龙 何双 孙晨博 吴淑华关键词:结直肠肿瘤 BECLIN1 LC3 MDR 自噬调控因子beclin1及mTOR在大肠腺瘤癌变过程中的表达及意义 被引量:9 2014年 目的:研究自噬相关因子beclin1、mTOR及LC3-B在大肠腺瘤癌变过程中的表达差异,并探讨与临床病理因素之间的相关性.方法:采用免疫组织化学方法,在结直肠6 0例低级别上皮内瘤变腺瘤(l o w-g r a d e intraepithelial neoplasia,LGIN)、60例高级别上皮内瘤变腺瘤(high-grade intraepithelial neoplasia,HGIN)、80例腺瘤癌变组织及30例正常黏膜组织中检测beclin1、mTOR及LC3-B的表达,并分析其相关性以及与临床病理因素的关系.结果:(1)beclin1与LC3-B在腺瘤癌变组中的表达明显高于LGIN组及正常肠黏膜(P<0.05),但与HGIN组无差别(P>0.05),mTOR在腺瘤癌变组中的表达高于其他3组(P<0.05),在HGIN与LGIN组中的表达无统计学意义(P>0.05),但均高于正常肠黏膜组(P<0.05);(2)在腺瘤癌变组中,beclin1与LC3-B表达与肿瘤的大小有关,mTOR及表达与肿瘤的大小及浸润有关,而在LGIN腺瘤组与HGIN腺瘤组三者与各临床病理因素无相关性;(3)beclin1与LC3-B两者在LGIN腺瘤组、HGIN腺瘤组及腺瘤癌变组中的表达均呈正相关(r=0.390、r=0.306、r=0.443,P<0.05);mTOR与LC3-B在HGIN腺瘤组及腺瘤癌变组中的表达呈正相关(r=0.284、r=0.223,P<0.05),而在LGIN腺瘤组中无相关.结论:自噬及其调控因子beclin1、mTOR可能在大肠腺瘤恶性转化中发挥重要作用,与腺瘤癌变进展密切相关. 何双 吴淑华 胡金龙 温菲菲 孙晨博关键词:腺瘤癌变 自噬 BECLIN1 MTOR 自噬相关基因在大肠癌中的表达及意义的相关性研究 目的研究自噬相关基因Beclin1、mTOR、ULK1和LC3在大肠癌组织中的表达及其相关性,并结合相关临床病理因素分析,探讨自噬在大肠癌发生发展中的作用;检测多药耐药(MDR)蛋白LRP、GST-π和TOPO Ⅱ在大肠... 胡金龙关键词:BECLIN1 MTOR LC3 大肠癌 文献传递 RNA干扰靶向抑制自噬调控基因Beclin 1对结肠癌细胞株HCT116自噬活性及增殖/凋亡的影响 被引量:6 2014年 目的应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制自噬调控基因Beclin 1的表达,检测Beclin 1表达对mTOR、ULK1、LC3-B的表达以及对HCT116细胞株增殖与凋亡的影响。方法设计4条针对Beclin 1基因的干扰RNA表达载体及阴性对照载体分别瞬时转染HCT116细胞。采用RT-PCR及Western blot法筛选出1条抑制率最高的Beclin 1干扰序列后,瞬时转染HCT116细胞,检测mTOR、ULK1及LC3-B的mRNA及蛋白表达,CCK-8实验检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 (1)转染细胞后,BECN1-1245组mRNA及蛋白抑制率最高,达80%。(2)RT-PCR结果显示,BECN1-1245组转染细胞48 h后,与阴性对照组相比,ULK1与LC3-B mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(P≤0.05),mTOR在两组中的表达无差异(P>0.05),Western blot法检测结果与之相同。(3)CCK-8细胞增殖实验显示,BECN1-1245组转染24、48、72 h后,细胞生存率较阴性对照组明显降低(P≤0.05)。(4)流式细胞仪检测结果显示,BECN1-1245组转染48 h后,与阴性对照组细胞相比,细胞凋亡率明显升高(P≤0.05)。结论 Beclin 1在HCT116细胞自噬中发挥重要的调控作用,抑制Beclin 1的表达,可抑制细胞的自噬活性,并能抑制细胞增殖,促进其凋亡,推测Beclin 1基因可作为结肠癌治疗的新靶点。 吴淑华 何双 胡金龙 温菲菲 孙晨博 田东关键词:自噬 RNA干扰 增殖 凋亡 BECLIN HCT116