高晓萍
- 作品数：2 被引量：20H指数：2
- 供职机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 嗜肺军团菌荧光定量PCR检测被引量：17
- 2008年
- 目的建立特异、快速、敏感的TaqMan探针荧光定量PCR方法,用于检测嗜肺军团菌mip基因。方法嗜肺军团菌及其他军团菌DNA模板来自中国疾病预防控制中心呼吸道室,嗜肺军团菌地方株及其他对照株由本中心菌种室供给。利用嗜肺军团菌mip基因保守序列设计引物和TaqMan探针,对其进行筛选,同时对荧光定量PCR反应条件和反应体系进行优化,并对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及其他细菌进行检测,验证该方法的特异性、敏感性、重复性等。结果该方法在检测多株嗜肺军团菌时,均出现阳性信号,而对非嗜肺军团菌和其他细菌则未有阳性扩增结果出现。检测灵敏度达10个拷贝/反应,从菌株核酸的提取至检测完成仅需2 h左右,可减少常规PCR操作的污染机会。结论TaqMan荧光定量PCR方法可定量检测嗜肺军团菌,具有特异性高、快速、敏感等特点,适于外环境污染源状况的调查及应急事件的快速定量检测。
- 朱水荣张政卢亦愚任红宇扬仕贵高晓萍
- 关键词：嗜肺军团菌MIP基因TAQMAN探针荧光定量PCR
- 浙江省2005～2007年流行性脑脊髓膜炎病原学监测及分子分型研究被引量：3
- 2008年
- 目的对浙江省2005～2007年流行性脑脊髓膜炎（流脑）病原学监测结果进行分析，了解脑膜炎奈瑟菌（Neisseria Meningitidis，Nm）的菌群分布、变迁、耐药状况及分子分型特征。方法常规方法做表型鉴定，聚合酶链反应（PCR）特异性引物扩增，脉冲场凝胶电泳（PFGE）参考中国疾病预防控制中心（CDC）传染病预防控制所推荐的方法进行；药物敏感试验参考美国临床和实验室标准机构（CLSI-2007）制定的标准进行。结果116株疑似Nm的血清群构成比分别为：A群52．58％，B群15．52％，C群31．90％；从病人分离的49株中，A群占61．23％，C群占32．65％，而B群仅占6．12％。菌株对环丙沙星、奈啶酸、甲氧苄氨嘧啶产生不同程度耐药，但对青霉素、氨苄西林、美罗培南、氯霉素敏感，分离自不同人群的血清群菌株的耐药性有一定差异。PFGE酶切图谱及聚类分析发现，相同血清群的病人和其密切接触者的分离菌株的PFGE酶切图谱相似度达100％，属同一克隆系；A群和C群菌株的PFGE酶切图谱相似度相对较高，亲缘关系较近，分别有一定相关性，各存在一紧密相关的流行克隆群；B群菌株PFGE酶切图谱呈现较高的多态性。结论浙江省Nm流行菌群正在发生变迁，目前仍以A群为主，但C群是近年来新出现的主要致病血清群。分子分型结果也显示，浙江省存在优势克隆群的A群和C群主要流行菌株。青霉素、氨苄西林、美罗培南、氯霉素类仍可作为浙江省治疗流脑的首选药物。鉴于多数人群对C群Nm缺乏免疫力，以及C群流脑的高病死率，应密切关注C群流脑的发生，以防C群流脑的爆发或流行。
- 朱水荣徐宝祥张政余昭高晓萍崔志刚
- 关键词：流行性脑脊髓膜炎菌群分布耐药脉冲场凝胶电泳
