王少岭
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：湖南农业大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项湖南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 抗水稻黑条矮缩病转基因材料的鉴定分析被引量：1
- 2016年
- 针对水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)的核心粒子外壳蛋白基因(S8)、毒质与非结构蛋白基因(S9)及其嵌合基因(S8&S9)构建了6个RNAi载体,经农杆菌介导转化武陵粳1号获得转基因植株。通过潮霉素溶液浸泡法对转基因植株进行初步筛选,剔除假阳性植株;再通过PCR从DNA水平进行转基因阳性鉴定;进一步通过q RT–PCR从RNA水平进行转基因表达量分析。选取q RT–PCR表达量高的单拷贝纯系S8后代进行灰飞虱传毒试验,结果表明,含有S8 RNAi片段的转基因水稻材料对RBSDV具有一定抗性。
- 尹鲜思王少岭崔益平陈秋红王国梁王志龙
- 关键词：水稻水稻黑条矮缩病转基因株系RNA荧光定量PCR
- 番茄突变体jai1-1高效筛选—再生体系的建立被引量：3
- 2013年
- 利用番茄野生型JAI1和通过不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)处理筛选得到的突变体jai1-1的子叶和下胚轴为材料进行离体组织培养,以探究不同激素组合对愈伤组织的诱导、不定芽分化及生根的影响,最后利用PCR反应验证筛选得到的材料的准确性。结果表明,1/2 MS+50μM/L MeJA是突变体jai1-1筛选的有效培养基。野生型JAI1和突变体jai1-1在MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L诱导愈伤组织的效果最好;JAI1在MS+ZT 1.0mg/L+IAA 0.1mg/L诱导分化不定芽的效率最高,而jai1-1则以MS+ZT 2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L为佳;1/2 MS+NAA 0.1 mg/L是两者诱导生根的理想培养基。
- 范锡麟王少岭肖应辉王志龙
- 关键词：番茄愈伤组织
- 两步法构建灰飞虱RNAi载体及水稻遗传转化被引量：1
- 2015年
- 灰飞虱不仅直接危害水稻,还是水稻条纹叶枯病和黑条矮缩病的传播媒介。为了探索防治灰飞虱及由灰飞虱引起的水稻病毒病的方法,本研究利用两步法快速高效构建灰飞虱RNAi载体,并应用于水稻遗传转化。针对灰飞虱的激活性蛋白激酶C受体(RACK)基因设计了一对特异性引物,通过PCR扩增一段200 bp的干扰片段,将干扰片段克隆到入门载体p ENTR,再经过LR反应使入门载体上的干扰片段整合入目的载体p ANDA,形成RNAi载体p ANDA-RACK,通过农杆菌EHA105介导的水稻转化法转入武陵粳1号,获得20株经鉴定为阳性的转基因植株,为防控灰飞虱及其传播的水稻病毒病提供了珍贵材料。
- 王少岭杜强尹鲜思金如意王志龙
- 关键词：水稻灰飞虱RNAI载体构建转基因
