梁宏伟
- 作品数:2 被引量:10H指数:2
- 供职机构:北京农学院动物科学技术学院兽医学(中医药)北京市重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- MTT法检测大鼠外周血淋巴细胞增殖反应探讨与应用被引量:8
- 2016年
- 为了更精准简捷地评价机体的细胞免疫状态,采用MTT比色分析法检测大鼠外周血淋巴细胞的增殖能力,并对试验的最适条件进行了探讨,然后将该法应用到Transwell共培养体系中以评价H9N2AIV感染内皮细胞后对跨内皮淋巴细胞增殖能力的影响。结果表明:在96孔细胞培养板中接种密度为1.25×106个/m L的淋巴细胞于含10%FBS的RPMI 1640培养基中培养的最适时间为48 h。感染病毒后,跨内皮淋巴细胞的增殖明显受抑制;内皮完整状态下,淋巴细胞和病毒共孵育后,活病毒的量降低,而当内皮不存在或被病毒感染后,这一现象消失。结果证明作为机体细胞免疫功能评价指标之一的淋巴细胞增殖能力可采用改良后的MTT法检测。
- 梁宏伟朱雯宇冯波王建舫张涛穆祥
- 关键词:MTT法淋巴细胞增殖细胞免疫
- 大鼠肺微血管内皮细胞的体外分离培养与纯化被引量:2
- 2016年
- 旨在建立一种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠肺微血管内皮细胞的方法。取5~7日龄SD大鼠分离外周肺组织,组织植块法获得原代大鼠肺微血管内皮细胞,37℃、5%CO_2培养箱中传代培养,采用免疫磁珠法对其进行分离纯化,并对分离纯化后的细胞进行免疫荧光及流式细胞鉴定,通过MTT比色分析法准确、安全、可靠地检测纯化后传代肺微血管内皮细胞的增殖情况。结果显示:倒置显微镜下观察单个细胞呈短梭形或多角形,汇合后呈铺路石样,单层贴壁生长,细胞分离纯化后经免疫荧光检测CD31呈阳性,流式细胞仪检测淋巴管内皮细胞表面特有标记VEGFR-3呈阴性(P=0.1,且P〈0.5),且复苏后经MTT测得传代细胞的增殖情况良好。成功建立了一种分离高纯度大鼠肺微血管内皮细胞的体外培养方法。
- 梁宏伟冯波朱雯宇王建舫张涛穆祥
- 关键词:肺微血管内皮细胞体外分离培养