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张湘忠
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
西安交通大学医学院第一附属医院
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发文基金:
陕西省科技攻关计划
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
杨成成
西安交通大学医学院第一附属医院
李世森
西安交通大学医学院第一附属医院
李晓军
西安交通大学医学院第一附属医院
杨斌
西安交通大学医学院第一附属医院
秦思达
西安交通大学医学院第一附属医院
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作者
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任宏
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张湘忠
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杨成成
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细胞与分子免...
年份
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2011
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pcDNA3.1-Smac真核表达载体的构建及表达
被引量:1
2011年
目的:构建人的smac基因真核表达载体pcDNA3.1-Smac,并在肺腺癌A549细胞中表达。方法:采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从人睾丸组织中扩增到smac基因,构建重组真核表达载体pcDNA3.1-Smac。酶切及测序鉴定重组质粒正确后,脂质体介导转染至肺腺癌A549细胞中。采用RT-PCR、Westernblot法检测外源基因smac的表达,MTT法检测细胞生长抑制率。结果:PCR扩增片段与预期片段大小相符,插入片段测序结果与GenBank公布的一致,表明人smac基因克隆及真核表达载体pcDNA3.1-Smac构建成功。在mRNA水平和蛋白水平,转染后的细胞中外源基因smac表达均明显增加。转染smac质粒72h后,细胞的生长抑制率较转染空质粒组显著增加。结论:成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1-Smac,并在肺癌A549细胞中进行了表达;验证了转染后对肺癌细胞生长有抑制作用。
秦思达
任宏
李晓军
杨成成
杨斌
张湘忠
李世森
胡丽娟
关键词:
SMAC基因
细胞转染
真核表达载体
A549细胞
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