李佳欣
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 流体剪切敏感型海洋灰绿曲霉AgugtA和AgugeA基因的克隆及功能分析被引量：1
- 2015年
- 摘要：海洋灰绿曲霉HB1—19的高度剪切敏感性给反应器发酵造成很大困难。曲霉中的UDP-半乳糖基转移酶UgtA和UDP-葡萄糖差向异构酶UgeA对细胞壁的合成起着重要的作用。本文拟研究海洋灰绿曲霉中这两种酶在细胞壁合成中的作用及其与剪切敏感性的关系。首先，采用简并PCR与染色体步移技术克隆了海洋灰绿曲霉AgugtA和AgugeA的基因序列。然后，通过逆转录PCR确定了内含子及编码序列。AgugtA全长1377bp，有4个内含子，分别位于135～192，261～327，552～601，1047～1096bp之间，编码蛋白大小为383个氨基酸。AgugeA全长1322bp，有3个内含子，分别位于30～116，352～420和878～927bp之间，编码蛋白大小为371个氨基酸。通过进化树分析发现，AgugtA和AgugeA在灰绿曲霉及曲霉属其他菌株中有很高的同源性。通过比较海洋灰绿曲霉及模式茵构巢曲霉的AgugeA基因敲除及AgugeA蛋白抑制剂实验发现，AgugeA是海洋灰绿曲霉的必需基因，这可能与海洋灰绿曲霉的高度剪切敏感性有关。
- 胡伟李佳欣李晓霞蔡孟浩周祥山张元兴
- 海洋灰绿曲霉AgveA基因响应盐度胁迫的功能分析被引量：1
- 2018年
- 通过染色体步移方法克隆了基因AgveA、AgfphA、AglreA和AglreB的上下游侧翼序列,并通过逆转录确定了各个基因的内含子序列。通过实时荧光定量PCR发现,基因AgveA转录受盐度胁迫的作用下调较明显,而AgfphA、AglreA和AglreB上调较明显。通过构建打靶质粒以敲除AgveA,最终成功构建了基因缺失株ΔAgveA,并从菌丝形态、菌落形态、菌丝生长速率和细胞发育表型4个方面进行了基因功能分析。结果表明,菌株ΔAgveA的菌丝形态并未产生明显变化,而菌落的边缘存在残缺,菌丝生长速率在生长后期加快;细胞发育模式产生明显改变,AgveA基因的缺失导致海洋灰绿曲霉在高盐度胁迫条件下子囊果的合成完全受阻,而在低盐度胁迫条件下产生分生孢子的同时也形成了极少量的子囊果。
- 李佳欣刘绍梅任燕娜周祥山蔡孟浩张元兴
- 关键词：灰绿曲霉盐度胁迫细胞发育
- 海洋灰绿曲霉聚酮合酶基因的克隆与序列分析
- 2014年
- 为了研究海洋灰绿曲霉中抗肿瘤聚酮化合物灰绿霉素A的生物合成机制,需获得相关的聚酮合酶基因簇。根据灰绿霉素A合成途径推断,该化合物母核由非还原型PKS(NR-PKS)催化合成,本文使用LC系列简并引物得到灰绿曲霉中NR-PKS基因片段,再通过基因走读技术得到22.8kb的DNA序列,其含有7个完整的开放阅读框。通过BLAST分析,序列中包含1个NRPKS编码基因,全长8 451bp,命名为Agpks1。AgPks1与烟曲霉PksP、黑曲霉Alb1有很高的同源性。该工作对研究Agpks1对灰绿霉素A或其他聚酮产物合成的催化机制具有重要意义。
- 李晓霞蔡孟浩胡伟李佳欣周祥山张元兴
- 关键词：灰绿曲霉聚酮合酶
